DAPI; 4,’6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐;DAPI dihydrochloride
分子式:C16H15N5·2HCl 分子量:350.25
简介: DAPI,即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride,也称DAPI dihydrochloride。DAPI的中文名称是4,6-联脒-2-苯基吲哚,是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。其作用机理与溴化乙锭(EB)等染色剂的机理类似:它们与DNA双螺旋的凹槽部分可以发生相互作用,从而与DNA的双链紧密结合。和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。结合后产生的荧光基团的吸收峰是358nm而散射峰是461nm,正好UV(紫外光)的激发波长是356nm,使得DAPI成为了一种常用的荧光检测信号。DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。用于细胞核染色时,推荐的DAPI工作浓度为0.5-10μg/ml。
物理性状及指标:
外观:……………………黄色结晶性粉末
溶解性:…………………溶于水(20mg/ml)
密度:……………………1.4100
含量:……………………>95%
Ex (nm):………………DAPI 340 ;DAPI-DNA 358
Em (nm) :……………DAPI 488 ;DAPI-DNA 461
用途及描述:科研试剂,广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面,严禁用于人体 。DAPI染色溶液(DAPI Staining Solution)是适用于所有常见细胞和组织细胞核染色的染色液。可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。也用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。与EB(ethidium bromide)相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。
配制母液
用双蒸水溶解,终浓度为1mg/ml。本产品不可以用缓冲液直接溶解。-20℃可保存1年,建议分装保存,避免反复冻融。
使用方法推荐(仅供参考)
1.配制工作液:用双蒸水或PBS稀释母液,配制成所需要的工作的浓度(0.5-10μg/ml)。
2.固定的细胞或组织染色:
对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色,则直接进行DAPI 染色。
a)对于贴壁细胞或组织切片:加入适量DAPI染色液,覆盖住样品即可。
对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
b)吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
c)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长358nm,发射波长461nm。
3. 活细胞或组织染色:
a)细胞培养物中加入适量DAPI染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。
b)在 37℃培养细胞 10~20 分钟。
c)用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长358nm,发射波长461nm。
注意事项:
●荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
●为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。(货号MA0221)
●DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:2-8℃,避光防潮密闭干燥。
运输条件:常温运输
备注:所有报价均已含国内快递费及发票费用。库存情况可能有所变动,请与我们销售人员确认为准,价格情况请直接联系我们销售人员。
我司所售出产品仅供于科研研究用途(非临床科研研究),每次销售产品行为都适用于我司网上所列明的。
TESTS |
SPECIFICATIONS |
Appearance |
Yellow powder |
Solubility |
0.1mg/ml water,clear |
Identification |
HNMR |
Fluorescence staining test |
Positive |
Purity(HPLC) |
>98% |