Fig. 1 Chemical structure of HSip-1 DA
Fig. 2 Excitation and emission spectra of HSip-1 reacted with H2S(Em: 491nm/Ex: 516nm)
1. K. Sasakura, K. Hanaoka, N. Shibuya, Y. Mikami, Y. Kimura, T. Komatsu, T. Ueno, T. Terai, H. Kimura, and T. Nagano, “Development of a Highly Selective Fluorescence Probe for Hydrogen Sulfide”, J. Am. Chem. Soc., 2011, 133, 18003.
Fluorescence imaging of hydrogen sulfide with HSip-1 DA:1) 将 HeLa 细胞接种在 μ-slide 8 孔（Ibidi）上，在 5% CO2 培养箱中 37℃ 培养过夜。2）弃去培养基，用无血清培养基（MEM）洗涤细胞两次。3 ) HSip-1 DA 储备溶液 (1 mmol/l) 用无血清培养基 (MEM) 稀释以制备 5 μmol/l HSip-1 DA 工作溶液。 *请根据细胞系优化HSip-1 DA的终浓度。4）向细胞中加入HSip-1 DA工作液（5 μmol/l，200 μl），37℃培养30 5% CO2 培养箱中 5 分钟。5) 弃上清，用 HBSS 洗涤细胞两次。6) 每孔加入 Na2S 溶液（200 μmol/l，200 μl），细胞在 37℃ 5% CO2 培养箱中30 分钟。7) 弃上清，用HBSS 洗涤细胞两次。8) 加入HBSS (200 μl)，共聚焦荧光显微镜观察细胞。