产品简介
本品是溶于DMSO的SYBR Green I 10,000×溶液。
SYBR Green I 染料是一种直接与双链DNA (dsDNA) 结合的荧光染料，是荧光定量PCR 最常用的DNA结合染料。在定量PCR中，SYBR Green I可与双链DNA（dsDNA）非特异性结合后发出荧光，进而通过检测反应体系中的SYBR Green I 荧光强度，达到检测PCR 产物扩增量的目的。游离状态下，SYBR Green I发出微弱的荧光，一旦与dsDNA结合，其荧光增加1000倍，一个反应发出的全部荧光信号与出现的dsDNA量成比例，且会随扩增产物的增加而增加；所以通过检测PCR 反应液中的荧光信号强度，可以对目的基因进行准确定量，同时还可以测定扩增的目的DNA片段的熔解温度。
使用方式
使用时，配置PCR反应混合液，将10000×SYBR Green I浓缩液加入到PCR反应体系，使终浓度为0.5× （0.2×到1×之间调整）。以上操作建议在冰上进行。
注：① 反应液配制方法和PCR 扩增条件请参照DNA聚合酶使用说明。
② Realtime PCR 扩增仪的使用方法，请参照各仪器说明书。
质量控制
适用qPCR染料法。
运输与保存方法
-20℃，避光，有效期1年。
2~8℃运输
注意事项
1.使用浓度对荧光PCR结果的影响：SYBR Green I的使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功非常关键的因素。如果SYBR Green I的浓度过低会使荧光信号的变化降低，这就意味着低拷贝的样品可能无法检出；而在高浓度时，将会抑制PCR反应，降低PCR反应效率。所以一般在使用SYBR Green I时应根据实际情况优化使用浓度，反应的终浓度为0.2×到1×之间。
2.镁离子浓度的影响：提高镁离子浓度可以降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用。我们建议在用SYBR Green I进行荧光PCR反应时，镁离子浓度比无SYBR Green I 的普通 PCR 反应高出0.5～3mM。
数据展示
图1. 产品外观对比。组与进口竞品组无明显差异。
图2. qPCR（SYBR Green I 法）效果实测对比。提取Hela 细胞全RNA，并逆转录成cDNA文库。再以浓度梯度cDNA为模板，扩增150bp 目标基因，对比和竞品SYBR Green I的效果。由图可知，组与竞品组的Ct值差别不大，并且组的平台值高于竞品组。（仪器型号：Thermo pikoreal 96）
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