产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶
核酸外切酶 T
#M0265L 1,250 units
#M0265S 250 units
特性
去除 DNA 或 RNA 3´ 突出末端生成平末端
概述
核酸外切酶 T（Exo T），又称为 RNase T，是一种单链 RNA 或 DNA 特异性核酸酶，该酶需要游离的 3´ 末端，以 3´ →5´ 方向去除核苷酸。核酸外切酶 T 对于 DNA 的活性比 RNA 高十倍。核酸外切酶 T 可用于含有 3´ 突出末端的 RNA 或 DNA 的末端平滑化。
来源
核酸外切酶 T 与麦芽糖结合蛋白（MBP）进行 C-端融合后，过表达并纯化。随后用 Factor Xa 蛋白酶从核酸外切酶 T 上切除 MBP，最后纯化去除 Xa 因子 和 MBP。从 MBP 上切割的核酸外切酶 T 在 N 端多出一个氨基酸，且 Phe 替换了 Met（即 Glu-Phe-Exo T 而非 Met- Exo T）。
反应条件
1X NEBuffer 4
[50 mM KAc，20 mM Tris-Ac，10 mM Mg (Ac)2，1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ]，25℃ 温育。
热失活：65℃ 20 分钟。
热失活：65℃ 20 分钟。
质保声明
无核酸内切酶和外切酶污染。
单位定义
1 单位指 100 μl 反应体系中，25℃ 条件下，30 分钟从 1 nmol [3H]-标记的多聚胸腺嘧啶生成 0.1 nmol TCA 可溶性核苷酸所需要的酶量。
浓度
5,000 units/ml。
使用注意事项
Exo T 对 DNA 和 RNA 的反应效率不同，DNA 是 RNA 的 100 倍。对于 RNA，在标准反应条件下，完全消化 1.0 pmol rA20 需要 1 单位 Exo T，反应结果通过凝胶电泳检测。
上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375
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