溴化乙锭溶液(EB,10mg/ml,RNase free)说明书

上海生物科技供应溴化乙锭溶液（EB,10mg/ml,RNase free）说明书，专业供应抗生素、维生素、培养基、染色剂、酶/辅酶、碳水化合物、分离试剂、缓冲试剂、核酸及衍生物、氨基酸/蛋白质等其它生化试剂。品质保证，货源充足。严格的生产质量控制体系，包括：优级纯，分析纯，化学纯，试剂级，基准试剂，实验纯，教学试剂，高纯试剂，色谱纯，光谱纯，电子纯。各种包装规格，并可提供包装定制，欢迎来电咨询。

名称：溴化乙锭溶液（EB,10mg/ml,RNase free）

供应商：

产地：国产/进口

规格：5ml/10ml

分类：核酸电泳

储存方式：室温，避光，12个月

产品用途：高度灵敏的荧光染色剂，用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA

注意事项：主要由溴化乙锭/EB和去离子水组成。

溴化乙锭溶液（EB,10mg/ml,RNase free）说明书：

●购买后，请务必确认标签上的注意事项。

●做好预防颠倒，摔坏的措施和管理体制。

●在使用前再次确认标签上的注意事项。做好必要的安全对策。

●对没有标明其危险特性？有害特性的，也要慎重地进行操作。

●必须戴好防护用具，小心翼翼进行操作。

●请参照相关法规，文献，MSDS等信息，理解并掌握好试剂的特性。再进行安全操作。

●通常购买试剂时要想到一次性用完。若估算不足有剩余的话，要更加注意其保管和管理。

●万一试剂操作者并非专业技术人员。必须在专业人士的指导监督下进行操作。

●对于使用后的废弃物，不要或旧的试剂，应按照相关法律法规正当处理。

溴化乙锭溶液（EB,10mg/ml,RNase free）说明书 订购说明：

1、绝大部分产品备有现货，一般情况下都能订货当日发货。

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生物，专业供应科研实验所需的培养基，抗体，动物血清血浆，标准品对照品，化学试剂，酶联免疫试剂盒，白介素试剂盒，金标检测试剂盒，微生物，蛋白质，ELISA种属涵盖广，凭借多年行业经验，完善的售后服务，高质量的产品，赢得客户一致好评，欢迎来电咨询与订购！

原创作者：上海生物科技有限公司

NEB代理,蛋白表达和纯化技术,表达系统:无细胞表达

产品资料 – 蛋白表达和纯化技术 – 表达系统：无细胞表达

NEBExpress™ Cell-free E. coli Protein Synthesis System

#E5360L 100 rxns

#E5360S 10 reactions

Description

NEB代理 , 蛋白表达和纯化技术 , 表达系统：无细胞表达

Product Information

NEB代理 , 蛋白表达和纯化技术 , 表达系统：无细胞表达

Advantages and Features

NEB代理 , 蛋白表达和纯化技术 , 表达系统：无细胞表达

Properties & usage

Storage Temperature

-80°C

NEB代理,蛋白表达和纯化技术,PURExpress二硫键增强剂

产品资料 – 蛋白表达和纯化技术 – 表达系统：无细胞表达

PURExpress二硫键增强剂

#E6820S 50 次反应

特性

 合成用于蛋白质特性研究的分析量级别的样品

 确定开放阅读框

 合成具有活性和功能域的截短蛋白

 在合成的蛋白质中掺入修饰的、非天然的或标记的氨基酸（NEB# E6840 ，#E6850）

 tRNA 结构与功能研究（NEB #E6840）

 核糖体结构与功能研究（NEB# E3313，NEB #P0763）

 释放因子功能研究/ 核糖体展示（NEB #E6850）
 绘制抗原表位图谱

PURExpress 试剂盒采用 PURE 系统技术，该技术最早由东京大学 Takuya Ueda 博士发明，Biocomber（日本，东京）商业化为 PUResYsTeM^®。

