产品简介:
pML-Nanoluc_PEST basic报告基因质粒是自主研发的可用于在真核细胞中进行纳米萤光素酶(Nano luciferase)报告基因检测的全新一代载体质粒,在pML-Nanoluc basic(MA0505)基础上,Nanoluc 3’端融合了PEST序列,提高了Nanoluc表征实效性,更加适用于时间维度的检测。Nanoluc萤光素酶分子量较小,仅有19.1kDa,是目前具有最佳发光性能的报告基因酶,其亮度是萤火虫(Photinus pyralis)或海肾(Renilla reniformis)萤光素酶的100倍。Nanoluc萤光素酶基于一种新型底物(furimazine),产生高亮度、辉光型生物发光。此发光反应不需要ATP参与,因此可以有效抑制背景发光,以达到最大的检测灵敏度。此外,该酶在较宽的pH范围内(pH6~8)均有活性,且没有翻译后修饰或二硫键,可均匀分布于细胞内;同时也非常适合于生物荧光共振能量转移实验(BRET;λmax = 465nm)。本报告基因质粒已经对Nano luciferase的密码子进行优化,同时对整个载体序列中几乎所有潜在的的转录因子非特异性结合位点进行了突变处理,使其更适用于报告基因检测。
pML-Nanoluc_PEST basic报告基因质粒主要用于在其多克隆位点插入特定的启动子、增强子等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性。本质粒的图谱及序列信息如下所示:
图1. pML-Nanoluc_PEST basic多克隆位点区
pML-Nanoluc_PEST basic质粒推荐使用的测序引物序列如下:
RVprimer3:5’-CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC-3’
pML-Nanoluc_PEST basic的全序列信息:
保存条件:
-20℃保存。
图2. pML-Nanoluc_PEST basic质粒图谱
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