人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒操作说明

人色素上皮衍生因子(PEDF)elisa试剂盒由上海供应,上海生物专业经营进口分装和原装标准品|对照品、国产/进口elisa试剂盒,国产/进口血清,生化试剂,培养基等科研生化试剂等。免费提供产品*新报价、实验原理、产品用途以及中英文说明书。我司多年为各大院校,各类医院,生物工程医药实验室以及其他行业科研消费者提供*全面、*周到的采购,上海欢迎您的来电订购!

名称:人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒
英文名:Human pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit
产地:国产/进口
参数规格:48T/96T
样本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
产品特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。
产品用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。

 

人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒操作说明 注意事项:
1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒操作说明 操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,*终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒操作说明 操作步骤:
1. 取出试剂盒,于室温(20-25℃)放置15-30分钟。实验过程应在室温(20-25℃)内进行。
2. 取出酶标板,按照标准品的次序分别加入50μl的标准品溶液于空白微孔中。
3. 空白微孔中加入50μl的样品,空白对照加入50μl的蒸馏水;
4. 在样品孔中加入10μl的生物素;(不含空白对照孔,切忌:生物素只加样品孔!)
5. 在各孔中加入100μl的酶标记溶液;(不含空白对照孔)
6. 将酶标板用封口胶密封后,37℃孵育反应 1小时;(在孵育箱中保持稳定的温度与湿度)
7. 充分清洗酶标板3-5次,保持各孔有充足的水压;(浓缩洗涤液以1:100的比例与蒸馏水稀释)
8. 酶标板洗涤后用吸水纸彻底拍干;
9. 各孔加入显色剂A、B液各50μl;(不含空白对照孔)
10. 20-25℃下避光反应15分钟;
11.各孔加入50μl终止液,终止反应。

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原创作者:上海生物科技有限公司

大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒操作说明

大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)elisa试剂盒由上海供应,上海生物专业经营进口分装和原装标准品|对照品、国产/进口elisa试剂盒,国产/进口血清,生化试剂,培养基等科研生化试剂等。免费提供产品*新报价、实验原理、产品用途以及中英文说明书。我司多年为各大院校,各类医院,生物工程医药实验室以及其他行业科研消费者提供全面、周到的采购,上海欢迎您的来电订购!

名称:大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒
英文名:Rat pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit
参数规格:48T/96T
样本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
产品特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。
产品用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。

大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒操作说明 操作洗板方法:
1.手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
2.自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
说明
1.在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
2.浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
4.所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
5.有效期:6个月。
6.本操作说明适用于48T试剂盒,但48T试剂盒所有试剂减半。
7.电子版说明书仅供参考,实际操作请按照随产品发送的印刷版说明书;中英文说明书可能会有不一致的地方,以英文说明书为准。

大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒操作说明 注意事项:
1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒操作说明 操作步骤:
1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50?l。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40?l,然后再加待测样品 10?l。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂 50?l,空白孔除外。
7.温育:操作同 3。
8.洗涤:操作同 5。
9.显色:每孔先加入显色剂 A50?l,再加入显色剂 B50?l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10.终止:每孔加终止液 50?l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。

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