猪细小病毒IgG抗体检测试剂盒操作步骤

猪细小病毒IgG抗体检测试剂盒

名称：猪细小病毒IgG抗体检测试剂盒
英文名：Diagnostic Kit for Antibodies to Porcine parvovirus (ELISA)
供应商：生物
产地：国产|进口
检测样本：血清
检测方法：酶联免疫法
产品规格：96T×1/盒、96T×2/盒、96T*5/盒
保质期：12个月
储藏：4～30℃密封干燥保存，忌冷冻，避免阳光直射。
预期用途：猪细小病毒（Porcine parvovirus，PPV）可引起猪的繁殖障碍病，其特征为受感染的母猪产出死胎、畸形胎、木乃伊胎及病弱仔猪。
猪细小病毒IgG抗体检测试剂盒用于检测猪血清、血浆中猪细小病毒抗体，可用于猪细小病毒疫苗免疫效果评价。

猪细小病毒IgG抗体检测试剂盒操作步骤  试剂盒原理：
猪细小病毒IgG抗体检测试剂盒系由预包被猪细小病毒抗原的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成，应用酶联免疫法（ELISA）原理检测猪血清、血浆样本中猪细小病毒抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本，经温育后若样品中含有猪细小病毒抗体，则将与酶标板上抗原结合，经洗涤除去未结合的其他成分后；再加入酶标记物，与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有猪细小病毒抗体。

【试剂盒组成】

【检验方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3.空白对照孔加样品稀释液100μl；阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4.混匀，置37℃反应30分钟。
5.扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
6.每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟。
7.洗涤，同步骤5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。

9.每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A值）。
【参考值】 实验正常的情况下，阴性对照≤0.10，阳性对照≥0.6。
【检验结果的解释】
1.样品A值≥0.38为阳性；样品A值在0.2到0.38之间为可疑；样品A值＜0.2为阴性。
2.本实验结果为阴性或可疑时表明猪只抗体水平不足，建议补打相应疫苗。
【试验方法的局限性】该试验仅作为定性检测猪血清、血浆中猪乙型脑炎病毒抗体，根据A值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。

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