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Dojindo,-SulfoBiotics- PEG-PCMal/1/SB20, -SulfoBiotics- PEG-PCMal电泳分析可视化蛋白质氧化还原状态的试剂

蛋白质硫醇的修饰是最重要的翻译后修饰之一，它根据细胞中的氧化还原状态发生。最近发现，硫醇基团的修饰控制细胞功能，例如转录、蛋白质表达、细胞死亡等。因此，检测单个蛋白质的氧化还原状态对于了解细胞事件很重要。 -SulfoBiotics- PEG-PCMal 是一种通过电泳分析可视化蛋白质氧化还原状态的试剂。 PEG-PCMal 具有一个马来酰亚胺基团，可以与蛋白质硫醇基团共价结合。当一个 PEG-PCMal 分子与靶蛋白的硫醇基团结合时，通过电泳分析观察到对应于约 5 kDa 的迁移率变化。因此，通过迁移率变动分析，可以通过 SDS-PAGE 清楚地识别蛋白质上游离硫醇基团的数量。传统试剂 PEG-马来酰亚胺已广泛用于迁移率变化测定，但由于蛋白质中标记的 PEG 链，转移效率和蛋白质印迹上的抗体识别率较低。由于该试剂在分子中具有紫外光可裂解部分，因此在电泳后用紫外光照射凝胶中的标记蛋白将PEG链切断。因此，经紫外线照射处理的蛋白质可以从凝胶转移到 PVDF 膜上并被抗体检测。

Figure 1 Schematic protocol of PEG-PCMal

Figure 2 Structure of PEG-PCMal

Figure 3 Gel shift assay mechanism by PEG-PCMal depend on protein redox state

1. L. Makmura, M. Hamann, A. Areopagita, S. Furuta, A. Munoz and J. Momand. , “Development of a sensitive assay to detect reversibly oxidized protein cysteine sulfhydryl groups”, Antioxid Redox Signal., 2001, 3, (6), 1105.2. HH Wu, J.A. Thomas and J. Momand, “p53 protein oxidation in cultured cells in response to pyrrolidine dithiocarbamate: a novel method for relating the amount of p53 oxidation in vivo to the regulation of p53-responsive genes”, Biochem J., 2000, 351, 87.3. JR. Burgoyne, O. Oviosu and P. Eaton., “The PEG-switch assay: A fast semi-quantitative method to determine protein reversible cysteine oxidation”, J Pharmacol Toxicol Methods., 2013, 68, (3), 297.4. L. JTetsch, C. Koller, A. Donhofer and K. Jung, “Detection and function of an intramolecular disulfide bond in the pH-responsive CadC of Escherichia coli”, BMC Microbiol., 2011, doi: 10.1186/1471-2180-11-74.

Analysis of the redox states of TRX (Thioredoxin) in HeLa cells

Figure 4 Visualization of the redox state of the TRX in HeLa cells

Analysis of the redox states of protein (ATP synthase γ subunit) in Arabidopsis thaliana

Figure 5 Visualization of the redox state of the photoresponsive protein in Arabidopsis thaliana

Technical advisorDr. Toru Hisabori (Laboratory for Chemistry and Life Science, Institute of Innovative Research, Tokyo Institute of Technology)Dr. Keisuke Yoshida (Laboratory for Chemistry and Life Science, Institute of Innovative Research, Tokyo Institute of Technology)Dr. Satoshi Hara (School of Life Science and Technology, Tokyo Institute of Technology)

Dojindo,Dithiobis(succinimidyl undecanoate)/50/D537

 Product Description of Succinimidyl Alkanedisulfides
琥珀酰亚胺酯封端的烷基二硫化物是羧烷基二硫化物的胺反应性类似物。 它们用于修饰金表面以在表面上引入胺反应位点。 可以将这种技术用于蛋白质芯片和各种传感器。 无需使用偶联剂，因为这些化合物已被活化。 Wagner 和其他人通过扫描隧道显微镜 (STM)、放射性标记和原位 AFM 成像对金基板上的二硫代双（琥珀酰亚胺十一酸）SAM 进行了表征。 紧密堆积和高反应性的表面使它们能够轻松地固定氨基酸和蛋白质。