概述

PURExpress^® 体外蛋白合成试剂盒是新型无细胞转录/翻译系统，用于基因快速表达分析，是由大肠杆菌翻译所必需组份纯化而构成。PURExpress 系统无核酸酶和蛋白酶的污染，保护了模板 DNA 和 RNA，避免了蛋白的修饰及降解。转录和翻译过程仅需将两管试剂混合，一步反应即可完成，几个小时就可观察实验结果，PURExpress 系统大大地节省了宝贵的实验时间，特别适合于高通量技术。

NEB代理 , 蛋白表达和纯化技术 , 表达系统：无细胞表达

使用 PURexpress 体外蛋白合成试剂盒表达蛋白质。25 μl 反应体系中加入 250 ng 模板 DNA 和 20 单位 RNase 抑制剂，37℃ 反应 2 小时。各取 2.5 μl 反应液，进行 10-20% Tris-甘氨酸 SDS-PAGE 电泳分析。红点处指示的为目的蛋白。Marker M 是蛋白质分子量标准（NEB #P7703）

优点

• 适用于环状或线型 DNA 模板

• 合成的蛋白经考马斯亮蓝染色可见

• 约 2 小时即可完成蛋白表达
• 转录/翻译的组份通过亲和层析即可去除

PURexpress 二硫键增强剂

该专利产品的成分为蛋白质与缓冲液，当 PURExpress 系统合成或 E. coli S30 提取的目的蛋白具有较多二硫键时，能帮助其正确折叠。在合成反应开始时加入 PURExpress 二硫键增强剂，能够协助半胱氨酸硫醇的氧化，并纠正硫醇的错误氧化，从而提高可溶性蛋白及具有功能活性蛋白的产量。

NEB代理 , 蛋白表达和纯化技术 , 表达系统：无细胞表达

PURexpress 二硫键增强剂。（PDBE）促进活性 vtPA 的正确折叠。反应按照 PURExpress 系统说明进行，以 vtPA DNA 为模板。37℃ 下温育 2 小时后，取 5 μl 反应液进行活性检测，在 1 小时内监测发光底物的剪切反应。

PURexpress Δ Ribosome 试剂盒

此试剂盒中移除了核糖体，使得研究蛋白翻译的用户能够使用自己的修饰核糖体。试剂盒还提供单独一管的对照核糖体（2 次反应用量）。

PURexpress Δ RF123 试剂盒

释放因子通过识别 mRNA 序列上的终止密码子参与蛋白翻译的终止过程。采用 PURExpress 进行核糖体展示实验时，缺乏释放因子能够稳定 mRNA-核糖体-新生肽链形成的三元复合体。因此 cDNA 的回收率会更高。该试剂盒单独提供三种释放因子，用户能够自行选择在有或无释放因子的条件下进行蛋白质体外合成或核糖体展示。

PURexpress Δ (aa, tRNA) 试剂盒

该试剂盒单独提供 tRNA 与氨基酸，用户能够向反应体系中加入修饰过的氨基酸与 tRNA 混合液进行蛋白质合成反应。

E. coli 核糖体

大肠杆菌的 70S 核糖体由一个小亚基（30S）与一个大亚基（50S）组成。该核糖体试剂在 NEB 的 PURExpress体外蛋白合成试剂盒（NEB #E6800）中活性很高，在核糖体结构与功能研究中，能够用于药物筛选的靶标以及分离天然核糖体 RNA（5S、16S、23S）的起始材料。该产品溶液浓度为 33.3 mg/ml。

PURexpress 试剂盒组分

NEB代理 , 蛋白表达和纯化技术 , 表达系统：无细胞表达

NEB代理,蛋白表达和纯化技术,PURExpress Δ (aa, tRNA) 试剂盒

产品资料 – 蛋白表达和纯化技术 – 表达系统：无细胞表达

PURExpress Δ (aa, tRNA) 试剂盒 #E6840S 10 次反应

特性

 合成用于蛋白质特性研究的分析量级别的样品

 确定开放阅读框

 合成具有活性和功能域的截短蛋白

 在合成的蛋白质中掺入修饰的、非天然的或标记的氨基酸（NEB# E6840 ，#E6850）

 tRNA 结构与功能研究（NEB #E6840）

 核糖体结构与功能研究（NEB# E3313，NEB #P0763）

 释放因子功能研究/ 核糖体展示（NEB #E6850）
 绘制抗原表位图谱

PURExpress 试剂盒采用 PURE 系统技术，该技术最早由东京大学 Takuya Ueda 博士发明，Biocomber（日本，东京）商业化为 PURESYSTEM^®。

PURESYSTEM™ is a trademark of Post Genome Institute.

