标签：yhgold

Y2HGold Yeast Strain

Y2HGold Yeast Strain 酵母甘油菌 克隆与表达分析是GAL4系统酵母双杂交用实验菌株，能直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过接合（mating）操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。

Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌

产品标签

Matchmarker GAL4双杂交系统；Y2HGold；pGBKT7；Y187；pGADT7；AUR1-C；Aureobasidin A （AbA）；金担子素；

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格（元）
Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 MF2351-300UL 300μl 750

产品描述

Y2HGold是GAL4系统酵母双杂交用实验菌株，能直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过接合（mating）操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。Y2HGold-GAL4酵母双杂交系统需要两种质粒配套使用，分别为pGBKT7和pGADT7。前者筛选标志为Trp，用于表达DNA-BD与诱饵蛋白（bait）的融合蛋白；后者筛选标志为Leu，用于表达AD与诱捕蛋白（prey）的融合蛋白。Y2HGold有四个报告基因：AUR1-C，HIS3, ADE2, MEL1，分别由三个完全异源的Gal4反应启动元件-G1，G2，M1调控，这三种启动子只有GAL4识别的17bp核心区相同，其余部分都不同。这一特征有效缩减假阳性发生的概率。因为，任何诱捕蛋白单独结合引起假阳性都需要识别3个不同序列，激活4个报告基因表达。另外，新报告基因AUR1-C与以往的营养缺陷报告基因相比，其筛选抗生素–金担子素（Aureobasidin A，AbA）可以有效杀死非抗性克隆，大大降低背景克隆的生长。具有更低背景，这一优势也可降低酵母双杂交假阳性发生的概率。

基因型

MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4Δ, gal80Δ, LYS2::GAL1UAS–Gal1TATA–His3, GAL2UAS– Gal2TATA–Ade2 URA3::MEL1UAS–Mel1TATA AUR1-C MEL1

基本信息

培养基：YPDA

培养条件：28℃，YPDA，有氧培养

保存方式：30%甘油，-20℃保存

转化方式：PEG/LiAC；电激；

基本应用：酵母双杂交实验

使用说明

生物提供的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证，如存在质量问题，请在收到产品三个月内通知我司。收到甘油菌后，请及时在固体平板上划线培养，挑取单菌落接种到液体培养基中，震荡培养后使用并保存新的甘油菌。

相关产品

货号

名称

规格
MF2351-300UL Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 300μl
MF2352-1000UL Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2353-300UL Y187 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 300μl
MF2354-1000UL Y187 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2355-300UL AH109 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 300μl
MF2356-1000UL AH109 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2501-200T Yeast Transformation Kit 酵母转化试剂盒 200T
MS6303-350G YPDA Agar Medium YPDA琼脂培养基 350g
MS6304-250G YPDA Medium YPDA液体培养基 250g

 Y2HGold Yeast Strain 酵母甘油菌 克隆与表达分析

Y2HGold Yeast Strain 酵母甘油菌 克隆与表达分析

酵母感受态细胞 克隆与表达分析

 Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母感受态细胞 克隆与表达分析，是GAL4系统酵母双杂交用实验菌株，能直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过接合（mating）操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。

 

Y2HGold Chemically Competent Cell

酵母菌化学感受态细胞

 

产品标签

Matchmarker GAL4双杂交系统；Y2HGold；pGBKT7；Y187；pGADT7；AUR1-C；Aureobasidin A （AbA）；金担子素；

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格（元）
Y2HGold Chemically Competent Cell 

酵母菌化学感受态细胞

 MF2352-1000UL 10×100μl 290
MF2352-5000UL 50×100μl 1320

产品包装

组分编号 组分名称 保存

货号（规格）
MF2352-1000UL MF2352-5000UL
MF2352-A Y2HGold Competent Cell -80℃ 10×100μl 50×100μl
MF2352-B pGADT7 Control Vector (10ng/μl) -80℃ 10μl   10μl  
MF2352-C Carrier DNA (5μg/μl) -20℃ 100μl  500μl 
MF2352-D PEG/LiAC Solution +4℃ 5ml 25ml

