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伯乐biorad用于 RT-qPCR 的 iScript™ 逆转录超混合液
使用方便的包含所有基本成分（RNA 除外）的预混液格式，提供卓越的数据重现性并减少移液可变性。这个简单的单组分逆转录试剂盒使用 26 分钟的短程序。
用于 RT-qPCR 的 iScript 逆转录 supermix 是一种简单、快速、灵敏的第一链 cDNA 合成试剂盒，用于使用实时 qPCR 进行基因表达分析。在一个试管中，预混合的 5x supermix 包含所有必要的成分，除了用于逆转录的 RNA 模板。
提高逆转录的可重复性并减少设置过程中的错误— 1 管格式，用于简单快速的设置并减少移液可变性
在基因表达分析期间检测低水平靶基因并保存 RNA — 总输入 RNA (1 µg–1 pg) 的宽线性动态范围与高效 RNase H+ MMLV 逆转录酶
与稀释的 RNA 样品一起使用— 5 倍浓度的 supermix 允许在 20 µl cDNA 合成反应中获得更大体积的 RNA 样品
消除冷冻/解冻循环——–20ºC 的液体形式缩短了整体处理时间并最大限度地提高了稳定性
验证输入 RNA 和基因表达结果的纯度——可选的无 RT 对照用于检测基因组 DNA 污染
获得准确的结果——RNase 抑制剂的强效混合物可防止反应设置和逆转录过程中的 RNA 降解
提高引物设计的灵活性并防止 5′ 和 3′ 偏差——5x 超混合液中寡核苷酸 (dT) 和随机引物的最佳混合，以实现完整的 RNA 覆盖
当天完成 cDNA 合成和 qPCR — 26 分钟快速 cDNA 合成方案
iScript™ 逆转录超混合液，25 x 20 µl rxns，100 µl
1708840
25 x 20 µl 反应，100 µl 5x supermix，包含逆转录酶、RNase 抑制剂、dNTP、引物、MgCl 2、稳定剂；50 个无 RT 对照超混合液反应
iScript™ 逆转录超混合液，100 x 20 µl rxns，400 µl
1708841
100 x 20 µl 反应，4 x 100 µl 5x supermix，包含逆转录酶、RNase 抑制剂、dNTP、引物、MgCl 2、稳定剂；50 个无 RT 对照超混合液反应
iScript™ 逆转录超混合液，500 x 20 µl rxns，2 ml
1708841包
500 x 20 µl 反应，20 x 100 µl 5x supermix，包含逆转录酶、RNase 抑制剂、dNTP、引物、MgCl2、稳定剂；4 x 50 次非 RT 对照超混合反应
伯乐bio-rad细胞裂解 RT-qPCR 试剂盒Cell Lysis RT-qPCR Kits
SingleShot 细胞裂解 RT-qPCR 试剂盒允许直接从培养的细胞中进行 RT-qPCR，无需 RNA 纯化。试剂盒可用于一步法和两步法 RT-qPCR 与 SYBR Green 和探针化学家
SingleShot Cell Lysis RT-qPCR Kits为从细胞培养物中生成裂解物提供了完整且快速的解决方案，针对下游一步或两步定量 PCR (qPCR) 反应进行了优化，无需 RNA 纯化步骤。
提供 SYBR Green 或探针化学试剂盒。细胞裂解试剂盒也作为独立选项提供。
所有套件均具有以下主要优势：
在 20 分钟内准备好从 10 到 100,000 个细胞的细胞裂解液
完全去除基因组 DNA，同时保持 RNA 完整性
跨基因的 qPCR 数据的最佳准确性和线性动态范围
结果与使用纯化的 RNA 相当，包括动态范围
经PrimePCR 检测和试剂盒验证
SingleShot RNA Control 确保最佳的细胞和裂解物输入
选择适合您需求的套件
SingleShot 套件 特征 产品选项
细胞裂解一步法 RT-qPCR 试剂盒
细胞裂解、逆转录和 qPCR
包括所有一步法 RT-qPCR 试剂
无需 RNA 纯化
SYBR Green
100 个反应 ( 1725095 )
探针
100 个反应 ( 1725070 )
细胞裂解两步法 RT-qPCR 试剂盒
细胞裂解、逆转录和 qPCR
包括所有两步法 RT-qPCR 试剂
无需 RNA 纯化
SYBR Green
100 个反应 ( 1725085 )
探针
100 个反应 ( 1725090 )
细胞裂解试剂盒
RT-qPCR 的细胞裂解
RT-qPCR 试剂单独出售
无需 RNA 纯化
经Reliance 一步多路复用 Supermix和iTaq 通用一步 RT-qPCR 试剂盒验证
100 个反应 ( 1725080 )
500 个反应 ( 1725081 )
什么是QPCR？荧光定量PCR法（qPCR）
荧光定量PCR法（qPCR）：是在常规PCR基础上，将『针对支原体特异性保守序列的探针』做荧光标记，使PCR扩增后的产物带有荧光，利用荧光信号的变化和配套软件，进行DNA扩增反应的实时监测，简称qPCR。为您分析荧光定量PCR(qPCR)方法的用途和说明。
如果你想做荧光定量PCR的根据实验思路来说应该需要一下试剂和仪器
1.模板提取（一般为RNA）：Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定：分光光度计或NanoDrop
3.逆转录：逆转录试剂盒（或者一步法试剂盒），这一步可以用普通PCR做，也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂：通常有用SYBR Green Mix做的，但是这里建议你用EvaGreen做，灵敏度和平行性都要好于SYBR Green，并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他：除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板（Axygen反应比较好）、移液枪等，暂时就想到这么多。
