ALP Stain 碱性磷酸酶染色液,偶氮偶联法

本ALP Stain 碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法) (Coupling azo-dye Mehod)利用的是偶氮偶联法来定性检测磷酸酶活性。工作原理是在pH 9.2-9.8的碱性条件下,细胞内ALP可使AB-BI磷酸盐水解,释放出磷酸与萘酚,后者与偶联重氮盐生成有色产物,定位于细胞质中。

Alkaline Phosphatase Stain Solution (Coupling azo-dye Method) 碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)

产品名称 产品编号 规格
Alkaline Phosphatase Stain Solution (Coupling azo-dye Method) 碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法) MP7505-30ML 3×10ml
MP7505-60ML 3×20ml

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产品描述

碱性磷酸酶(Alkaline phosphataseALPAKPAP)是一类磷酸酯酶,碱性条件下能够将核苷酸、蛋白、甾醇等分子去磷酸化,广泛分布于哺乳动物组织内。ALP主要存在于物质交换活跃处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮。还发现于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜及吞饮小泡。

碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)(Alkaline Phosphatase Stain Solution (Coupling azo-dye Mehod))利用的是偶氮偶联法来定性检测磷酸酶活性。工作原理是在pH 9.2-9.8的碱性条件下,细胞内ALP可使AB-BI磷酸盐水解,释放出磷酸与萘酚,后者与偶联重氮盐生成有色产物,定位于细胞质中。该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、石蜡切片等的ALP染色,ALP阳性反应部位呈蓝色,位于胞浆,染色结果比金属盐沉淀法相对可靠些。

产品组成

组分编号 组分名称

产品货号(规格)

保存方式
MP7505-30ML MP7505-60ML
MP7505-A ALP固定液 10ml 20ml RT避光保存
MP7505-B1 AS-BI染色液 5ml 10ml -20避光保存
MP7505-B2 FBB染色液 5ml 10ml 2-8避光保存
MP7505-C 核固红染液 10ml 20ml 2-8℃避光保存

注意事项

  1. 血液、骨髓细胞涂片或其他样本均应新鲜,薄厚适宜,及时固定,否则会影响酶的活性。
  2. 培养细胞染色操作过程中,清洗、染色等步骤都应轻微,以免损伤或丢失细胞。
  3. 培养细胞或爬片细胞不建议采用ALP固定液,此ALP固定液适用于血液或骨髓细胞涂片的固定。
  4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤

  • ALP染色液的准备

临用前,取适量的AS-BI染色液(B1)和FBB染色液(B2)按照11比例混合,即得到ALP染色液,现配现用。

  • 涂片或切片染色
  • 贴壁细胞染色

2.1 6孔板或其他容器培养的细胞,弃培养液,PBS清洗细胞。

2.2 加入4%多聚甲醛固定10-20minPBS清洗细胞。

2.3 滴加新鲜配制的ALP染色液,放入湿盒,避光孵育15-20minPBS清洗。

2.4 入核固红染色液复染30s~3min

  1. PBS清洗、镜检。

三、染色结果

阳性部位 蓝色
细胞核 红色(核固红)

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