产品描述

Y2HGold是GAL4系统酵母双杂交用实验菌株，能直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过接合（mating）操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。Y2HGold-GAL4酵母双杂交系统需要两种质粒配套使用，分别为pGBKT7和pGADT7。前者筛选标志为Trp1，用于表达DNA-BD与诱饵蛋白（bait）的融合蛋白；后者筛选标志为Leu，用于表达AD与诱捕蛋白（prey）的融合蛋白。Y2HGold有四个报告基因：AUR1-C，HIS3, ADE2, MEL1，分别由三个完全异源的Gal4反应启动元件-G1，G2，M1操控，这三种启动子只有GAL4识别的17bp核心区相同，其余部分都不同，因此大大降低了酵母双杂交假阳性发生的概率。此外，新报告基因AUR1-C与以往的营养缺陷报告基因相比，具有更低背景，这一优势也可降低酵母双杂交假阳性发生的概率。

本品为经特殊工艺制备的Y2HGold酵母菌化学感受态细胞，用pGADT7质粒检测转化效率＞104cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存三个月。

基因型

MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4Δ, gal80Δ, LYS2::GAL1UAS–Gal1TATA–His3, GAL2UAS– Gal2TATA–Ade2 URA3::MEL1UAS–Mel1TATA AUR1-C MEL1

注意事项

1. 在冰上融化感受态细胞。

2. 转化高浓度质粒可相应减少用于涂板的菌量。同时转化2-3种质粒可适当增加质粒的用量。

3. Y2HGold对高温敏感，zui适生长温度为27-30℃，一旦高于31℃，生长速度和转化率都呈指数下降。

4.菌落变粉红色并不是污染，而是酵母细胞生长中的一种常见现象。当酵母细胞在平板上培养几天，将平板内的腺嘌呤消耗殆尽，那时酵母试图通过自身代谢途径合成腺嘌呤以供利用。然而，某些菌株ADE2基因被破坏，腺嘌呤合成受阻。且ADE4，5，6，7基因均正常。由此，造成中间产物P-ribosylamino imidazole（AIR）在细胞的积累使得菌落变为粉红色。

5. 酵母菌在缺陷培养基上生长速度比YPDA培养基慢，营养缺陷成分越多，生长越慢，以转化涂板为例：涂YPDA平板于29℃，48h培养可见直径1mm克隆；涂SD单缺平板于29℃，48-60h培养可见直径1mm克隆；涂SD双缺平板于29℃，60-80h培养可见直径1mm克隆；涂SD三缺或四缺平板于29℃，80-90h培养可见直径1mm克隆；

6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品

货号

名称

规格
MF2351-300UL Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 300μl
MF2352-1000UL Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2353-300UL Y187 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 300μl
MF2354-1000UL Y187 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2355-300UL AH109 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 300μl
MF2356-1000UL AH109 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2501-200T Yeast Transformation Kit 酵母转化试剂盒 200T
MS6303-350G YPDA Agar Medium YPDA琼脂培养基 350g
MS6304-250G YPDA Medium YPDA液体培养基 250g

 Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母感受态细胞 克隆与表达分析

Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母感受态细胞 克隆与表达分析

 

Y1HGold酵母化学感受态细胞

Y1HGold酵母化学感受态细胞是Clontech GAL4-AbA酵母单杂交系统用的菌株，MATα型，能直接转化质粒进行文库筛选。Y1HGold-GAL4酵母单杂交系统需要两种质粒配套使用，分别为pAbAi和pGADT7。

Y1HGold Chemically Competent Cell 

酵母菌化学感受态细胞

产品关键词：

GAL4-AbA酵母单杂交系统；Y1HGold；pAbAi；pGADT7；Ar Qual；X-α-Gal ；Aureobasidin A （AbA）；金担子素；

产品订购：

货号 产品名称 规格 价格（元）
MF2362-1000UL Y1HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl 290
MF2362-5000UL Y1HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 50×100μl 1320


