Hydroxyphenyl fluorescein (HPF) 羟苯基荧光素
APF 氨基苯基荧光素;HPF羟苯基荧光素;H2DCFDA;Reactive oxygen species (ROS);Hydroxyl radical
羟基(HO•);CAS NO. 359010-69-8;
产品名称 | 产品编号 | 规格 | |
Hydroxyphenyl fluorescein (HPF) 羟苯基荧光素 | MX4805-1MG | 1mg |
氨基苯基荧光素(APF)和羟苯基荧光素(HPF)是由T. Nagano开发的两种活性氧(Reactive oxygen species, ROS)指示剂,比H2DCFDA(DCFH-DA, DCFH)具更优秀的特异性和稳定性。APF和HPF显示有限的非选择性反应,和相对较高的光诱导氧化抗性。APF和HPF具细胞膜渗透性,本身无荧光,直到与羟基自由基或过氧亚硝基阴离子反应,还能与次氯酸阴离子反应,产生强绿色荧光(Ex/Em,~490/515nm),可用荧光显微镜、高通量成像仪、荧光酶标板或流式细胞仪检测。
本品以粉末形式提供,可直接溶于无水DMSO配制成10mM储存液,常用工作浓度范围1-10μM,需根据自身的实验体系或参考文献进行优化。
产品特性
- CAS NO.:359010-69-8
- 同义名:3′-p-(hydroxyphenyl) fluorescein (HPF) 羟苯基荧光素
- 分子式:C26H16O6
- 分子量:424.41
- 纯度:≥95%
- Ex/Em:492/515nm
- 溶解性:溶于DMSO(10mM)、DMF(5mM)
- 化学结构:
使用方法
以下实验步骤仅做参考,需根据实际需求进行调整。在加入HPF工作液之前按需处理细胞。
- 将低温保存的粉末置于室温回温至少20min,之后加入适量无水DMSO配置成10-20mM储存液。按照单次用量分装,-20ºC避光保存,避免反复冻融。
- 根据具体用量,将DMSO储存液用HHBS缓冲液或其他生理缓冲液稀释成1-10μM工作液。
- 根据实验设计处理细胞(比如,RASM细胞用50-100nM 血管紧张素II处理3-5h)。
- 取步骤2)准备的1-10μM工作液加入细胞,37ºC孵育20-60min。
- 吸掉染色工作液,用HHBS或其他生理缓冲液替换。
- 用合适的荧光仪器(Ex/Em=492/515nm)来检测。
注1:BSA和酚红会影响荧光,需谨慎使用。
注2:APF和HPF能用于溶液体系或胞内ROS检测。
注意事项
- APF和HPF仅用于科研研究,不可用于体外诊断研究。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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