Reaction of NO quenching
Preparation of Fe(II)-DTCS Complex1. 用 20 ml 水溶解 278 mg FeSO4, 7H2O(七水硫酸亚铁)a) 以制备 50 mM FeSO4 溶液。b)2。用 10 ml watera) 溶解 123 mg DTCS Na,以制备 50 mM DTCS solution.3。将 1 ml DTCS Na 溶液与 8.8 ml 缓冲溶液a)(pH 7 或更高)混合。在使用前加入 200 μl FeSO4 溶液。c)a) 在溶解 FeSO4 之前,通过氮气鼓泡至少 30 分钟清除水中或缓冲液中的任何溶解氧。b) FeSO4 溶液可在 -20ºC 下储存至少 2 个月。c) Fe(II)-DTCS 复合物是无色的。如果溶液呈棕色,则可能由于溶液中溶解氧而形成了 Fe(III)-DTCS。但棕色溶液仍可用于NO捕集。NO-Fe(II)-DTCS配合物的制备1.在氩气流下,将 200 μl FeSO4 溶液添加到 9.4 ml 缓冲溶液(pH 7 或更高)中。然后通过玻璃毛细管将 NO 气体鼓泡 15 分钟,将 NO 引入溶液中。2。向 FeSO4 溶液中加入 400 μl DTCS Na 溶液,继续鼓泡 5 分钟引入 NO。 3.用氩气鼓泡 5 分钟去除多余的 NO,并储存在 -20ºC。 NO-Fe(II)-DTCS 溶液可在 -20ºC 无氧条件下储存至少 2 个月。
1. T. Yoshimura, et al., In vivo EPR Detection and Imaging of Endogenous Nitric Oxide in Lipopolysaccharide-treated Mice. Nat Biotechnol. 1996;14:992-994.2. B. Kalyanaraman, Detectionof Nitric Oxide by Electron Spin Resonance in Chemical, Photochemical, Cellular, Physiological, and Pathophysiological Systems. Methods Enzymol. 1996;268:168-187.3. H. Yokoyama, et al., In vivo ESR-CT Imaging of the Liver in Mice Receiving Subcutenous Injection of Nitric Oxide-Bound Iron Complex. Magn Reson Imaging. 1997;15:249-253.