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DEAE纤维素DE-32,DEAE-cellulose DE-32

    上海生物科技公司是国内elisa试剂盒优质供应商，供应DEAE纤维素DE-32,DEAE-cellulose DE-32，代理销售不同elisa试剂盒品牌的进口/国产elisa试剂盒，专业供应科研实验所需的培养基，抗体，动物血清血浆，标准品对照品，化学试剂，酶联免疫试剂盒，白介素试剂盒，金标检测试剂盒，微生物，蛋白质，ELISA种属涵盖广，凭借多年行业经验，完善的售后服务，高质量的产品。欢迎来电咨询。

    中文名称：DEAE纤维素DE-32

    英文名称：DEAE cellulose DE-32；DEAE-Cellulose microgranular

    其他名称：二乙氨基乙基纤维素32；2-（二乙氨基）乙迷纤维素32

    CAS号：9013-34-7

    级别：柱层析

    功能团：二乙氨乙基

    正常PH范围：2～9.5

    小离子电量：0.88～1.08meg/dg（dg=dry gram，千克重）

    蛋白容积：700mg/dg（蛋白体积是指0.01M ph8.5磷酸缓冲液—牛血清白蛋白）

    蛋白容积/柱体积：140mg/ml

    每升所需的离子交换剂K柱床体积：0.24（离子交换剂重量的数字考虑到溶胀，容易去除及使用过程中离子离子交换剩余颗粒）

    填料密度：0.20dg/ml（填料密度的状态为0.05M PH7.5磷酸缓冲液）

    性状（以下信息仅供参考）：白色或微黄色颗粒状或纤维状。为中等碱度阴离子交换剂。对高相对分子质量聚合电解质有较好的解析。游离碱型。典型吸收值 （胰岛素相对分子质量12000）850mg/g、（牛血清蛋白）660mg/g。

    产品用途：本品仅供科研，不得用于其它用途。（以下用途仅供参考）用于柱色谱分析，用以分离提纯多糖、肽、核苷酸、酶、血清组分和病毒等，阴离子交换填料

    保存：RT

    DEAE纤维素DE-32,DEAE-cellulose DE-32 层析原理：

    凝胶过滤－－－－依赖于分子的大小和形状

    吸附层析－－－－依赖于被分离化合物与凝胶之间的氢键数量和质量

    分配层析－－－－依赖于被分离化合物在流动相（溶剂）和固定相（凝胶）之间的分配，这主要由样品的极性和溶剂的极性决定的。

    DEAE纤维素DE-32,DEAE-cellulose DE-32 特点：

    适合用有机溶剂分离嗜脂性分子，可以非常经济地大规模制备各种天然产物

    结合凝胶过滤、分配色谱及吸附性层析于一身，分离结构非常相近的分子

    载量可高达300mg样品/ml凝胶，极少需要再生，分离效果可保持十几年不变

    凝胶过滤填料—葡聚糖凝胶

    葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶，含有大量的羟基，很容易在水中和电解质溶液中溶胀。G型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度，因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。

    葡聚糖凝胶有不同的粒度。超细级的葡聚糖凝胶是用于需要极高分辨率的柱色谱和薄层色谱。粗级和中级的凝胶用于制备性色谱过程，可在较低的压力下获得较高的流速。另外，粗级也可用于批量工艺。

    葡聚糖凝胶不溶于一切溶剂（除非它被化学降解）。它在水、盐溶液、有机溶剂、碱和弱酸性溶液中都是稳定的，在强酸中凝胶骨架的糖苷键被水解。长期接触氧化剂将破坏凝胶，因而应避免使用。

