产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶
ShortCut® RNase III
#M0245L 1,000 units
#M0245S 200 units
特性
为 RNA 干扰研究提供 siRNA
基因沉默
靶标确认
去除 dsRNAs
去除 dsRNAs
概述
ShortCut RNase III 能将较长双链 RNA 切割成一组大小不同的由 18-25 bp 组成的小片段干扰RNA(siRNA),更适合用于哺乳动物细胞的 RNA干扰实验。用 1.5 个单位(1 μl)的 ShortCut RNase III 能够将 1 μg 的 dsRNA 完全切割成 siRNA。
来源
重组 E. coli 菌株,克隆表达融合有麦芽糖结合蛋白(MBP)的 E. coli RNase III 基因(rnc)。
反应条件
1X ShortCut RNase III 反应缓冲液 [50 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM DTT(pH 7.5 @ 25℃)]。补加 20 mM MnCl2(随产品提供),37℃ 温育。
质保声明
无核酸内切酶和核酸外切酶污染。
单位定义
1 单位指 50 μl 的反应体系中,37℃ 条件下,20 分钟将 1 μg dsRNA 切割成 siRNA 所需要的酶量。
浓度
2,000 units/ml。
上海金畔生物科技有限公司官网,NEB代理,订购热线:18301939375
有关该产品特性和应用的上海金畔生物科技有限公司官网,NEB代理,订购热线:18301939375。
ShortCut RNase III 的优势
制备适合任何基因靶点的有效 siRNA
异源 siRNA 可以确保沉默靶基因
从 DNA 模板到转染只需要一天
避免了使用合成 siRNA 需反复摸索实验条件的问题
避免了使用合成 siRNA 需反复摸索实验条件的问题
图:使用 ShortCut RNase III 制备的 siRNA:A) 不同单位数量的 ShortCut RNase III 与 2 μg 500 bp 的 dsRNA 孵育 20 分钟。B) 用 ShortCut RNase III 消化 dsRNA 片段(1 kb 和 175 bp)。消化产物通过 20% TBE 聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分析。