FS-P1001,FS-P1002,StarLighter Script RT all-in-one Mix,StarLighter Script RTase为定向改造的反转录酶

产品描述

StarLighter Script RT all-in-one Mix

货号	产品名称	规格
FS-P1001	StarLighter Script RT all-in-one Mix	2×200µL（100 rxns）
FS-P1002	StarLighter Script RT all-in-one Mix	200µL（50 rxns）

 

 产品简述

启衡星StarLighter Script RT all-in-one Mix包含第一链cDNA合成除RNA模板及水外的所有组分（StarLighter Script RTase，RNA酶抑制剂，dNTPs，Oligo(dT)₂₀ 、随机引物，以及各种缓冲组分），只需加入RNA模板和水便可进行第一链cDNA的快速合成。预混液含除RNA模板和水之外第一链cDNA合成所需的全部组分，操作简便，减少污染。

StarLighter Script RTase为定向改造的反转录酶，具有更优异的性能，可无差别合成更高产量和更长的cDNA，并耐受55℃的高温，并具有更快的反应速度，更宽的模板使用范围，适合应用于一步法的反转录。

产品应用

基因表达分析；

基因表达验证（基因改造）；

RNA拷贝数检测（病毒及病菌等检测）；

转录本克隆。

产品优势

反转录结果准确反映模板信息；

对高GC片段有优异的转录结果；

轻松应对降解，低起始量样本；

兼容各种类型样本。

反转录结果准确反映模板信息

反转录模板量动态范围宽，起始量从2000ng-0.2ng均可有效进行反转录。模板量与Ct值之间相关性好，在一定浓度范围内，用反转录出来的cDNA进行定量，能较为准确地反映RNA原始模板信息。

（1 ）

StarLighterScript		A		B		C		D		E
反转录模板量（ng）	ct值	反转录模板量（ng）	ct值	反转录模板量（ng）	ct值	反转录模板量（ng）	ct值	反转录模板量（ng）	ct值	反转录模板量（ng）	ct值
2000	16.93	2000	17.87	1500	17.54	1500	17.88	1500	17.5	1500	17.56
1000	17.82	1000	17.04	1000	17.98	1000	18.31	1000	18.04	1000	18.08
400	19.13	400	19.19	800	18.37	400	19.75	400	19.35	400	19.33
40	22.55	40	22.5	80	21.48	40	26.8	40	23.68	40	22.19
4	26.11	4	26.71	8	25.2	4	–	4	27.58	4	26.03

 上表的反转录RNA量（反转录模板量对应的log值）与qPCR Ct值的线性关系：

以不同起始量的人Hela细胞系RNA（已去除DNA）为模板进行反转录，取1/10体积反转录产物作为定量模板，并用启衡星StarLighter SYBR Green qPCR Mix进行定量实验（YWHAZ引物，产物249bp，产物GC含量44.6%），比较不同反转录试剂—反转录RNA量与qPCR Ct值间的关系。

 

以不同起始量的人Hela细胞系RNA（已去除DNA）为模板进行反转录，取1/10体积反转录产物作为定量模板，并用启衡星StarLighter SYBR Green qPCR Mix进行定量实验（YWHAZ引物，产物249bp，产物GC含量44.6%），比较不同反转录试剂—反转录RNA量与qPCR Ct值间的关系。 

（2）

StarLighterScript		A		B		C		D		E
反转录模板量(ng)	ct值	反转录模板量(ng)	ct值	反转录模板量(ng)	ct值	反转录模板量(ng)	ct值	反转录模板量(ng)	ct值	反转录模板量(ng)	ct值
2000	12.68	2000	13.47	1500	12.74	1500	14.54	1500	13.97	1500	13.12
1000	13.84	1000	12.35	1000	13.58	1000	15.03	1000	14.59	1000	13.77
400	15.10	400	15.36	800	14.03	400	16.62	400	16.05	400	15.1
40	18.63	40	18.71	80	17.75	40	22.54	40	19.95	40	18.15
4	22.05	4	22.42	8	21.33	4	36.71	4	24.04	4	21.86

