鸡禽流感 H5抗体检测试剂盒说明书

鸡禽流感 H5抗体检测试剂盒

名称：鸡禽流感 H5抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名：Diagnostic Kit for Chicken H5N1 antibody IgG ELISA kit
供应商：生物
产地：国产|进口
检测样本：血清
检测方法：酶联免疫法
产品规格：96T×1/盒、96T×2/盒、96T*5/盒
保质期：12个月
储藏：4～30℃密封干燥保存，忌冷冻，避免阳光直射。
本试剂盒采用ELISA方法检测鸡血清中的特异性抗禽流感病毒抗体。本试剂灵敏度高，特异性强，重复性好，操作方便快速，可分多次使用。

鸡禽流感 H5抗体检测试剂盒说明书【试验原理】
禽流感是由禽流感病毒(Avian influenza virus ,AIV)引起的一种禽类急性高度致病性传染病。本病以急性败血性死亡到无症状带毒等多种病症为特点，禽类感染后体内会产生特异性抗体。检测特异性禽流感病毒抗体可作为该病疫苗免疫状况及该病辅助检测指标。
      

【储存及有效期】 于2～8℃避光保存，有效期为12个月。
包被板开封后请于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限为2个月。
【适用仪器】 含450nm、630nm波长的酶标仪，37℃恒温设备，可调微量移液器。
【样品准备】
1.取动物全血按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品1周内可于2～8℃保存，长期需置-20℃保存。
2.用样品稀释液将待检血清按100倍稀释（如2μl血清加入198μl样品稀释液中，混匀）。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。

【检验方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3.空白对照孔加样品稀释液100μl；阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4.混匀，置37℃反应30分钟。
5.扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
6.每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟。
7.洗涤，同步骤5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A值）。
【参考值】 实验正常的情况下，阴性对照≤0.20，阳性对照≥0.6。

【检验结果的解释】
1.C.O（临界值）=0.13+阴性对照孔均值（阴性对照孔均值低于0.07时以0.07计算）；
2.未曾免疫鸡群：样品A值≥C.O为阳性；样品A值＜C.O为阴性。
3.免疫鸡群：监测并记录样本当时的抗体水平，根据结果分析抗体水平的分布及鸡群免疫状态的动向。
【试验方法的局限性】该试验仅作为定性检测鸡血清或血浆中禽流感病毒IgG抗体，根据A值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。

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