杂双功能交联剂具有活化的酯和马来酰亚胺反应基团。 这些官能团分别与蛋白质的胺和巯基反应。 酶标记的半抗原是使用异双功能交联剂（例如 EMCS 或 GMBS）制备的。 交联反应需要中性 pH 值和温和的温度，因为在交联反应中需要保持酶活性和抗体滴度。 可使用具有 3、5、7 或 10 个线性碳链的异双功能交联剂。 这些线性脂肪链充当两个反应位点与其水溶性试剂之间的间隔物。 在更宽的 pH 范围内，它们比芳香族交联剂（例如 succinimidyl-4-N-maleimidobenzoate）更稳定。
Conjugation of Macromolecules with Hetero-Bifunctional Cross-Linking Reagent
Hetero-bifunctional Reagents
| Product Name | Code | Length (Å) |
| Sulfo-EMCS | S024 | 9.4 |
| Sulfo-GMBS | S025 | 6.9 |
| Sulfo-HMCS | S026 | 13.0 |
| Sulfo-KMUS | S250 | 16.7 |
| Sulfo-SMCC | S330 | 8.0 |
1. J. V. Staros, N-Hydroxysulfosuccinimide Active Esters:Bis(N-hydroxysulfosuccinimide) Esters of Two Dicarboxylic acids Are Hydrophilic, Membraneimpermeant, Protein Cross-linkers, Biochemistry, 1982, 21, 3950.2. P. S. R. Anjaneyulu, James V. Staros, Reactions of N-Hydroxysulfosuccinimide Active Esters, Int. J. Peptide Protein Res., 1987, 30, 117.3. Y. Fukami, K. Sato, K. Ikeda, K. Kamisango, K. Koizumi and T. Matsuno, Evidence for Autoinhibitory Regulation of the c-src Gene Product a Possible Interaction Between the Src Homology 2 Domain and Autophosphorylation Site, J. Biol. Chem., 1993, 268, 1132.