DiD Perchlorate 细胞膜红色荧光探针

DiD Perchlorate 细胞膜红色荧光探针:DiD是DiI的结构类似物,激发和发射波长具显著的红色迁移,这一特征使其能够避光自发荧光和光毒性效应,以及适用于双色标记。

DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针

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产品名称                                                                产品编号              CAS NO           规格                
DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针 MX4004-25MG 127274-91-3 25mg

DiI, DiO, DiD和DiR作为一类长链的亲脂性二烷基碳菁类染料(Dialkylcarbocyanines)荧光染料家族,用于标记细胞膜以及其他脂溶性生物结构。作为一类环境敏感型荧光染料,当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子(例如蛋白质,虽然在水中其荧光强度很弱)结合时,其荧光强度显著增强。一旦进入细胞后,它们在细胞内质膜中逐步扩散,于加浓度条件下可将整个细胞均匀染色。这些染料具很高的淬灭系数,偏光依赖性和很短的激发寿命。

本品以DiD的高氯酸盐形式提供,英文名:1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-Tetramethylindodicarbocyanine Perchlorate,纯度≥95%,适用于荧光检测研究。

基本特性:

1)化学名:2-[5-(1,3-Dihydro-3,3-dimethyl-1-octadecyl-2H-indol-2-ylidene)-1,3-pentadien-1-yl]-3,3-dimethyl-1 -octadecyl-3H-indolium perchlorate

2)同义名:DiD Perchlorate; DiIC18(5); 1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-Tetramethylindodicarbocyanine Perchlorate;

3)推荐滤光器:Omega-XF110, XF47, Chroma-41008, 31023

4)分子式:C61H99ClN2O4

5)分子量:959.91g/mol

6)外观:紫色或深蓝色固体

7)纯度:≥95%

8)Ex/Em:644/665 nm(甲醇)

9)溶解性:溶于DMF,DMSO,甲醇

10)化学结构图: DiD Perchlorate 细胞膜红色荧光探针    

应用示例(来自文献):

文献来源:Diao J et al. A single vesicle-vesicle fusion assay for in vitro studies of SNAREs and accessory proteins. Nat Protoc. 2012 May;7(5):921-34.

DiD Perchlorate 细胞膜红色荧光探针

1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindodicarbocyanine perchlorate, DiIC18(5) (DiD)

1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindocarbocyanine perchlorate, DiIC18(3) (DiI)

注意事项

1)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

使用方法

【注意】以下使用方法仅用作参考,可根据具体的实验条件做出调整。

1. 染色液制备

 

1)储存液制备:用DMSO或乙醇配置浓度1~5 mM的储存液。例如,取25mg DiD(Mw:959.91g/mol)溶于5.21ml无水DMSO中,充分溶解,即得到5mM的储存液。【注意】未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融,且要避光保存。

2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,调整到1~5 μM的工作浓度。

 

2. 悬浮细胞染色

3. 贴壁细胞染色

4. 显微镜检测

1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS滤光器的选择参见下表:

货号                      荧光探针         大激发/大发射波长    

(Ex/Em)

滤光片编号
Omeaga公司 Chroma公司                
MX4002-10MG DiI 549/565nm XF108, XF32 41002, 31002
MX4001-25MG DiO 484/501nm XF100,XF2341001, 31001 41001, 31001
MX4004-25MG DiD 644/665nm XF110, XF47 41008, 31023
MX4005-25MG DiR 750/780nm XF112 41009

2)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:

a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;

b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;

c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005;

 

5. 流式细胞仪检测

经DiO,DiI,DiD和DiR染色的细胞分别用流式细胞仪的FL1,FL2,FL3或FL4通道检测。

 

DiD Perchlorate 细胞膜红色荧光探针

DiD Perchlorate 细胞膜红色荧光探针