CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit
细胞增殖与示踪检测试剂盒
产品关键词:
CFDA, SE;Calcein AM钙黄绿素;Cell Division细胞分化(分裂);Fluorescein diacetate (FDA);PKH26;CAS NO:150347-59-4;
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit
CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒 |
MX3010-500T |
500T |
498 |
MX3010-1000T | 1000T | 768 |
产品描述
CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒(CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit)是一款基于荧光探针CFDA, SE,用于细胞增殖检测和细胞荧光示踪的检测试剂盒。此方法目前广泛替代MTT法或者3H-胸腺嘧啶核苷掺入法(3H-thymidine incorporation)等细胞增殖检测方法。本试剂盒包含粉末形式的CFDA, SE探针,细胞培养级的溶剂,以及细胞标记液,使用方便,操作简单。按照每个样本的标记体积为1ml来算,我司(生物)提供两种规格的试剂盒,分别可检测500个和1000个样品。
CFDA, SE,英文全名5(6)-Carboxyfluorescein diacetate N-succinimidyl ester,CAS NO. 150347-59-4,是一种稳定的、细胞膜渗透性的非荧光染料,由两个醋酸基团和一个琥珀酰亚胺酯(SE)官能团组成的一个荧光分子。一旦主动扩散进入细胞,其醋酸基团被胞内酯酶切割,生成荧光素酯CFSE。CFSE具有高度荧光,且能通过其琥珀酰亚胺酯基团共价结合到细胞内的蛋白氨基基团。正是这个共价偶联反应,CFSE能够极其长期的保留在细胞内,长达数个月。另外,归因于这一稳定连接,一旦染料进入细胞,不会转移到邻近细胞。无活力细胞仍然是非荧光。而活细胞一旦分化,CFSE能够很均匀的分散到子细胞中,每分裂一次子代细胞约能得到亲本细胞1/2的荧光强度,因此,通过流式细胞仪对荧光强度的检测,能够依次分选出未分裂细胞,分裂一次的细胞(1/2荧光强度),分裂两次的细胞(1/4荧光强度),分裂三次的细胞(1/8荧光强度),以及以此类推其他分裂次数的细胞。CFSE可以检测分裂多达8次或更多次数的细胞增殖。
CFSE广泛用于细胞增殖和体内细胞示踪研究。CFSE的zui大激发和发射波长分别为492nm和517nm,标记细胞后呈绿色荧光。使用流式细胞仪检测可用FL1检测通道。也能用荧光显微镜观察,使用FITC滤片。
产品包装
编号 | 组分 | 保存方法 |
产品编号/规格 |
|
MX3012-500T | MX3012-1000T | |||
MX3010-A | CFDA SE粉末 | -20ºC避光保存 | 1管 | 1管×2 |
MX3010-B | CFDA SE溶剂 | -20ºC避光保存 | 1ml | 1ml×2 |
MX3010-C | 细胞标记液(10X) | -20ºC~4℃保存 | 50ml×2 | 50ml×4 |
注意事项
1) CFDA SE溶剂在低温(如4℃,冰浴)等条件下会凝固而粘在离心管底、管壁或盖子上,可将其置于25℃温育片刻直至全部融解后使用。
2) CFDA SE粉末经溶剂溶剂配制成储存液后一个月内用完,zui多不超过三个月。因CFDA SE容易被水解,并在水溶液中变质。使用过程中尽量避免接触水。而在标记过程中接触到水是在允许范围内。
3) 荧光染料均存在淬灭问题,操作和储存过程中需注意避光,以减缓荧光淬灭。
4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法内容maokangbio
1. CFDA SE储存液(1000X)制备
2. CFDA SE标记液(1X)制备
3. 染色步骤
常见应用和数据示例:
根据荧光信号的稀释来检测细胞增殖和分化(示踪)(Cell proliferation and cell division by Dye Dilution Method),此方法主要用来体内外检测淋巴细胞(T细胞和B细胞)的增殖,也能用来检测NK细胞,成纤维细胞甚至细菌。也有用来研究可移植造血干细胞的增殖。
示例1(体外).
Fig 1. Murine CD4+ lymphocytes, labelled with CDFA-SE were cultured with antigen-presenting cells with different peptides to stimulate either the memory or the memory and naïve cells. Up to five cell divisions can be observed.
示例2(体内).
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