Dojindo,Dithiobis(C2-NTA)/50/D550

Dithiobis(C2-NTA) 用于修饰金表面以引入可以结合大多数重金属离子的 NTA 基团。 它形成类似于其他烷硫醇的 SAM。 使用二硫代双 (C2-NTA) 制备的 SAMs 由于其烷基链相互作用而具有高度单向性。 Ni(II)-NTA 螯合物通常用于组氨酸标签 (His-tag) 的蛋白质纯化或分离。 因此，Ni(II)-NTA 涂层金可用于 His 标签蛋白分析。 Dithiobis(C2-NTA) 溶于水和酒精。 在一些论文中它也被称为二硫化物-NTA。

Piezo electric sensor for endocrine-disrupting chemicals using receptor-co-factor interactionM. Murata, C. Gouda, K. Yano, S. Kuroki, T. Suzutani, Y. Katayama, Anal. Sci., 2003, 19, 1355.

Gene mutation assay using a MutS protein-modified electrodeAishan Han, Taiki Shibata, Tohru Takarada, and Mizuo Maeda, Nucleic Acids Symp Ser, 2002, 2: 287,

Dojindo,11-氨基-1-十一烷硫醇盐酸盐/100/A423

氨基烷硫醇用于修饰金表面以在表面上引入氨基。 Dojindo 新开发的 16-Amino-1-hexadecanethiol 具有 16 个碳链，是市场上最长的烷硫醇。由于烷烃基团之间的范德华力较大，预计在氨基烷硫醇化合物中，16-氨基-1-十六烷硫醇将在金表面上形成最稳定的SAM。五种不同的氨基烷硫醇，包括氨基-EG6-十一烷硫醇、盐酸盐，可用于金表面改性。氨基-EG6-十一硫醇用于亲水表面制备。氨基通常使用胺反应性材料（例如蛋白质或生物材料）进行修饰，以使金表面功能化。一些研究人员已经报道了短烷基链氨基烷硫醇的 SAM，并且关于长烷基链化合物的报道越来越多。 Takahara 等人在金电极上形成了单层 11-氨基-1-十一硫醇，并使用伏安法研究了末端基团对二茂铁衍生物氧化还原反应的影响。他们还报道了氨基烷硫醇的烷基链长度与连接到末端氨基的 2,3-二氯-1,4-萘醌的氧化还原行为之间的关系。 Tanahashi 和同事用几种功能化烷硫醇的 SAM 修饰了金表面。他们使用 X 射线光电子能谱 (XPS) 测量和石英晶体微天平 (QCM) 方法报告了其末端官能团对模拟体液中磷灰石形成的影响。

How to prepare the SPR-Chip:

1. J. M. Brockman, A. G. Frutos and R. M. Corn, A Multistep Chemical Modification Procedure To Create DNA Arrays on Gold Surface for the Study of Protein-DNA Interactions with Surface Plasmon Resonance Imaging, J. Am. Chem. Soc., 1999, 121, 8044.2. Y. Yoshimi, T. Matsuda, Y. Itoh, F. Ogata and T. Katsube, Surface Modifications of Functional Electrodes of a Light Addressable Potentiometric Sensor (LAPS): Non-Dependency of pH Sensitivity on the Surface Functional Group, Mater. Sci. Eng. C, 1997, 5, 131.3. M. Tanahashi and T. Matsuda, Surface Functional Group Dependence on Apatite Formation on Self-assembled Monolayers in a Simulated Body Fluid, J. Biomed. Mater. Res., 1997, 34, 305.4. J. Tien, A. Terfort and G. M. Whitesides, Microfaburication through Electrostatic Self-Assembly, Langmuir, 1997, 13, 5349.5. F. Mukae, H. Takemura and K. Takehara, Electrochemical Behavior of the Naphtoquinone Anchored onto a Gold Electrode through the Self-Assembled monolayers of Aminoalkanethiol, Bull. Chem. Soc. Jpn., 1996, 69, 2461.6. S. Rubin, G. Bar, R. W. Cutts, J. T. Chow, J. P. Ferraris, and T. A. Zawodzinski, Electrical Communication Between Glucose Oxidase and Different Ferrocenylalkanethiol Chain Lengths, Mater. Res. Soc. Symp. Proc., 1996, 413, 377.7. K. Takehara and H. Takemura, Electrochemical Behaviors of Ferrocene Derivatives at an Electrode Modified with Terminally Substituted Alkanethiol Monolayer Assemblies, Bull. Chem. Soc. Jpn., 1995, 68, 1289.8. K. Takehara, H. Takemura and Y. Ide, Electrochemical Studies of the Terminally Substituted Alkanethiol Monolayers Formed on a Gold Electrode; Effect of the Terminal Group on the Redox Responses of Fe(CN)63-,Ru(NH3)63+ and Ferrocenedimethanol, Electrochim. Acta, 1994, 39, 817.9. H. J. Lee, A. W. Wark, Y. Li and R. M. Corn, Fabricating RNA Microarrays with RNA-DNA Surface Ligation Chemistry, Anal. Chem., 2005, 77, 7832.

