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中文名称:牛肉膏蛋白胨琼脂培养基
产品英文名称:Beef Extract Peptone?Agar
产品规格:250g
类别:天然矿泉水检验培养基
供应商:上海
储存方式:请放置阴凉干燥处保存。
产品说明与用途:细菌计数、不含糖,可作血琼脂基础和传代用(GB标准)
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用*广泛和*普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供无机盐。在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
配方:
牛肉膏:3.0g
蛋白胨:10.0g
NaCl:5.0g
琼脂:15-25g
水:1000ml
pH:7.4-7.6
步骤
称量
按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯。也可放在称量纸上,称量后直接放入水中,这时如稍微加热,牛肉膏便会与称量纸分离,然后立即取出纸片。蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速。另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错。
溶化
在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。如果配制固体培养基,将称好的琼脂放入已溶化的药品中,再加热溶化,在琼脂溶化的过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂。*后补足所失的水分。
调pH
在未调pH前,先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值,如果pH偏酸,用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸测其pH值,直至pH达7.6。反之,则用1mol/L HCl进行调节。注意pH值不要调过头,以避免回调,否则,将会影响培养基内各离子的浓度。
对于有些要求pH值较精确的微生物,其pH的调节可用酸度计进行(使用方法,可参考有关说明书)。
过滤
趁热用滤纸或多层纱布过滤,以利结果的观察。一般无特殊要求的情况下,这一步可以省去(本实验无需过滤)。
分装
按实验要求,可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。
分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。
(1)液体分装分装高度以试管高度的1/4左右为宜。
(2)固体分装分装试管,其装量不超过管高的1/5,灭菌后制成斜面,如图Ⅴ-2。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
(3)半固体分装试管一般以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。
加塞:培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞,以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染,并保证有良好的通气性能(棉塞制作方法附本实验后面)。
包扎:加塞后,将全部试管用麻绳捆扎好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、组别、日期。三角烧瓶加塞后,外包牛皮纸,用麻绳以活结形式扎好,使用时容易解开,同样用记号笔注明培养基名称、组别、日期。
灭菌:将上述培养基以1.05kg/cm2(15磅/英寸2),121.3℃, 20分钟高压蒸汽灭菌。如因特殊情况不能及时灭菌,则应放入冰箱内暂存。
搁置斜面:将灭菌的试管培养基冷至50℃左右,将试管棉塞端搁在玻棒上,搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。
无菌检查:将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时,以检查灭菌是否彻底。
简要步骤:在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2~7.6,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌:1.05千克每平方厘米、121摄氏度维持15~30分钟。
牛肉膏蛋白胨琼脂培养基 相关信息:
CAS:121062-08-6,MelanotanIIacetatesalt
CAS:51749-83-8,1,8-二蒽,90%
CAS:541-16-2,丙二酸二叔丁酯
CAS:280556-71-0,4-(4-吗啉基)苄醇
CAS:22526-47-2,(S)-3,3-二甲基-2-丁胺,99+%
CAS:603-83-8,2-甲基-3-硝基苯胺
CAS:31677-93-7,安非他酮
CAS:98-98-6,2-吡啶甲酸
57-11-4,硬脂酸
CAS:147-85-3,L-脯氨酸标准品|对照品
CAS:9003-98-9,DNA酶
CAS:5350-57-2,二苯甲酮腙
CAS:13826-35-2,3-苯氧苄醇,98%
CAS:1401-55-4,单宁酸
CAS:36589-29-4,L-精氨酸乙酯二盐,98%
CAS:719-80-2,二苯基乙氧基膦
CAS:57-74-9,氯丹,分析标准品
CAS:4187-56-8,(S)-(-)-1-(4-)乙胺
CAS:327601-97-8,大果桉醛 L标准品|对照品
CAS:870-24-6,2-氯乙胺盐,98%
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