Ar A4 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞
Ar A4;Ar Qual;MSU440;K599;Agrobacterium rhizogenes发根农杆菌;pCAMBIA2301;Streptomycin 链霉素;Rifampicin利福平;
货号 | 产品名称 | 规格 | |
MF2457-1000UL | Ar A4 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 | 10×100μl | |
MF2457-5000UL | Ar A4 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 | 50×100μl |
产品组分:
组分编号 | 组分名称 | 货号(规格) | |
MF2457-1000UL | MF2457-5000UL | ||
MF2457-A | Ar A4Chemically Competent Cell | 10×100μl | 50×100μl |
MF2457-B | pK7WGF2 Control Vector (10ng/μl) | 10μl | 10μl |
产品描述
发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)是根瘤菌科农杆属的一种革兰氏阴性土壤细菌,能够侵染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。起关键作用的是其携带的Ri质粒,含有负责发根自主性生长和冠瘿碱合成的基因。结构上与Ti质粒类似,主要有致毒区(Vir),T-DNA区以及冠瘿碱合成功能区等。
根据合成冠瘿碱的不同,Ri质粒分为4种类型:1)甘露碱型;2)黄瓜碱型;3)农杆碱型;4)米奇矛型。
发根农杆菌菌株Ar A4含天然农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(玉米,烟草,胡萝卜、甘草等),同时具有卡那霉素抗性。
注意事项
7) Ar A4具有卡那霉素抗性,不可用于具卡那霉素抗性质粒的转化。
8) 为了保证号的转化效率,发根农杆菌的培养务必使用TY培养基(配方见附表1)。
9) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1) 取-80℃保存的感受态细胞于室温或手心片刻待其部分融化,达到冰水混合状态时插入冰浴中使其完全融化。
2) 往100μl感受态细胞悬液中加入0.01~1μg质粒DNA(转化效率较高,*次使用前号做预实验确定所加质粒的量),用手快速、剧烈拨管底混匀或用枪吹吸混匀,依次放于冰中间静置5min,液氮5min,37℃水浴5min,冰浴5min。
3) 冰浴中拿出放室温,加入700μl无抗生素的TY液体培养基,于28℃振荡培养2h。
4) 6,000rpm离心1min,吸掉600ul上清,之后用枪轻轻吹打重悬菌体。之后加到含相应抗生素的TY平板上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,28℃培养2-3天。
Ar A4化学感受态细胞
Ar A4化学感受态细胞