单线态氧荧光探针 Singlet Oxygen Sensor Green(SOSG)
Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG;单线态氧(Singlet Oxygen , 1O2);单线态氧荧光探针;S36002;Thermo Fisher; ROS(Reactive oxygen species)活性氧物质;
活性氧引起的许多生理损伤都可能归因于单线态氧(1O2),包括与脱氧鸟苷选择性反应形成8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的核酸修饰。Thermo fisher(molecular probe)公司开发的Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG是目前商业化可得且应用广泛的单线态氧荧光探针,从材料学到药物学领域,比如光动力学疗法。
特异性强Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG高度选择性结合单线态氧(1O2)。不像其他的荧光和化学发光的单线态氧检测试剂,SOSG与其他活性氧物质(ROS),包括羟基自由基(·OH)、超氧阴离子(·O2–)和一氧化氮(NO)无可见反应见图1。
图1、Singlet Oxygen Sensor Green (SOSG)的荧光反应和对单线态氧(1O2)的特异性。A)用荧光光度计(Ex/Em=488/525nm)测定溶液内的荧光,溶液内含SOSG(1 µM )和亚甲基蓝(10 µM)溶于100mM pH 7.5 Tris Buffer; 单线态氧清除剂叠氮钠(NaN3,1 mM);或50% D2O(重水,能够延长1O2的寿命)。每20s完成一次荧光测定,每次测定间隔30s(如灰条标示)。在这30s的间隔中,样本暴露于激光辐射(630–680 nm,<5 mW),导致亚甲基蓝光敏生成1O2。B)用荧光光度计(Ex/Em=488/525nm)测定溶液内的荧光,溶液为50mM pH 7 Tris buffer,1mM ,SOSG(1 µM ),或含SOSG(1 µM )。产生尿酸和超氧化物。超氧化物瞬间被H2O2降解。
荧光特征Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG与单线态氧(1O2)反应前,探针初发弱蓝色荧光,激发峰在372nm和393nm,发射峰在395nm和416nm。当含单线态氧(1O2),探针发射绿色荧光,光谱特征类似于荧光素(大激发/发射波长约504/525nm)。
线性化关系研究发现Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG的荧光产物在某些溶液中随着时间被降解,且在不含单线态氧的碱性pH溶液中,Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG会发荧光。不过,当进行适当的操作,绿色荧光信号的强度与单线态氧(1O2)含量相关,且不会受其他ROS的明显干扰。
应用Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG证实能用来检测溶液和植物组织中的单线态氧(1O2)。
使用方法单线态氧活性氧探针SOSG
- SOSG储存液制备:收到货按照≤-20℃避光干燥保存。用甲醇来制备储存液,每100µg粉末加入33µl甲醇制备~5mM储存液。正式实验前制备工作液,不能用完的工作液需丢弃,不可保存后再用。
- 溶液检测:SOSG不具细胞膜渗透性,设计用来检测溶液环境内的单线态氧。加的稀释缓冲液和工作浓度需根据经验来调整。建议起始工作浓度为1-10µM。
争议点单线态氧活性氧探针SOSG
Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG不具有细胞膜渗透性,能用于细胞单线态氧(1O2)检测?整理专丽持有方thermo(molecular probe)官芳说明此探针不具有细胞膜渗透性,适用于溶液体系单线态氧(1O2)检测。然而,Gollmer A et al.报道SOSG能插入活哺乳动物细胞(文献来源:Gollmer A et al. Singlet Oxygen Sensor Green®: photochemical behavior in solution and in a mammalian cell. Photochem Photobiol. 2011 May-Jun;87(3):671-9.)。
订购信息:Thermo fisher原装正品
品牌 | 货号 | 名称 | 规格 | |
Thermo fisher
(Invitrogen) |
S36002 | Singlet Oxygen Sensor Green 单线态氧荧光探针 | 100μg |
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货号 | 名称 | 规格 | |
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