小反刍疫抗体检测试剂盒
名称:小反刍疫抗体检测试剂盒
英文名:Small detection kit for antibody detection of the antibody to the detection of the kit(ELISA)
供应商:生物
产地:国产|进口
检测样本:血清
检测方法:酶联免疫法
产品规格:96T×1/盒、96T×2/盒、96T*5/盒
保质期:12个月
储藏:4~30℃密封干燥保存,忌冷冻,避免阳光直射。
小反刍疫抗体检测试剂盒使用说明书 试剂盒原理:
应用酶联免疫法(ELISA)原理检测猪血清、血浆样本中猪细小病毒抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本,经温育后若样品中含有猪细小病毒抗体,则将与酶标板上抗原结合,经洗涤除去未结合的其他成分后;再加入酶标记物,与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有猪细小病毒抗体。
【试剂盒组成】
序号
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名称
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规格(96T×1)
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规格(96T×2)
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1.
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酶标板
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96T×1
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96T×2
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2.
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酶标记物 (红盖)
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11ml×1
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11ml×2
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3.
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样品稀释液 (黄盖)
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50ml×1
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50ml×1
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4.
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20X浓缩洗涤液
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40ml×1
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40ml×1
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5.
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底物液A (白盖)
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6ml×1
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11ml×1
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6.
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底物液B (黑盖)
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6ml×1
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11ml×1
|
7.
|
终止液 (黄盖)
|
6ml×1
|
11ml×1
|
8.
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阳性对照 (红盖)
|
1.0 ml×1
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1.5 ml×1
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9.
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阴性对照 (绿盖)
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1.0 ml×1
|
1.5 ml×1
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10.
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盖板膜
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1张
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2张
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11.
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自封袋
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1个
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1个
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12.
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说明书
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1份
|
1份
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操作步骤
一、样品准备
1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
2.用样品稀释液将待检血清按40倍稀释(如5μl血清加入195μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
二、检验方法
1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3.空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4.混匀,置37℃反应30分钟。
5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
6.每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
7.洗涤,同步骤5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。
结果分析
一、参考值
实验正常的情况下,阴性对照≤0.10,阳性对照≥0.6。
二、检验结果的解释
1.样品A值≥0.38为阳性;样品A值在0.2到0.38之间为可疑;样品A值<0.2为阴性。
2.本实验结果为阴性或可疑时表明猪只抗体水平不足,建议补打相应疫苗。
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