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PAI-1/tPA复合物(tPA/PAI1)真核蛋白

产品名称：PAI-1/tPA复合物(tPA/PAI1)真核蛋白
来源：真核蛋白
缓冲液成分：20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）
产品规格：10μg   50μg   200μg   1mg   5mg
内毒素水平：<1.0EU per 1ug (determined by the LAL method
物种来源（人、小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猕猴、山羊、绵羊、马、牛、猪、鸡、狗等其他物种多物种）相同的名称，不同的物种。
性状：冻干粉
产品纯度：>95%-98%（SDS-PAGE & RP-HPLC）
储存方式：如果样品在2-4周内使用，可以在4°C低温储存。
长期储存，建议添加载体蛋白（0.1％HSA或BSA），并储存在-20~ -80°C。避免多次冻融。
 产品用途 ：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB
用法：Reconstitute in 10mM PBS (pH7.4) to a concentration of 0.1-1.0 mg/mL. Do not vortex.
 

 

A、核蛋白表达系统以大肠杆菌表达系统为代表，具有遗传背景清楚、成本低、表达量高和表达产物分离纯化相对简单等优点，缺点主要是蛋白质翻译后缺乏加工机制，如二硫键的形成、蛋白糖基化和正确折叠，得到具有生物活性的蛋白的几率较小，查看原核蛋白表达实验案例。

B、酵母蛋白表达系统以甲醇酵母为代表，具有表达量高，可诱导，糖基化机制接近高等真核生物，分泌蛋白易纯化，易实现高密发酵等优点。缺点为部分蛋白产物易降解，表达量不可控，查看酵母蛋白表达实验案例。

C、杆状病毒-昆虫细胞表达系统凭借高特异性高表达水平及翻译后修饰功能，被用作种表达大规模蛋白的强有力的工具系统，相对来说，操作流程较多，成本偏高。查看杆状病毒表达系统案例

D、哺乳动物细胞蛋白表达服务和昆虫细胞表达系统主要优点是蛋白翻译后加工机制接近体内的天然形式，容易保留生物活性，缺点是表达量通常较低，稳定细胞系建立技术难度大，生产成本高。查看哺乳动物表达系统案例。

表达出来的蛋白比实际大小要小，这是为什么？主要原因有如下几个方面：

1. 蛋白本身被降解了，可以存在些不利于该蛋白稳定的蛋白酶。

2. 翻译起始位点的问题：如果个类似于核糖体结合位点(AAGGAGG)的序列加上适当的间隔序列出现在了ATG密码子上游，降解就会有可能出现。解决的方法可以采用两端都带有融合标签的载体，例如pET系列部分载体在N-端和C-端都有His-Tag融合标签。这样，全长蛋白就可以通过提高咪唑浓度，在洗脱时将截短蛋白与全长蛋白区分开。或者在蛋白两端采用不同标签，进而通过亲和纯化的方式得到全长蛋白。

3. 影响蛋白稳定性的另外个因素是与N端Met相邻的氨基酸，即N端原则，当下列氨基酸出现在N端时: Arg、 Lys、Phe、Leu、Trp和Tyr 蛋白的半衰期较短，蛋白会存在不稳定降解的问题，特别是Leu，当它出现在第二个位置上时，蛋白度不稳定。在选择克隆位点时， Nco I 和Nde I都是 是个比较好的N端的克隆位点选择，而使用NdeI的时候就要特别留意Leu的出现。

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原创作者：上海生物科技有限公司

人组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒价格

人组织多肽抗原(TPA)elisa试剂盒由上海供应，上海生物专业经营进口分装和原装标准品|对照品、国产/进口elisa试剂盒，国产/进口血清，生化试剂，培养基等科研生化试剂等。免费提供产品*新报价、实验原理、产品用途以及中英文说明书。我司多年为各大院校，各类医院，生物工程医药实验室以及其他行业科研消费者提供*全面、*周到的采购，上海欢迎您的来电订购！

名称：人组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒
英文名：Human Tissue Polypeptide Antigen,TPA ELISA Kit
产地：国产/进口
参数规格：48T/96T
样本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
产品特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。
产品用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。

人组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒价格 操作洗板方法：
1.手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内，浸泡1-2分钟，根据需要，重复此过程数次。
2.自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
说明
1.在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染，试剂避免受到微生物的污染，因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
2.浓洗涤液会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3.刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
4.所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。
5.有效期：6个月。
6.本操作说明适用于48T试剂盒，但48T试剂盒所有试剂减半。
7.电子版说明书仅供参考，实际操作请按照随产品发送的印刷版说明书；中英文说明书可能会有不一致的地方，以英文说明书为准。

人组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒价格 操作时注意事项：
1. Elisa试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔一孔OD值的），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请*后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5.严格按说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
6.本试剂不同批号组分不得混用。
7.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.底物请避光保存。

人组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒价格 操作步骤：
1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50?l。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40?l，然后再加待测样品 10?l。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50?l，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50?l，再加入显色剂 B50?l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15 分钟.
10.终止：每孔加终止液 50?l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。

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