298-93-1,细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒,CCK-8,MTT 噻唑兰,台盼蓝染色法

本MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒（MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit）采用*的甲臜溶解液，能够非常好的完全甲臜结晶，使检测本底低、灵敏度高，且线性范围宽。

MTT Cell Proliferation Assay Kit

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

MTT 噻唑兰；台盼蓝染色法；CCK-8 细胞增殖和毒性检测试剂盒；WST-8；CAS：298-93-1；

产品名称 产品编号 规格
MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 MX3005-500T 500T
MX3005-1000T 1000T

噻唑兰（Methylthiazolyldiphenyl–tetrazolium bromide, 简称MTT，CAS：298-93-1），也称作溴化噻唑蓝四氮唑，是一种黄色染料，已经广泛替代传统的台盼蓝染色法或者放射性同位素插入法，用来检测细胞活力、细胞增殖以及毒性分析。MTT是一种可接受氢离子的化合物染料，带正电荷，具有细胞膜渗透性。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能够将外源进入的MTT还原成为水不溶性的蓝紫色MTT-甲臜结晶，而死细胞不具此功能。甲臜结晶不能穿透细胞膜，因此沉积在处于增殖且未受损伤的细胞内。在特定溶剂的作用下完全溶解甲臜结晶，然后通过酶标仪测定570 nm附近的吸光度。细胞增殖越多，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。

本MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒（MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit）采用*的甲臜溶解液，能够非常好的完全甲臜结晶，使检测本底低、灵敏度高，且线性范围宽。

产品组分

组分编号 组分名称 保存方法

货号（规格）
MX3005–500T MX3005–1000T
MX3005-A MTT Solution MTT溶液（5mg/ml） -20℃避光 5ml 2×5ml
MX3005-B Formazan Solvent 甲臜溶解液 -20℃或室温 60ml 2×60ml

注意事项

  • 使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发的问题。①由于96孔板周围一圈容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加PBS、无菌水或培养液；②可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方以缓解蒸发。
  • MTT溶液在低温下会凝固，请置于室温或20-25℃水浴温育片刻至全部融解后再使用。
  • MTT溶液需尽量减少反复冻融的次数，若单次用量很少，建议根据需求分装后置于-20℃保存。MTT溶液颜色如变为灰绿色，请勿使用。

4） 甲臜溶解液当置于-20℃保存需解冻使用，或室温保存产生沉淀，可置于37℃水浴孵育以促进溶解，并且必须全部溶解后混匀使用。

5） 加入甲臜溶解液后请轻轻混匀，但需注意避免产生泡沫。亦可借助显微镜观察甲臜是否完全溶解。

6） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法（以96孔板为例）

  • 收集对数生长期的细胞，用含血清的培养液配制成单细胞悬液，调整细胞密度，以每孔3000-10,000个细胞接种到96孔板，每孔体积100µl，培养板的边缘孔用无菌PBS填充。设置空白孔和对照孔。

【注①】：通常情况，细胞增殖实验每孔加3000个细胞，细胞毒性实验每孔加6000个细胞。具体每孔所用细胞数目，需根据细胞大小、增殖速度的快慢等来决定。

【注②】：需设置空白孔（不含细胞，含培养液、MTT和甲臜溶解液），对照孔（含细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT和甲臜溶解液），每组设置3个复孔。

  • 37℃，5% CO2继续培养或根据实验具体需求进行培养，一般培养6–24h。
  • 根据实验具体需求，给予0-20µl干预药物处理，37℃，5% CO2继续培养至合适时间。
  • 小心吸掉培养液，每孔加入100µl新鲜培养液，再加入10µl MTT溶液（5 mg/ml），加样时尽量勤换枪头，控制加量误差。继续培养4h。
  • 小心吸掉培养液，每孔加入110µl 甲臜溶解液，置摇床上低速振荡10min，使得结晶物充分溶解。可在光学显微镜下观察结晶物是否完全溶解。如果紫色结晶较小或较少，溶解的时间会短些；如果紫色结晶较大或较多，溶解的时间会长些。
  • 在酶标仪上摇匀后，选择570nm，测定吸光度。记录结果，比色以空白调零。

【注①】：对于细胞毒性检测，以未经药物处理细胞的OD值为好的，然后计算药物处理细胞所占的比率（x），公式如下：OD（未经药物处理细胞）/OD（药物处理细胞）好的。然后建立直方图。

相关产品

编号 产品名称 规格
MX3001-5G Trypan Blue 台盼蓝 5g
MX3002-50ML 0.4% Trypan Blue Solution 0.4%台盼蓝染色液 50ml
MX3003-100T 台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒 100T
MX3004-250MG MTT 噻唑兰 250mg
MX3005-500T MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 500T
MX3006-5ML Alamar Blue 阿尔玛蓝细胞增殖及毒性检测试剂 5ml (500T)
MX3007-100T WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 100T
MX3008-1ML Cell Counting Kit (CCK-8) CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂 1ml (100T)

细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

发表评论