iTaq Universal SYBR Green Supermix is compatible with Bio-Rad Real-Time PCR Detection
1725120 iTaq Universal SYBR Green 混合液 2 x 1 mliTaq Univer SYBR Green SMX 200
1725121 iTaq Universal SYBR Green 混合液 5 x 1 mliTaq Univer SYBR Green SMX 500
1725122 iTaq Universal SYBR Green 混合液 10 x 1 mliTaq Univer SYBR Green Supermix 1000 Rxn
1725124 iTaq Universal SYBR Green 混合液 5 x 5 mliTaq Universal SYBR Green Supermix
1725125 iTaq Universal SYBR Green 混合液 10x 5 mliTaq Univer SYBR Green Supermix 5000 Rxn
TBS0201 高位无盖联管0.2ml 0.2 ml 8-Tube Strips Without Caps
TCS0801 圆顶联盖 0.2ml CAP STRIP-8,DOMED 130 STRIPS
TCS0803 光学平顶联盖 0.2ml Optical Flat 8-Cap Strips, pkg 120
TLS0801 低位无盖8联管 0.2ml 透明Low-Profile 0.2 ml 8-Tube Strips Without Caps
TLS0851 低位无盖8联管 0.2ml 白色TUBE,STRIP-8,LO-PRO WHT 120/PK
HSS9601 硬边高位半裙边96孔PCR反应板,透明孔透明边,25块Hard-Shell 96W Hi SmSkrtd Plts Clr/Clr
HSP9601 低位96孔板全裙边PCR孔板 透明管Hard-Shell Thin-Wall 96-Well Skirted PCR Plates
HSP9655 低位96孔板全裙边PCR孔板 白色管Hard-Shell 96W Low Skrtd Wht/Wht
MLL9601 低位96孔板无裙边PCR孔板 透明管Multiplate Low-Profile 96-Well Unskirted PCR Plates
MLL9651 低位96孔板无裙边PCR孔板 白色管LOW MULTIPLATE-96,WHITE 25/BX
1725201 SsoFast Eva Green 预混液, 500x20ulSsoFast Eva Green, 500x20ul
1725035 iScript 含gDNA去除 cDNA 合成试剂盒,100x20uliScript gDNA Clear cDNA Synthesis Kit, 100 x 20 µl
SYBR Green I (10,000×) 核酸凝胶染料
SYBR Green I (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料
产品标签
GoldView;Acridine Orange 吖啶橙;GelRed;DuRed;GelGreen;溴化乙锭(EB);SYBR Green I;
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
SYBR Green I (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料 | MF0751-100UL | 100µl | 780 |
SYBR Green I (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料 | MF0751-500UL | 500µl | 2950 |
产品描述
SYBR Green I,是目前检测琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶中dsDNAzui灵敏的染料之一,zui低检出限为20pg DNA(254nm紫外发射光),60pg DNA(300nm透射光);还可用于寡核苷酸检测(1-2ng,300nm透射光),比溴化乙锭EB的灵敏度高50-100倍。
SYBR Green I检测凝胶中核酸的非凡灵敏度归因其*的染料特性:①SYBR Green I具有*的DNA结合力,与DNA结合后荧光显著增强—至少比EB高出一个数量级;②DNA/SYBR Green I复合物的荧光量子产率(~0.8)比DNA/EB(~0.15)高5倍多;③SYBR Green I在琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中迅速渗透,在缺乏DNA时背景荧光可忽略,让染色步骤快速,且成像之前无需脱色。
SYBR Green I因与DNA结合能力强,既能在电泳前(预染),也能在电泳后(后染)对DNA进行染色。还可对毛细管电泳分离的DNA进行染色。SYBR Green I与DNA的结合不会抑制多种常见的限制性内切酶活性,包括Hind III和EcoR I,可直接进行消化或连接。用于琼脂糖凝胶电泳检测DNA后,还可直接将DNA转移到膜上,进行后续的核酸印迹杂交分析。
本品为溶于DMSO 的10,000×的SYBR Green I核酸染料。
注意事项
- 独立实验室进行的艾姆斯试验表明SYBR Green I 的致突变性明显比EB要低很多。但是,必须警告用户注意,目前尚无关于SYBR Green I 对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合,应当被看作潜在诱变剂,使用时要小心谨慎。在处理DMSO储存液时应特别小心,因DMSO能促进有机分子进入组织。染料的废弃处理应当符合当地的规定。
- SYBR Green I对dsDNA的检测灵敏度非常高(20pg,254nm紫外发射光),但对ssDNA和RNA的灵敏度稍低(100-300pg,254nm紫外发射光),使之成为复杂溶液中检测dsDNA的理想选择。尤其是复杂溶液中的ssDNA和RNA可能会掩盖结果的时候,如凋亡特有的连续梯度条带apoptosis ladders。
- SYBR Green I的zui大激发波长为497nm,但在~290nm和~380nm处有二级激发峰。与DNA结合的SYBR Green I的荧光发射集中在520nm。这些光谱特性让SYBR Green I适用于多种凝胶检测仪,从紫外反射(上紫外)和透射仪(下紫外)到氩离子激光器和水银灯激发的凝胶扫描仪。