概述

PURExpress^® 体外蛋白合成试剂盒是新型无细胞转录/翻译系统，用于基因快速表达分析，是由大肠杆菌翻译所必需组份纯化而构成。PURExpress 系统无核酸酶和蛋白酶的污染，保护了 DNA 和 RNA模板/复合体，避免了蛋白的修饰及降解。转录和翻译过程仅需将两管试剂混合，一步反应即可完成，几个小时就可观察实验结果，PURExpress 系统大大地节省了宝贵的实验时间，特别适合于高通量技术。

NEB代理 , 蛋白表达和纯化技术 , 表达系统：无细胞表达

优点

• 适用于环状或线型 DNA 模板

• 合成的蛋白经考马斯亮蓝染色可见

• 约 2 小时即可完成蛋白表达
• 转录/翻译的组份通过亲和层析即可去除

PURexpress 二硫键增强剂

NEB代理 , 蛋白表达和纯化技术 , 表达系统：无细胞表达

PURexpress Δ Ribosome 试剂盒

此试剂盒中移除了核糖体，使得研究蛋白翻译的用户能够使用自己的修饰核糖体。试剂盒还提供单独一管的对照核糖体（2 次反应用量）。

PURexpress Δ RF123 试剂盒

PURexpress Δ (aa, tRNA) 试剂盒

该试剂盒单独提供 tRNA 与氨基酸，用户能够向反应体系中加入修饰过的氨基酸与 tRNA 混合液进行蛋白质合成反应。

E. coli 核糖体

PURexpress 试剂盒组分

NEB代理 , 蛋白表达和纯化技术 , 表达系统：无细胞表达

NEB代理,蛋白表达和纯化技术,表达系统,磁性基质和磁分离架,6 孔磁性分离架

产品资料 – 蛋白表达和纯化技术 – 表达系统：磁性基质和磁分离架

6 孔磁性分离架

#S1506S 6 孔 (1.5 ml)

概述

磁性分离架是专为使用磁珠进行少量分离而设计的产品。磁体位于分离架侧壁，可减少移液过程中样本的损失。

磁体

钕永磁材料。

尺寸

6-管磁力架 (3″ x 2″ x 1¾”), 12-管磁力架 (5½” x 2″ x 1¾”), 50 ml 磁力架 (3½” x 4¼” x 3½”) 和 96 孔微孔板磁性分离架 (5½” x 1¼” x 3¾”)。

NEB代理 , 蛋白表达和纯化技术 , 表达系统：磁性基质和磁分离架

NEB代理,50 ml 磁性分离架,表达系统,磁性基质和磁分离架

产品资料 – 蛋白表达和纯化技术 – 表达系统：磁性基质和磁分离架

50 ml 磁性分离架

#S1507S 4 孔 (50 ml

概述

磁性分离架是专为使用磁珠进行少量分离而设计的产品。磁体位于分离架侧壁，可减少移液过程中样本的损失。

磁体

钕永磁材料。

尺寸

6-管磁力架 (3″ x 2″ x 1¾”), 12-管磁力架 (5½” x 2″ x 1¾”), 50 ml 磁力架 (3½” x 4¼” x 3½”) 和 96 孔微孔板磁性分离架 (5½” x 1¼” x 3¾”)。

NEB代理 , 蛋白表达和纯化技术 , 表达系统：磁性基质和磁分离架

EB Eraser 强力溴化乙啶去除剂,MKRed 核酸凝胶染料

EB Eraser 强力溴化乙啶去除剂是一种专门用于清除溴化乙锭（Ethidium Bromide, EB）污染的产品，能够有效破坏EB的结构，清除EB的致癌性，从而实现清洁EB污染的目的。

