产品资料 – 蛋白表达和纯化技术 – 表达系统 ：大肠杆菌
pMAL-c6T 载体
#N0378S 10 µg
特性
·pMAL-c6T 是 NEBExpress® MBP 融合表达及纯化系统（NEB＃E8201）中推荐的载体
·目标蛋白与 MBP 融合表达可显著增强其在大肠杆菌中的溶解度和正确折叠（1）
·载体包含 His-tag 和 TEV 蛋白酶识别位点，使用 TEV 蛋白酶（NEB＃P8112）可将目标蛋白从 MBP 上切下来
·两步纯化：Amylose 树脂洗脱后进行 TEV 蛋白酶切割和 Ni 树脂分离，终产物为高纯度、无标签的靶蛋白
·经设计改造，MBP 可更紧密的结合到 Amylose 树脂上。
·具有氨苄青霉素抗性
概述
pMAL-c6T 载体提供了一种从克隆基因或开放阅读框到蛋白表达的方法。克隆基因插入到大肠杆菌的 malE 基因下游，malE 基因编码麦芽糖结合蛋白（MBP），从而使 MBP 融合蛋白在细胞质中表达（1，2）。MBP 经设计改造，可更紧密的结合到 Amylose 树脂上。该方法利用 “tac” 强启动子和 malE 翻译起始信号，使克隆序列得到高水平表达（3，4），同时可利用 MBP 对麦芽糖的亲和力，一步纯化融合蛋白（5）。该载体表达 N 端六组氨酸标记的 malE 基因（缺少分泌信号序列），随后是包含 TEV 蛋白酶识别序列的多克隆酶切位点，以及三位终止密码子。从而可在纯化后，使用 TEV 蛋白酶将 MBP 从目标蛋白上切下来。该载体还携带 lacIq 基因，该基因编码 Lac 阻遏蛋白。在没有 IPTG 诱导的情况下，可使 Ptac 低水平表达
pMAL-c6T 载体的 malE 基因上具有明确的信号序列缺失，箭头指示转录方向，多克隆酶切位点（MCS）中标注了限制性内切酶位点
产品来源
NEB-10 beta competent E. coli （pMAL-c6T）
亲和标记
麦芽糖结合蛋白（MBP）
储存温度
-20°C
序列信息
Fasta GenBank