Di-4-ANEPPS 膜电位荧光探针
膜电位荧光探针，Di-4-ANEPPS，Di-8-ANEPPS，ANEP染料，Fast-response probe 快速响应探针， CAS：90134-00-2；
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | |
| Di-4-ANEPPS 膜电位荧光探针 | 4038-5MG | 5mg |
ANEP (AminoNaphthylEthenylPyridinium)染料由Leslie Loew和同事开发，是灵敏且稳定的快速响应探针，能检测亚毫秒级的膜电位变化。Di-4-ANEPPS（MX4038）和Di-8-ANEPPS（MX4039）在各种组织、细胞和模型膜系统中表现出相当一致的荧光强度变化率（10%荧光变化/100mV）。ANEP染料的电子结构发生变化，从而，它们的荧光光谱对周围的电场变化做出响应。这些光学响应足够快来检测兴奋细胞（包括单个神经元、心肌细胞和完整组织制备物）的瞬时电位变化。另外，ANEP染料的激发光谱呈现出电位依赖的迁移，从而使其能通过测定激发波长下的荧光比来定量膜电位。ANEP染料结构上的差异使其适用于各种特定应用（见附录I和II）。
电位敏感ANEP染料的特征：
① 两性离子分子，在不同细胞和组织样本中表现出稳定的电位响应。
② 结合到磷脂膜上的大激发和发射波长约为465/635nm【但光谱特征与环境密切关联】
③ 非荧光直至结合到膜上
④ 溶于乙醇、DMSO和DMF【Di-2-ANEPEQ（MX4040）是水溶性的ANEP染料】
⑤ 快速响应探针，适用于检测亚毫秒的膜电位变化
Di-4-ANEPPS是各种细胞和组织类型中表现稳定的电位探针。细胞膜电位的变化与染料激发荧光强度的变化相关。Di-4-ANEPPS能快速被细胞内在化，因此，主要用于短期实验。
基本特性：
1） CAS NO：90134-00-2
2） 化学名：Pyridinium, 4-(2-(6-(dibutylamino)-2-naphthalenyl)ethenyl)-1-(3-sulfopropyl)-, hydroxide, inner salt
3） 分子式：C28H36N2O3S
4） 分子量：480.66 g/mol
5） 外观：橙色至暗红色固体
6） 纯度：≥95%（HPLC）
7） 荧光：λex 496 nm, λem 705 nm in methanol【需注意：相较于在有机溶剂内，苯乙烯染料与脂质结合后通常发生很大的蓝光迁移】
8）溶解性：溶于DMSO、乙醇、DMF
1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 储存液制备
将低温保存的冻干粉置于室温回温至少20min，低速离心后，将其溶于有机溶剂比如乙醇、DMSO或DMF配制成1mg/ml（~2mM）的储存液。将储存液避光保存在+4℃。
2. ANEP染料的细胞加载
2.1 批量加载
爬片培养的贴壁细胞一般通过将少量的染料储存液（比如溶于DMSO）加入细胞培养基（终浓度为0.2–2μM）进行标记即可。更高的染料浓度（10-50μM）用于标记灌注的组织样本。通常要加0.05% Pluronic® F-127（MS4301）在标记溶液内，以提高染料的溶解（对于亲脂性更高的ANEP染料比如Di-8-ANEPPS尤其不能省略）。低标记温度（4-20℃）能抑制染料的内在化。含探针的溶液孵育10-20min，细胞用不含染料的培养基清洗3次。
2.2 逆行标记
特定的神经元群细胞可通过定位压力注射高浓度的染料溶液（10-20mg/ml，溶于DMSO或乙醇）进入神经组织来实现标记。
3. 荧光测定
一般通过记录激发在450nm和510nm，发射在＞570nm处的荧光强度来进行荧光比率成像测定。当膜超极化，荧光强度比率（F450/F510）降低。电位响应的校准可通过使用离子载体缬氨霉素（MS0049）和添加不同钾离子浓度到细胞外培养基来调整多种膜电位来实现。
相关产品
| 货号 | 名称 | 规格 |
| 4038-5MG | Di-4-ANEPPS 膜电位荧光探针 | 5mg |
| 4039-5MG | Di-8-ANEPPS 膜电位荧光探针 | 5mg |
| 4040-5MG | Di-2-ANEPEQ (JPW 1114) 膜电位荧光探针 | 5mg |
| 4301-1G | Pluronic® F-127, Cell Culture Tested 细胞培养级 | 1g |
| 4302-1ML | Pluronic® F-127 (20% Solution in DMSO), Cell Culture Tested | 1ml |
| 4601A-100ML | Dimethyl Sulfoxide (DMSO), Cell Culture Tested 二甲基亚砜（细胞培养级） | 100ml |
| 0049-10MG | Valinomycin 缬氨霉素 | 10mg |