小反刍疫抗体检测试剂盒使用说明书

小反刍疫抗体检测试剂盒

名称:小反刍疫抗体检测试剂盒
英文名:Small detection kit for antibody detection of the antibody to the detection of the kit(ELISA)
供应商:生物
产地:国产|进口
检测样本:血清
检测方法:酶联免疫法
产品规格:96T×1/盒、96T×2/盒、96T*5/盒
保质期:12个月
储藏:4~30℃密封干燥保存,忌冷冻,避免阳光直射。

小反刍疫抗体检测试剂盒使用说明书 试剂盒原理:
应用酶联免疫法(ELISA)原理检测猪血清、血浆样本中猪细小病毒抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本,经温育后若样品中含有猪细小病毒抗体,则将与酶标板上抗原结合,经洗涤除去未结合的其他成分后;再加入酶标记物,与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有猪细小病毒抗体。

【试剂盒组成】

序号
名称
规格(96T×1)
规格(96T×2)
1.
酶标板
96T×1
96T×2
2.
酶标记物  (红盖)
11ml×1
11ml×2
3.
样品稀释液 (黄盖)
50ml×1
50ml×1
4.
20X浓缩洗涤液
40ml×1
40ml×1
5.
底物液A  (白盖)
6ml×1
11ml×1
6.
底物液B  (黑盖) 
6ml×1
11ml×1
7.
终止液  (黄盖) 
6ml×1
11ml×1
8.
阳性对照  (红盖)
1.0 ml×1
1.5 ml×1
9.
阴性对照  (绿盖)
1.0 ml×1
1.5 ml×1
10.
盖板膜
1张
2张
11.
自封袋
1个
1个
12.
说明书
1份
1份

操作步骤
一、样品准备
1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
2.用样品稀释液将待检血清按40倍稀释(如5μl血清加入195μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
二、检验方法
1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3.空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4.混匀,置37℃反应30分钟。
5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
6.每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
7.洗涤,同步骤5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。

结果分析
一、参考值
实验正常的情况下,阴性对照≤0.10,阳性对照≥0.6。
二、检验结果的解释
1.样品A值≥0.38为阳性;样品A值在0.2到0.38之间为可疑;样品A值<0.2为阴性。
2.本实验结果为阴性或可疑时表明猪只抗体水平不足,建议补打相应疫苗。

 
注意事项
1.实验操作时需戴手套、穿工作衣,严格健全和执行消毒隔离制度,各种实验废弃物都应按传染物处理。
2.终止液具有腐蚀性,应避免接触皮肤和衣物,如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。
3.微孔板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋,未用完的微孔板需放入有干燥剂的密封袋中保存(包被板开封后请于2~8℃避光保存,使用期限为1个月)。
4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶,使用时需恢复至室温以完全溶解。
5.洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。
6.用于检测的样品应保持新鲜。
7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
8.不同批号试剂组分不得混用。

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原创作者:上海生物科技有限公司

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