兔子免疫球蛋白M(IgM)elisa试剂盒
名称:兔子免疫球蛋白M(IgM)elisa试剂盒
供应商:生物
产品规格:48T/96T
方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA kit)
ELISA常用的方法主要包括双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA。
经营种类:国产/进口原装/进口分装
ELISA试剂盒用途:科研实验,不能用于临床应用
试剂盒保存:2-8℃
备注:本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
保质期:6个月,所有试剂盒均提供*新批次。
操作步骤:
(1)双抗体夹心法是检测抗原zui常用的方法。夹心法利用两种一抗对目标抗原进行捕获和固定,在确保灵敏度的同时大大提高了反应的特异性,该方法的检测灵敏度可提高到pg级的水平。将已知抗体包被到固相表面,加入待检标本,标本中若含有相应抗原即与固相表面的抗体结合,洗涤去除未结合成分,加入该抗原特异的酶标记抗体,洗去未结合的酶标记抗体,加底物后显色。若标本中无相应抗原,固相表面即无抗原结合,加入的酶标记抗体则不能结合于固相并被洗涤去除,当加入无色底物后,因无酶催化故不显色。双抗体夹心法适用于测定2价或2价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。
(2)间接法是检测抗体zui常用的方法,其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体,故称为间接法。先将待测的蛋白包被在孔板内,然后依次加入一抗、酶标记u akn 的二抗和底物显色,通过仪器(例如酶标仪)定量检测抗原。这种方法操作简单但由于高背景而特异性较差,目前已逐渐被夹心法取代。间接法的优点是只要变换包被抗原就可利用同一酶标二抗建立检测相应抗体的方法。间接法成功的关键在于抗原的纯度。间接法中另一种干扰因素为正常血清中所含的高浓度的非特异性抗体。
(3)竞争法可用于测定抗原,也可用于测定抗体。当抗原材料中的干扰物质不易除去,或不易得到足够的纯化抗原时,可用此法检测特异性抗体。其原理为标本中的抗体一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。标本中抗体量越多,结合在固相上的酶标抗体愈少,因此阳性反应呈色浅于阴性反应。如抗原为高纯度的,可直接包被于固相。如抗原中有干扰物质,直接包被不易成功,可采用捕获包被法,即先包被与固相抗原相应的抗体,然后加入抗原,形成固相抗原。洗涤除去抗原中的杂质,然后再加入标本和酶标抗体进行竞争结合反应。小分子抗原或半抗原因缺乏可用于夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗体夹心法进行测定,可以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的酶标抗原愈少,zui后的显色也愈浅。
试剂盒组成:
封板膜:2片(48)/2片(96)
说明书:1份
密封袋:1个
标准品: 2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存
样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
终止液: 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存
兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒 操作流程:
1. elisa试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔一孔OD值的),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请*后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.严格按说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
6.本试剂不同批号组分不得混用。
7.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.底物请避光保存。
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