Dojindo,6-Hydroxy-1-hexanethiol/10/H339,16-Hydroxy-1-hexadecanethiol 具有 16 个碳链

羟基烷硫醇用作金表面上的稀释试剂以控制反应基团的密度，或用作封闭剂以防止分析物在表面上的非特异性结合。新开发的 16-Hydroxy-1-hexadecanethiol 具有 16 个碳链，是市场上羟基烷硫醇中最长的烷硫醇。总共有 6 种不同的羟基烷硫醇，包括可用于金表面改性的羟基-EG6-十一烷硫醇和羟基-EG3-十一烷硫醇。当应用 16-Amino-1-hexadecanethiol 或 15-Carboxy-1-pentadecanethiol 时，16-Hydroxy-1-hexadecanethiol 用于制备均匀且高度定向的 SAM。 Herne 和他的同事在金表面上制造了硫醇衍生的单链 DNA (HS-ss-DNA) 和 6-Hydroxy-1-己硫醇的混合 SAM，以防止 HS-ss-DNA 的非特异性吸附。 Perez-Luna 和其他人在金表面上制作了生物素末端硫醇和 11-羟基-1-十一烷硫醇的混合 SAM。它们阻止了野生型链霉亲和素和链霉亲和素突变体的非特异性吸附。 Dubrovsky 及其同事使用 11-Hydroxy-1-十一硫醇控制了蛋白质在镀金硅胶表面上的非特异性吸附。他们提到了镀金硅胶在制备用于生物测定的明确的、表面功能化的支持物方面的有用性。

Dojindo,TOPS/1/OC14

1. K. Tamaoku, et al., New water-soluble Hydrogen Donors for the Enzymatic Photometric Determination of Hydrogen Peroxide. II. N-Ethyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)aniline derivatives. Chem Pharm Bull. 1982; 30:2492-2497.2. K. Tamaoku, et al., New water-soluble Hydrogen Donors for the Enzymatic Spectrophotometric Determination of Hydrogen Peroxide. Anal Chim Acta. 1982; 136:121-127.3. B. C. Madsen, et al., Flow Injection and Photometric Determination of Hydrogen Peroxide in Rainwater with N-Ethyl-N-(sulfopropyl)aniline sodium salt. Anal Chem. 1984; 56:2849-2850.

Dojindo,INT/1/I003

DescriptionReferencesS.D.S

Oxidation Reaction

1. A. Johannsson, et al., A Fast Highly Sensitive Colorimetric Enzyme Immunoassay Sysytem Demonstrating Benefits of Enzyme Amplification in Clinical Chemistry. Clin Chim Acta. 1985;148:119-124.

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

应用 产品展示
细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
细胞计数试剂盒8 + 96孔有机硅定向剂
细胞计数试剂盒-F
细胞毒性LDH检测试剂盒
-WST 96孔有机硅定向剂
MTT
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细胞周期分析 细胞周期测定溶液深红色
细胞周期测定溶液蓝色