EB Eraser 强力EB去除剂

EB Eraser 强力EB去除剂； Ethidium bromide (EB, EtBr) 溴化乙锭；GelRed; Dured; MKRed 核酸凝胶染料； SYBR Green I；

产品信息

产品名称	产品编号	规格
EB Eraser 强力EB去除剂	MF0757-50T	50T
EB Eraser 强力EB去除剂	MF0757-100T	100T

产品描述

强力EB去除剂（EB Eraser）是一种专门用于清除溴化乙锭（Ethidium Bromide, EB）污染的产品，能够有效破坏EB的结构，清除EB的致癌性，从而实现清洁EB污染的目的。本品适用于清除电泳缓冲液、生化溶液和固体表面的EB污染（如实验台、离心机、玻璃器皿、不锈钢制品等）。经本品处理的EB污染物，再丢弃可以保护环境不受影响。

强力EB去除剂的特点在于能破坏EB结构，消除EB荧光，使得EB的致突变性降低99.5%以上。

产品组成

组分编号	组分名称	产品货号（规格）
组分编号	组分名称	MF0757-50T	MF0757-100T
MF0757-A	溶液A Solution A	100ml	200ml
MF0757-B	去除剂B Eraser B	35g	50g

注意事项

1）溶液A具有腐蚀性，操作过程中请做好防护措施，避免直接接触。

2）工作液配制和EB处理过程中可能会有微量刺激气体产生，请务必在通风橱内操作。

3）没有任何方法能保证100%去除EB，因此，即使用本品处理后，进行过EB操作的工作区域以及所有可能接触到EB的重复使用仪器或设备等，都必须要做好防护措施，不要直接接触。

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

产品使用（实验前请阅读注意事项）

一、各种污染溶液处理（以100ml污染液为例）

1.1 确保各种污染溶液内EB浓度不超过0.5mg/ml。如果浓度较高，请先用水稀释到符合要求的浓度。

1.2 工作液制备：于通风橱内，用去离子水将2ml 溶液A稀释到终体积20ml，混匀后待用。称取0.42g去除剂B溶于10ml水，充分溶解后定容到终体积12ml，混匀后待用。

1.3 将上述20ml溶液A工作液和12ml去除剂B工作液依次加入100ml EB污染液中，小心搅拌混匀（确保pH≤3）。

1.4 室温放置反应24h，用碳酸氢钠调节pH至5-9。

1.5 用大量水将反应物冲入水槽废弃。

二、各种固体表面污染处理

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货号	名称	规格
MF0756-1G	Ethidium Bromide (EB)溴化乙锭	1g
MF0756-5ML	EB（10 mg/ml in Water）EB水溶液（10 mg/ml）	5ml
MF0757-50T	EB Eraser强力EB去除剂	50T
MX4217-1G	Acridine Orange Hydrochloride吖啶橙盐酸盐	1g
MF0753-1ML	GoldView Nucleic Acid Gel Stain (10,000×)核酸染料（10,000×）	1ml
MF0754-500UL	MKRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water)核酸染料（同GelRed）	500µl
MF0755-500UL	MKGreen Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water)核酸染料（同GelGreen）	500µl

EB Eraser 强力溴化乙啶去除剂

AO/EB双染试剂盒,异染的核酸结合染料

AO/EB双染试剂盒吖啶橙（Acridine Orange，AO）是一种异染的核酸结合染料，具细胞膜渗透性，通过插入或静电吸引的方式与DNA或RNA结合。当与双链DNA（dsDNA）结合发射绿色荧光（Ex/Em=502/525nm），与单链DNA（ssDNA）或RNA结合发射红色荧光（Ex/Em=460/650nm），少量结合呈橙红色荧光。

AO/EB Double Staining Kit AO/EB双染试剂盒

吖啶橙（Acridine Orange，AO）；溴化乙锭（Ethidium Bromide, EB）；Apoptotic cell 凋亡细胞；Necrotic cells坏死细胞；Annexin V/PI 细胞凋亡双染；

