本试剂盒适用于Tris-甘氨酸电泳体系，其中包括PAGE凝胶制备所需全套试剂，只需自备超纯水和制胶器具，不需要额外加入TEMED，即可制备PAGE凝胶。所配制的浓缩胶带有颜色，便于上样。本试剂盒中过硫酸铵以溶液形式提供，可保证过硫酸铵溶液在4℃稳定保存三个月。
本试剂盒分离胶和浓缩胶缓冲液均含有SDS，只适用于变性凝胶电泳，如需要分析非变性蛋白，建议选购我公司 Native-PAGE非变性凝胶快速制备试剂盒（货号：MA0172）。
产品优势：
快速！最少需要2分钟可灌注多块凝胶，15min即可凝胶；
安全！彻底告别TEMED,避免接触过硫酸铵粉末，远离有毒试剂；
节约！一块制胶成本低于3元钱，极大程度节约经费；
可靠！省去繁琐计算稀释操作，方法更可靠，电泳效果好，条带更清晰；
实验数据：
图1.使用我公司PAGE凝胶超快速配制试剂盒10%配制丙烯酰胺凝胶后蛋白电泳考马斯亮蓝染色图片。图中左侧第一泳道为我公司预染彩虹蛋白marker (10-190KD)(货号MA0342)，其余泳道是RIPA强裂解液提取的小鼠肝脏组织和A549细胞蛋白质。
图2. 使用我公司免封闭PAGE凝胶超快速配制试剂盒10%浓度配制丙烯酰胺凝胶后蛋白免疫印记结果，实验使用使用小鼠肝脏组织提取的蛋白，一抗是GAPDH。
保存方法
本试剂盒保存于4℃，其中改良型过硫酸铵溶液长期储存置于-20℃，1年有效。
操作步骤：
I. 灌制分离胶（以一块0.75/1.00/1.50mm厚的mini胶为例）
1. 参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。
2. 取等体积的分离胶溶液（2×）和分离胶缓冲液（2×），各2 / 2.7 / 4mL，混匀。
3. 向混合溶液内加入40 / 54 / 80ul的改良型过硫酸铵溶液，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
4. 在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液，使液面距离短玻璃板上沿约1.5cm即可，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖上一层水层，使凝胶表面保持平整。
5. 室温静置6-10分钟，待分离胶和水层之间出现清晰界面后，说明胶已凝固。
II. 灌制浓缩胶（以一块0.75/1.00/1.50mm厚的mini胶为例）
1. 去除覆盖在分离胶上的水层。
2. 取等体积的浓缩胶溶液（2×）和浓缩胶缓冲液（2×），各0.5 / 0.75 / 1mL，混匀。
3. 向混合溶液内加入10 / 15 / 20ul的改良型过硫酸铵溶液，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
4. 将浓缩胶溶液加至分离胶的上层，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。将梳子慢慢插入凝胶内，避免产生气泡。
5. 静置10~15分钟，等待浓缩胶凝固，小心地拔出梳子，用注射器或枪头，吸取电泳缓冲液将加样孔冲洗干净，即可进行常规电泳操作。
注意事项
1. 蛋白条带的清晰和平直与电泳条件相关，如果需要蛋白条带更加清晰、平直，建议电泳时电压在100-120V之间，如需要加快电泳速度，可增加至150V。
2. PAGE凝胶的凝聚速度与温度和过硫酸铵的用量密切相关，可通过改变过硫酸铵的用量，控制PAGE凝胶的聚合速度，凝胶聚合过快不利于操作，应根据实际操作情况做适当的调整。
3. 本产品已加入TEMED替代品，如需进一步加速凝胶，可在配制时加入TEMED。
4. 在分离胶上层加纯水时要小心操作，加水时速度不能太快。
5. 浓缩胶缓冲液（2×）内含有染料，因染料本身性质，长期静置后会产生沉淀，使用前请轻柔混匀。
6. 本产品凝胶速度快，不需将凝胶模具放在37℃温箱或者空调热风口下，正常室温条件下配制即可。
附表1. SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围
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SDS-PAGE分离胶浓度 |
最佳分离范围 |
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6% PAGE 凝胶 |
70-300kD |
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8% PAGE 凝胶 |
30-200kD |
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10% PAGE 凝胶 |
20-80kD |
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12.5% PAGE 凝胶 |
15-60kD |
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15% PAGE 凝胶 |
10-45kD |
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