产品资料 – 蛋白表达和纯化技术 – 表达系统 ：大肠杆菌
NEBExpress™ 镍离心柱
#S1427L25 columns
#S1427S10 columns
特性
包括即用型预装镍离心柱和纯化所需的所有缓冲液
每个离心柱可纯化≥1 mg His 标记的蛋白，仅需 15 分钟
高特异性结合带有组氨酸标签的蛋白质，分离纯化后纯度>95％
牢固的镍离子结合使其对 EDTA 和还原剂有极好的耐受性。与市场上基于去污剂的细胞裂解试剂兼容
可在天然或变性条件下分离和纯化组氨酸标签蛋白
概述
镍离心柱包含亲和基质，用于小规模分离和纯化带有多组氨酸标签（His 标签）的融合蛋白。使用 NEBExpress™ 镍离心柱进行固定化金属亲和层析（IMAC）可以在天然或变性条件下进行纯化，从而一步纯化即可获得高纯度的蛋白质。使筛选表达条件及简化靶蛋白的功能和结构研究成为可能。
支持基质：
球形，基于琼脂糖的微粒，尺寸为 10-100 μm。
图1：NEBExpress™ 镍离心柱快速使用指南
图2：使用 NEBExpress™ 镍离心柱纯化 His 标记的融合蛋白
平衡 NEBExpress 镍离心柱，并加入 500 μl 大肠杆菌粗提物，其中含有表达 His6-GluRS 或 His6-NDK 融合蛋白的质粒。经洗涤、洗脱、跑 SDS-PAGE 胶检测，以确认靶蛋白的高度分离和极地的非特异性蛋白结合。Marker（M）包含彩色预染蛋白 Standard（NEB＃P7719），第 1 道：GluRS 蛋白质上样液，第 2 道：GluRS 经流液，第 3 道：GluRS 第一次洗脱，第 4 道：GluRS 第二次洗脱，第 5 道：NDK 蛋白质上样液，第 6 道：NDK 经流液，第 7 道：NDK 第一次洗脱，第 8 道：NDK 第二次洗脱。
随产品提供的试剂：
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储存温度(°C) |
浓度 |
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2X IMAC Buffer |
4 |
2 X |
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2M Imidazole |
2 M |
产品类别：树脂、磁珠和磁力架产品、蛋白表达和纯化产品
应用：标记蛋白的表达，偶联蛋白的表达和纯化
储存温度：4°C
储存条件：20% 乙醇
Binding Capacity
Varies with target, ≥ 1 mg His-tagged fusion protein per column.
结合能力：结合量随靶标变化，每个柱子可结合≥1 mg 带有His标签的融合蛋白