Y187 Chemically Competent Cell 酵母感受态细胞 克隆与表达分析:Y187是GAL4系统酵母单杂交/双杂交用实验菌株,MATα型,能直接转化质粒或与MATa型酵母菌株(如Y2HGold,AH109等)通过接合(mating)操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。
Y187 Chemically Competent Cell
酵母菌化学感受态细胞
Matchmarker GAL4双杂交系统;Y2HGold;pGBKT7;Y187;pGADT7;AUR1-C;Aureobasidin A (AbA);金担子素;
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
|
Y187 Chemically Competent Cell
酵母菌化学感受态细胞 |
MF2354-1000UL |
10×100μl |
|
MF2354-5000UL |
50×100μl |
|
产品包装
组分编号 |
组分名称 |
保存 |
货号(规格)
|
MF2354-1000UL |
MF2354-5000UL |
MF2354-A |
Y187 Competent Cell |
-80℃ |
10×100μl |
50×100μl |
MF2354-B |
pGADT7 Control Vector (10ng/μl) |
-80℃ |
10μl |
10μl |
MF2354-C |
Carrier DNA (5μg/μl) |
-20℃ |
100μl |
500μl |
MF2354-D |
PEG/LiAC Solution |
+4℃ |
5ml |
25ml |
产品描述
Y187是GAL4系统酵母单杂交/双杂交用实验菌株,MATα型,能直接转化质粒或与MATa型酵母菌株(如Y2HGold,AH109等)通过接合(mating)操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。Y187-GAL4酵母双杂交系统需要两种质粒配套使用,分别为pGBKT7和pGADT7。前者筛选标志为Trp1,用于表达DNA-BD与诱饵蛋白(bait)的融合蛋白;后者筛选标志为Leu,用于表达AD与诱捕蛋白(prey)的融合蛋白。Y187有两个报告基因:lacZ,MEL1,分别由两种完全异源的Gal4反应启动元件-G1,M1操控,这两种启动子只有GAL4识别的17bp核心区相同,其余部分都不同,因此大大降低了酵母双杂交假阳性发生的概率。
本品为经特殊工艺制备的Y187酵母菌化学感受态细胞,用pGADT7质粒检测转化效率>104cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存三个月。
基因型
MATα, ura3-52, his3-200, ade 2-101, trp 1-901, leu 2-3, 112, gal4Δ, met-, gal80Δ, URA3:: GAL1UAS–Gal1TATA–– lacZ, MEL1
注意事项
1.在冰上融化感受态细胞。
2.转化高浓度质粒可相应减少用于涂板的菌量。同时转化2-3种质粒可适当增加质粒的用量。
3.Y187对高温敏感,zui适生长温度为27-30℃,一旦高于31℃,生长速度和转化率都呈指数下降。
4.菌落变粉红色并不是污染,而是酵母细胞生长中的一种常见现象。当酵母细胞在平板上培养几天,将平板内的腺嘌呤消耗殆尽,那时酵母试图通过自身代谢途径合成腺嘌呤以供利用。然而,某些菌株ADE2基因被破坏,腺嘌呤合成受阻。且ADE4,5,6,7基因均正常。由此,造成中间产物P-ribosylamino imidazole(AIR)在细胞的积累使得菌落变为粉红色。
5.酵母菌在缺陷培养基上生长速度比YPDA培养基慢,营养缺陷成分越多,生长越慢,以转化涂板为例:涂YPDA平板于29℃,48h培养可见直径1mm克隆;涂SD单缺平板于29℃,48-60h培养可见直径1mm克隆;涂SD双缺平板于29℃,60-80h培养可见直径1mm克隆;涂SD三缺或四缺平板于29℃,80-90h培养可见直径1mm克隆;
6.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
相关产品
货号
|
名称
|
规格
|
MF2351-300UL |
Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 |
300μl |
MF2352-1000UL |
Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 |
10×100μl |
MF2353-300UL |
Y187 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 |
300μl |
MF2354-1000UL |
Y187 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 |
10×100μl |
MF2355-300UL |
AH109 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 |
300μl |
MF2356-1000UL |
AH109 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 |
10×100μl |
MF2501-200T |
Yeast Transformation Kit 酵母转化试剂盒 |
200T |
MS6303-350G |
YPDA Agar Medium YPDA琼脂培养基 |
350g |
MS6304-250G |
YPDA Medium YPDA液体培养基 |
250g |
Y187 Chemically Competent Cell 酵母感受态细胞 克隆与表达分析
Y187 Chemically Competent Cell 酵母感受态细胞 克隆与表达分析