产品组分：

组分编号 组分名称 保存

货号（规格）
MF2362-1000UL MF2362-5000UL
MF2362-A Y1HGold Competent Cell -80℃ 10×100μl 50×100μl
MF2362-B pGADT7 Control Vector (10ng/μl) -80℃ 10μl   10μl  
MF2362-C Carrier DNA (5μg/μl) -20℃ 100μl  500μl 
MF2362-D PEG/LiAC Solution +4℃ 5ml 25ml


产品描述

酵母单杂交是在酵母双杂交的基础上发展起来，不同于双杂交用来研究蛋白–蛋白间的相互作用，单杂交主要用于研究蛋白和DNA的相互作用。

Y1HGold是Clontech GAL4-AbA酵母单杂交系统用的菌株，MATα型，能直接转化质粒进行文库筛选。

Y1HGold-GAL4酵母单杂交系统需要两种质粒配套使用，分别为pAbAi和pGADT7。前者筛选标志为Ura，用于表达pBait-AbAi构建子（通过将bait-DNA 单拷贝或串联重复序列克隆到pAbAi载体所得）；后者筛选标志为Leu，用于表达GAL4 AD与诱捕蛋白（prey）的融合蛋白。Y1HGold-GAL4酵母单杂交系统的工作原理在于：基因组整合有pBait-AbAi的酵母报告菌株，当诱捕蛋白（prey）结合到诱饵序列（bait-DNA），GAL4 AD会激活AUR1-C报告基因的表达，这一表达使得细胞能够在含筛选抗生素金担子素（Aureobasidin A，AbA）的培养基上生长。与传统的营养缺陷报告基因相比，AUR1-C（AbAr）在很低浓度（100-200 ng/ml）下即可以有效杀死非抗性克隆，大大降低背景克隆生长。这一优势也可降低酵母单杂交假阳性发生的概率。

本品为经特殊工艺制备的Y1HGold酵母菌化学感受态细胞，用pGADT7质粒检测转化效率＞104cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存三个月。

基因型

MATα, ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, met-, MEL1

使用方法

  1. 取100 µl冰上融化的Y1HGold化学感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒2-5 µg，Carrier DNA （95-100℃ 孵育5 min，快速冰浴。重复一次。）10 µl，PEG/LiAc 500µl，用枪吹打几次充分混匀，30℃水浴30 min（在15min时翻转6-8次混匀）。
  2. 之后将管子放42℃水浴15 min（在7.5min时翻转6-8次混匀）。
  3. 5000 rpm离心40s弃上清，用400 µl ddH2O重悬沉淀，离心30s弃上清。
  4. 用50 µl ddH2O重悬，涂板，放入恒温培养箱29℃培养48-96 h。

相关产品

货号 名称 规格
MF2352-1000UL Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2354-1000UL Y187 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2356-1000UL AH109 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2362-1000UL Y1HGold Chemically Competent Cell  酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2364-1000UL Y190 Chemically Competent Cell  酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2358-1000UL EGY48 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2360-1000UL NMY51 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MS6303-350G YPDA Agar Medium YPDA琼脂培养基 350g
MS6304-250G YPDA Medium YPDA液体培养基 250g
MS6311-467G Minimal SD Agar Base SD琼脂基础培养基 467g
MS6312-267G Minimal SD Base SD基础培养基 267g
MS6317-10G DO Supplement -Leu 10g
MS6320-10G DO Supplement -His/-Leu 10g
MS6334-10G DO Supplement -Leu/-Met/-Trp 10g
MS6342-10G DO Supplement -His/-Leu/-Met/-Trp 10g
MS0002-1ML Aureobasidin A (AbA) 金担子素A（1 mg/ml） 1ml
MF2501-200T Yeast Transformation Kit 酵母转化试剂盒 200T


Y1HGold酵母化学感受态细胞

Y1HGold酵母化学感受态细胞