产品名称	产品编号	规格
AO/EB Double Staining Kit AO/EB双染试剂盒	MX3249-100T	100T

产品描述

吖啶橙（Acridine Orange，AO）是一种异染的核酸结合染料，具细胞膜渗透性，通过插入或静电吸引的方式与DNA或RNA结合。当与双链DNA（dsDNA）结合发射绿色荧光（Ex/Em=502/525nm），与单链DNA（ssDNA）或RNA结合发射红色荧光（Ex/Em=460/650nm），少量结合呈橙红色荧光。溴化乙锭（Ethidium Bromide, EB）是一种多环芳烃荧光小分子和核酸插入剂，嵌合到双链DNA或RNA的碱基对内，无碱基特异性，呈红色荧光（（Ex/Em=518/605nm）。EB不具细胞膜渗透性。

吖啶橙（AO）和溴化乙锭（EB）常常联合使用来观察细胞核变化和凋亡小体形成，这些都是凋亡的特征。两者结合能区分活细胞、凋亡细胞和坏死细胞。工作原理在于吖啶橙能同时染活细胞和死细胞，EB只能对丧失膜完整性的细胞进行染色。活细胞呈均匀的绿色。早期凋亡细胞呈绿色，并且在细胞核能看到亮绿色的点，由于染色体浓缩和核断裂。晚期凋亡细胞也会被EB着色，从而染成橙红色，但，与坏死细胞相比，晚期凋亡细胞会有浓缩和常常断裂的核。坏死细胞也被染成橙红色，但会有和活细胞相似的核形态，没有浓缩的染色体。

产品包装

编号	组分名称	保存方法	货号（规格）
编号	组分名称	保存方法	MX3233-20T
MX3249-A	AO Stain Solution 吖啶橙染液	4℃避光	200μl
MX3249-B	EB Stain Solution 溴化乙锭染液	4-25℃避光	200μl
MX3249-C	Dilution Buffer 稀释缓冲液	4℃避光	50ml

注意事项

1）AO与EB都有一定毒性，请小心操作。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1. 染色工作液的制备

于正式实验前，取吖啶橙染液（试剂A）、溴化乙锭染液（试剂B）、稀释缓冲液（试剂C），按照A:B:C=1:1:8的比例稀释成所需的AO/EB染色工作液。

2. 细胞准备

贴壁细胞：按照常规方法消化。于1000rpm离心5min，收集细胞沉淀，用PBS清洗一次。

悬浮细胞：于1000rpm离心5min，收集细胞沉淀，用PBS清洗一次。

之后用稀释缓冲液（试剂C）重悬细胞，细胞计数，调整细胞密度为0.5-5×10⁶个/ml。

3. 染色

每25μl细胞悬液中，加入2μl 新鲜制备的AO/EB染色工作液，轻轻混合均匀。室温孵育5~10min。

4. 观察

取干净载玻片，滴加5~10μl 染色的细胞悬液，盖上盖玻片。使用荧光显微镜的荧光素滤片和60倍放大的物镜来观察和计数。该测定至少重复三次，每次观察的总细胞至少100个。

【注意】：根据细胞类型选择理想的物镜放大倍数（更高或更低），前提是必须看清核形态。

应用示例（来自文献）：

文献：Dual AO/EB Staining to Detect Apoptosis in Osteosarcoma Cells Compared with Flow Cytometry.

染色方法：Dual fluorescent staining solution (1 μl) containing 100 μg/ml AO and 100 μg/ml EB (AO/EB) was added to each suspension and then covered with a coverslip. The morphology of apoptotic cells was examined and 500 cells were counted within 20 min using a fluorescent microscope (OLYMPUS). Dual acridine orange/ethidium bromide (AO/EB) staining method was repeated 3 times at least.

Fig. (A) 阴性对照细胞（正常细胞）：环形细胞核均匀分布在细胞中央。(B)实验组 (早期凋亡细胞): 吖啶橙（AO）染色后的细胞核呈黄绿色荧光，以月牙形或颗粒的形态聚集位于细胞的一边。(C) 实验组 (晚期凋亡细胞): 经EB染色后的细胞核呈橙红荧光，集中聚集且偏重定位。(D) 坏死细胞：坏死细胞体积增加，显示平整的橙红色荧光和不清晰的轮廓。细胞正要溶解或接近崩溃。

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