 上表的反转录RNA量（反转录模板量对应的log值）与qPCR Ct值的线性关系：

 

以不同起始量的人Hela细胞系RNA（已去除DNA）为模板进行反转录，取1/10体积反转录产物作为定量模板，并用启衡星StarLighter SYBR Green qPCR Mix进行定量实验（ActB引物，产物153bp，产物GC含量60.1%），比较不同反转录试剂—反转录RNA量与qPCR Ct值间的关系。

 

对高GC片段有优异的转录效果

本试剂盒包含的反转录酶能耐受55度高温，在该条件下，复杂的高GC区域能更好打开，使得反转录更加充分。

StarLighterScript		A		B		C		D		E
反转录模板量(ng)	ct值	反转录模板量(ng)	ct值	反转录模板量(ng)	ct值	反转录模板量(ng)	ct值	反转录模板量(ng)	ct值	反转录模板量(ng)	ct值
2000	25.78	2000	27.64	1500	24.55	1500	25.14	1500	24.86	1500	27.71
1000	26.44	1000	26.79	1000	25.55	1000	26.24	1000	25.76	1000	28.15
400	27.78	400	28.75	800	26.18	400	27.87	400	27.37	400	28.44
40	31.02	40	31.48	80	29.25	40	33.91	40	31.57	40	29.81

 上表的反转录RNA量（反转录模板量对应的log值）与qPCR Ct值的线性关系：

  

以不同起始量的人Hela细胞系RNA（已去除DNA）为模板进行反转录，取1/10体积反转录产物作为定量模板，并用启衡星StarLighter SYBR Green qPCR Mix进行定量实验（ApoE引物，产物322bp，产物GC含量75.5%），比较不同反转录试剂—反转录RNA量与qPCR Ct值间的线性关系。

轻松应对降解、低起始量样本

本试剂盒包含的反转录试剂能从低模板量、高度降解的RNA样本中有效反转录出cDNA，并在qPCR检测中，模板量与Ct值之间仍保持高度的相关性。

反转录模板起始量（ng）	RIN值	引物HMBS		引物YWHAZ
20	2	30.18	Eff%=95.6，R2=1	24.64	EFF%=97.5，R2=0.999
2		33.61		28.20
0.2		Undetermined		31.41
20	4	28.93	Eff%=103.6，R2=0.998	23.93	EFF%=93.9，R2=0.999
2		32.45		27.60
0.2		35.41		30.89
20	6	28.81	Eff%=106.4，R2=0.991	23.91	EFF%=95.7，R2=0.998
2		32.51		27.61
0.2		35.17		30.77
20	8	28.89	Eff%=103.4，R2=0.993	23.75	EFF%=95.5，R2=1
2		32.60		27.50
0.2		35.38		30.62

 采用加热的方法对人Hela细胞系RNA进行降解处理，使用Agilent 2100 Bioanalyzer进行RIN值测定，通过调节加热处理的时间得到RIN值为2、4、6、8的RNA。分别以RIN值为2、4、6、8的RNA各20ng、2ng、0.2ng作为模板进行反转录，取1/10体积反转录产物作为定量模板，并用启衡星StarLighter SYBR Green qPCR Mix进行定量实验（引物YWHAZ，产物长度2490bp，产物GC含量44.6%；引物HMBS，产物长度200bp，产物GC含量62.5%）。

兼容多种类型样本

 

Figure 3 不同物种的RNA样本逆转录后经qPCR检测的CT值

以不同物种的RNA 200ng为模板进行反转录，取1/10体积反转录产物作为定量模板，并用启衡星StarLighter SYBR Green qPCR Mix进行定量实验，比较不同反转录试剂的Ct值。

StarLighter Script RT all-in-one 说明书3.12.pdf