- 预染色方法,电泳时间不要超过2h,否则SYBR Green I会从DNA上脱离出来,产生弥散状条带。
- 紫外照射透shi下,与dsDNA结合的SYBR Green I呈绿色荧光。如果胶中含ssDNA,则荧光颜色为橘黄色而不是绿色。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法整理
一、使用前准备工作
二、 染色方法
1.电泳后的DNA染色(后染)
2.电泳前的DNA染色(预染)
三、 凝胶成像(紫外或蓝光透射仪或紫外顶置光源直射)
四、从dsDNA中去除SYBR Green I
SYBR Green I (10,000×) 核酸凝胶染料
SYBR Green I (10,000×) 核酸凝胶染料
SYBR Green I (10,000×) 核酸凝胶染料
凝胶染料分子生物学,SYBR Green II,RNA凝胶染料
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO)
RNA凝胶染料
SYBR Green II;GoldView;Acridine Orange 吖啶橙;GelRed; GelGreen;溴化乙锭(EB);SYBR Green I;
产品名称 | 产品编号 | 规格 | |
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝胶染料 | MF0752-100UL | 100µl | |
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝胶染料 | MF0752-500UL | 500µl |
产品描述
SYBR Green II是目前已知电泳凝胶中RNA检测较灵敏的染料之一,在琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶中低检到100pg RNA或ssDNA的单一条带(使用254nm紫外反射光源照射,并用宝丽来667黑白胶片和SYBR滤光片拍照)。即使用300nm透射光也能检测到500pg RNA的单一条带。SYBR Green II的灵敏度明显强于溴化乙啶(EB)。标准琼脂糖迷你胶EB低检出1.5ng单链核酸的单一条带(使用300nm透射光照射并用橙-红明胶滤光片拍照)。
SYBR Green II在变性琼脂糖/甲醛凝胶和聚丙烯酰胺/尿素凝胶中的检测灵敏度有点降低,然而仍优于EB。为了获得大的检测灵敏度,琼脂糖/甲醛凝胶必须在EB染色前清洗数小时。相反,不做任何的清洗或脱色步骤,用SYBR Green II染色的琼脂糖/甲醛凝胶或聚丙烯酰胺/尿素凝胶能检测到1ng RNA单一条带(254nm反射照明)和4ng RNA单一条带(300nm透射照明)。SYBR Green II在RNA检测具备这一灵敏度的特性归因于几个因素,包括优越的荧光量子产量、结合能力和荧光增强。
本品为溶于DMSO 的10,000×的SYBR Green II RNA核酸染料,可用于:1)Northern Blot、起始位点作图或cDNA制备前对RNA产物的小量分析;2)高分辨率变性梯度凝胶电泳(DGGE)后对5S rRNA迁移方式的观察;3)单链构象多态性(SSCP)中的DNA染色;4)PCR扩增前对DNA染色。
注意事项
- 必须警告用户注意,目前尚无关于SYBR Green II 对人体的致突变性或毒性的数据。由于该染料与核酸结合,应当被看作潜在诱变剂,使用时要小心谨慎。在处理DMSO储存液时应特别小心,因DMSO能促进有机分子进入组织。强烈建议处理DMO储存液需戴双层手套。和所有的核酸染料一样,含SYBR Green II RNA核酸染料的溶液需先穿过活性炭再丢弃。活性炭之后必须焚烧来破坏染料。
- SYBR Green II可通过乙醇沉淀法从核酸中去除。异丙醇沉淀法去除效果稍差些。正丁醇萃取、氯萃防取和酚萃取法无法有效去除该染料。
- 先用EB染色的凝胶可接下来用SYBR Green II染色,根据电泳后染色(post-staining)的标准步骤操作。与直接用SYBR Green II染色相比较可能灵敏度有些降低。
- 不要在玻璃器皿中稀释SYBR Green II储存液,因其会结合到玻璃上。在聚丙烯器皿中稀释储存液。
- SYBR Green II不会干扰酶反应。
- 当用SYBR Green II染Northern或Southern Blot凝胶,建议在预杂交液和杂交液内加入0.1%-0.3% SDS。
- 不建议用254nm紫外透射仪对凝胶拍照,因紫外光源的轮廓会出现在照片上。需要使用允许525nm光透过且排斥其他波长光的滤光片。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 光谱特征
SYBR Green II RNA核酸染料可用常见的紫外反射和透射激发光源,以及手持式紫外灯检测。SYBR Green II的大激发波长为497nm,但还有一个二级激发峰集中在254nm附近。与RNA结合的SYBR Green II的荧光发射集中在520nm。这些光谱特性让SYBR Green II适用于多种凝胶检测仪,从紫外反射(上紫外)和透射仪(下紫外)到氩离子激光器和水银灯激发的凝胶扫描仪。
使用方法
一、使用前准备工作
使用前将本品取出并回温至室温,使DMSO彻底解冻、溶液均一。于离心机上短暂离心确保所有溶液到管底。*次使用时可将本品分装成多个小份后冻存,小份染料能更快溶解。
二、 染色方法
1.电泳后染色(后染,推荐)
2.电泳前染色(预染)
三、 观察和凝胶成像
3.1 使用300nm紫外透射光或254nm紫外反射光(灵敏度更高)照射染色凝胶。
3.2 为了加灵敏度,建议使用黑白胶片,可用的SYBR Green照相滤光片(Thermo fisher, #S7569)拍照。许多其他的黄色或绿色明胶或玻璃纸滤光片也能用来拍照,但绝大多数可能会减低灵敏度。EB染色凝胶拍照用的橙-红滤光片不适合于SYBR Green II染色凝胶。
3.3 用的SYBR Green照相滤光片(Thermo fisher, #S-7569)和Polaroid 667黑白胶片对凝胶进行拍照。染色凝胶基本无背景荧光,当检测少量RNA,允许长期胶片曝光。对于300nm透射,通常F-stop设置4.5时曝光1-2s足够。对于254nm反射(特别是手持灯),大约需要曝光1-1.5min以得到大灵敏度。
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