公司介绍:上海生物专业供应pET-28a(+)大肠杆菌蛋白表达载体,大肠系列质粒,质粒载体,pET-11c(+)大肠杆菌质粒载体,pGEX-6P-3载体,pUC19载体,pUC18载体,其他大肠系列质粒载体,进口/国产elisa试剂盒,动物血清,标准品,培养基,抗体,化学试剂,溶液,实验耗材,其他科研试剂,开学之际,本司推出了一系列优惠活动回馈新老客户,欢迎来电订购!
名称:pET-28a(+)大肠杆菌蛋白表达载体,大肠系列质粒
质粒名称: pET-28a(+)
别名:pet28a, pet 28a, pET-28a(+)
供应商:上海
产品规格:5μg
质粒类型:大肠杆菌蛋白表达
表达水平:高
克隆方法:多克隆位点,限制性内切酶
载体大小:5369 bp
5' 测序引物及序列:T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'
3' 测序引物序列: T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'
载体标签:N-His, N-Thrombin, N-T7, C-His
载体抗性:卡那霉素
表达宿主菌:BL21(DE3) 、BLR(DE3)、BL21(DE3)pLysS
备注:N端含有Thrombin蛋白酶切位点; pET28a, b, c的差异仅仅存在于多克隆位点处。
稳定性:瞬时表达 Transient
组成型:组成型 Constitutive
病毒/非病毒:非病毒
表达水平: High
蛋白标签: N-His, N-T7, C-His
其他属性: Nterm thrombin cleavage site; a,b,c vary by MCS
pET-28a(+)大肠杆菌蛋白表达载体,大肠系列质粒图谱:
PET-28a载体知识:
PET-28a表达载体具有T7启动子及lac调控子,需要较高的IPTG起始浓度才能启动有效表达,可使用1mM-2mM,提高IPTG的浓度。PET系列载体的高效表达特性,所以致使表达的蛋白很可能为包涵体,可溶性表达少一些, 一般来说,如果PET整合蛋白的表达量很少,建议使用的表达条件为:
1、菌体复壮:挑取单菌落,在含1%葡萄糖的LB培养基中,37度摇菌过夜。
2、表达:以1:100的比例,加入复壮后的菌液,使用含1%葡萄糖的LB培养基,37度摇菌至OD600值达0.3-0.5时加入终浓度为1-2mM的IPTG,37度摇菌6-8小时,或30度摇菌过夜。
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