支原体荧光定量PCR(qPCR)检测试剂盒
（经典法）
1) 符合欧洲药典、中国药典要求，更适合细胞治疗，CAR-T，抗体药、疫苗等临床项目申报和质检。
2）样本需先做DNA抽提。抽提后样本加入量为10μl。
3) 厂家可协助完善方法验证步骤。
支原体荧光定量PCR(qPCR)检测试剂盒（一步法）
1）适合科研单位检测，或单位内检，用荧光定量PCR(qPCR)法检测细胞或其他生物基质。
2) 比药典操作标准合并了一步，（将内控对照试剂预先混合在PCR mix试剂中），操作更简洁。
3)样本量为2μl，灵敏度为50个基因组拷贝/反应。结果准确。
综上所述，您是不是已经对荧光定量PCR(qPCR)方法的用途和说明
问：什么是QPCR？
答：QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即实时荧光定量核酸扩增检测系统，也叫实时定量基因扩增荧光检测系统，简称QPCR。
问：QPCR、DNA检测、PCR之间的关系？
答：聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction简称PCR）原理凭借敏感、特异、快速的特点荣获93年诺贝尔化学奖。因其在病原体检测方面的独特优势，因而发达国家在相关方法和仪器方面的研发非常快，成为分子生物学诊断的主流，至今仍处于学术和应用前沿：
第一代产品：
基因扩增热循环仪（DNA Thermal Cycler）+电泳仪+紫外分析仪+定性试剂，构成PCR定性检测。
第二代产品：
基因扩增热循环仪+荧光仪+终点定量试剂，构成PCR-DNA终点法定量检测（End-point quantitative PCR detection），又分为终点酶免定量（ End-point ELISA-PCR）和终点荧光定量（End-point Fluor-PCR）两种。
第三代产品：
实时定量QPCR仪＋实时荧光定量试剂，构成QPCR-DAN/RNA实时荧光定量检测。
问：相比以前的方法，QPCR有哪些特点？
答：QPCR至少有以下特点：
所用仪器少，只用一台仪器。
检测时间短，只须45分钟～1小时10分钟（试剂各异），而定性PCR须3～4小时，酶免终点定量须6～8小时，荧光终点定量须2～3小时。
操作极其简单：前处理后，样本插入仪器一小时后到电脑上来出报告即可，无须开盖，移样本（以前方法），避免污染。
结果精确：定性PCR只能定性，很粗略，终点定量PCR由于只能在40个热循环结束后检测荧光，被测荧光达到饱和导致定量不够精确，属于半定量状态。而实时荧光QPCR是在扩增的每时每刻连续检测各样本的荧光值的变化。
检测动态范围：10～10000000000 DNA copies/ml
检测精度：0.1RLU
辨别率：5000和10,000个模板拷贝样本的辨别率99.7％。
问：QPCR的技术先进性、价格及应用现状？
答：实时荧光QPCR是当今世界用于临床的最先进核酸分子诊断技术，被美国FDA承认并推崇，被美国FDA批准并取得临床应用执照的QPCR试剂品种有：
HBV乙肝病毒DNA，HCV丙肝病毒RNA，HIV艾滋病病毒RNA，Chlamydi trachomatis（CT），性传播疾病，沙眼衣原体，Neiserria gonorrhea(NG)，性传播疾病，淋病双球菌，Cytomegalovirus（CMV），性传播疾病，巨细胞病毒，Mybobacterium tuberculosis（Mtb），呼吸道疾病，结核分支杆菌等。
实时荧光PCR仪研发技术难度大，门槛高，发达国家也只有有限几家知名公司生产，且售价昂贵：如
美国ABI/7700-120万元，美国ABI/5700-50万元，瑞士Roche/Lightcycler-70万元，美国Stratagene公司2005年新品MX3005P-80万元
可见，在病人看来，哪家医院应用了QPCR技术便是先进诊断技术的象征，在发达国家也是如此。
国产仪器情况：国产仪器生产单位不超过五家，其中包括：
日本独资杭州博日实时荧光QPCR仪（33孔）
西安天隆科技有限公司TL988实时荧光QPCR仪（48孔）
以上产品均取得国家SFDA认证，报价均在45万以上。
金畔生物PCR试剂,AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST)
AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST)
新一代一步法RT-qPCR快检试剂
快速扩增：能够实现 30min 扩增，提高实验效率
兼容耐杂：可兼容鼻咽拭子样本粗裂解液
灵敏高效：可实现低浓度样本稳定检出
DNA/RNA 共检：可稳定实现 DNA、RNA 模板的均衡扩增
AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST)是一款探针法RT-qPCR快速检测试剂盒，适用于以RNA为模板 ( 如RNA病毒 ) 的单重或多重定量PCR。本产品使用新一代抗体修饰的Taq DNA Polymerase与一步法专用Reverse Transcriptase，搭配专为快速扩增优化的缓冲体系，具有更快的扩增速度、更高的扩增效率以及特异性，可在较短时间内完成多重均衡扩增。此外，本产品引入了dUTP/UDG防污染系统，可在室温下发挥作用，消除扩增产物污染对qPCR 的影响，保证结果的准确性。
实现 30 min 内快速扩增
AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) (Vazyme #Q231) 经精心优化，能够耐受较快的升降温速率，实现在ABI Q3 仪器上 30 min 扩增。结果显示，Q231 在快速程序和常规程序下的 CT 值差异在 ±1 之间，平台期差在 10% 之内。
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样本兼容性
AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) (Vazyme #Q231) 和其他市面品牌的RT-qPCR 试剂，分别扩增粪便和组织等不同类型的样本。计算对照组和测试组的 CT 值差异，结果表明，Q231 在不同类型样本中的扩增灵敏度均优于对照试剂。
体系1 |
体系2 |
低浓度稳定检出
以低浓度新冠假病毒为模板，使用 AccurSTART U+ One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST)（Vazyme #Q231）进行扩增。结果表明，在两个多重体系中，32 个低浓度样本检出率均达到 95% 以上。
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-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输。
金畔生物PCR试剂,Taq Pro HighGC U+ Multiple Probe qPCR Mix
适用于富含GC模板
更高的扩增特异性
优异的扩增线型
良好的杂质耐受性能
兼容快速程序，缩短检测时间
Taq Pro HighGC U+ Multiple Probe qPCR Mix是一款适用于DNA模板(如DNA病毒)的探针法qPCR专用预混液。核心组分Taq Pro HS DNA Polymerase是基于抗体法修饰，经过升级改造提升模板亲和能力的新一代热启动DNA聚合酶。搭配针对qPCR系统优化的合适Buffer，显著提高了扩增特异性和低拷贝基因的检测灵敏度和扩增线型，能够在宽广的定量范围内得到优异的扩增线型，对靶基因进行准确定量、检测，重复性好，可信度高。本产品适用于富含GC模板的扩增，同时具有良好的杂质耐受性能。试剂中引入了dUTP/UDG防污染系统，室温下即可发挥作用，可消除扩增产物污染对qPCR的影响，保证结果的准确性。本产品是一款2 × 预混液，只需额外加入引物、探针、模板即可，使用方便，同时兼容快速程序，缩短检测时间。
1. 更优的扩增性能
针对人源基因组DNA，用不同品牌的qPCR试剂扩增检测，结果证明Vazyme品牌Taq Pro HighGC U+ Multiple Probe qPCR Mix（QN211）在FAM/VIC/CY5通道中，灵敏度、平台期与其他品牌相比表现更好。
2. 引入dUTP/UDG防污染系统
对于4pg、40pg、400pg不同模板投入量的样本，dUTP/UDG防污染的效率均高于99.9%。
3. 更优的稳定性
a. 扩增性能稳定性
对于稳定性保障，进行4℃、37℃加压和冻融稳定性测试。QN211在4℃条件下加压4周和37℃条件下加压7天，FAM/ROX/VIC/CY5通道的检测Ct值相差均在±0.5以内。处理组进行反复冻融10次、30次、50次，FAM/ROX/VIC/CY5通道的检测Ct值相差均在±0.5以内，扩增平台相差在20%以内。QN211具有优异的存储稳定性。
b. UDG清除效率
QN211在4℃条件下加压1-4周或冻融10次、30次和50次后，投入4pg、40pg和400pg的模板进行检测，UDG清除效率和对照组相比无明显差异。
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组分 |
QN211-01 (100 rxns/20 μl reaction) |
QN211-02 (500 rxns/20 μl reaction) |
QN211-03 (2,500 rxns/20 μl reaction) |
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2 × Taq Pro HighGC U+ Multiple Probe qPCR Mixa |
1 ml |
5 × 1 ml |
QN211-02 × 5 |
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50 × ROX Reference Dye 1b |
100 μl |
200 μl |
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50 × ROX Reference Dye 2b |
100 μl |
200 μl |
a. 包含dNTP/dUTP Mix，Mg2+，Taq Pro HS DNA Polymerase，Heat-labile UDG等。
b. 用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。使用ABI 7900HT/7300 Real-Time PCR System和StepOnePlus时使用50 × ROX Reference Dye 1；ABI 7500，7500 Fast Real-Time PCR System，Stratagene Mx3000P使用50 × ROX Reference Dye 2；Roche，Bio-Rad的Real Time PCR仪不必使用ROX。
-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输