    DEAE纤维素DE-32,DEAE-cellulose DE-32 订购说明：

    1.现货直销，当天下单，当天发货。

    2.产品优质，到货快，免费快递。

    3.售前、售中、售后服务好。

    DEAE纤维素DE-32,DEAE-cellulose DE-32 注意事项：

    一般都用药匙取用。药匙的两端为大小两个匙，分别取用大量固体和少量固体。

    试剂一旦取出，就不能再倒回瓶内，可将多余的试剂放入指定容器。

    称量的天平应保持清洁、干燥，避免潮湿及腐蚀性气体的侵蚀。在进行称量操作时，被称取的试剂应置于称量纸上或其它器皿内，不可在盘中直接称量。

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原创作者：上海生物科技有限公司

鸭病毒性肠炎病毒(DEV)ELISA试剂盒说明书

鸭病毒性肠炎病毒(DEV)elisa试剂盒

【产品名称】：鸭病毒性肠炎病毒(DEV)ELISA试剂盒
【供应商】：上海
【检测种属】：大鼠等动植物。
【产品用途】：被测样品定性或定量分析
【产品规格】：96T/48T(两种规格)
【检测方法】：酶免法/酶联免疫法(ELISA)
【保存条件】：2-8℃
【供 货 期】：1-3天(现货供应)
【产品性状】：液体盒装
【服务优势】：全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测
【样本储存】：收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。

 

鸭病毒性肠炎病毒(DEV)ELISA试剂盒说明书 特点：
1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应，而免疫酶技术以免疫反应为基础，所检测的对象是抗原（或抗体），使用的抗体除标记了酶以外，与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶，因此，借助于酶与底物的显色反应，显示抗原与抗体的结合，大大提高了检测的灵敏性，使检测水平接近放射免疫测定法。
3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定，因此有利于样品的保存。
4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察，又可用显微镜观察，也可以用分光光度计进行比色测定，还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变，从而引起被检测物的显示。
5.可以定量测定。溶液中的抗原物质，应用酶免吸附技术进行比色测定，依据光密度值的变化，可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。
6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测，免疫酶技术都能在较短时间内完成。
7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说，不需要荧光显微镜，也不需要测定放射性的特殊仪器，所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂，普通实验室及生产应用单位均易购置.

注意事项：
1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
2.试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
3.使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
5.洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
7.加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
9.底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，*终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

操作步骤：
（1）双抗体夹心法是检测抗原zui常用的方法。夹心法利用两种一抗对目标抗原进行捕获和固定，在确保灵敏度的同时大大提高了反应的特异性，该方法的检测灵敏度可提高到pg级的水平。将已知抗体包被到固相表面，加入待检标本，标本中若含有相应抗原即与固相表面的抗体结合，洗涤去除未结合成分，加入该抗原特异的酶标记抗体，洗去未结合的酶标记抗体，加底物后显色。若标本中无相应抗原，固相表面即无抗原结合，加入的酶标记抗体则不能结合于固相并被洗涤去除，当加入无色底物后，因无酶催化故不显色。双抗体夹心法适用于测定2价或2价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。
（2）间接法是检测抗体zui常用的方法，其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故称为间接法。先将待测的蛋白包被在孔板内，然后依次加入一抗、酶标记u akn 的二抗和底物显色，通过仪器（例如酶标仪）定量检测抗原。这种方法操作简单但由于高背景而特异性较差，目前已逐渐被夹心法取代。间接法的优点是只要变换包被抗原就可利用同一酶标二抗建立检测相应抗体的方法。间接法成功的关键在于抗原的纯度。间接法中另一种干扰因素为正常血清中所含的高浓度的非特异性抗体。
（3）竞争法可用于测定抗原，也可用于测定抗体。当抗原材料中的干扰物质不易除去，或不易得到足够的纯化抗原时，可用此法检测特异性抗体。其原理为标本中的抗体一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。标本中抗体量越多，结合在固相上的酶标抗体愈少，因此阳性反应呈色浅于阴性反应。如抗原为高纯度的，可直接包被于固相。如抗原中有干扰物质，直接包被不易成功，可采用捕获包被法，即先包被与固相抗原相应的抗体，然后加入抗原，形成固相抗原。洗涤除去抗原中的杂质，然后再加入标本和酶标抗体进行竞争结合反应。小分子抗原或半抗原因缺乏可用于夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗体夹心法进行测定，可以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的酶标抗原愈少，zui后的显色也愈浅。

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原创作者：上海生物科技有限公司

N-甲基荷叶碱,CAS:754919-24-9标准品

中文名称：N-甲基荷叶碱
中文别名：N-甲基荷叶碱;(R)-5,6,6a,7-四氢-1,2-二甲氧基-6,6-二甲基-4H-二苯并[de,g]喹啉f;(R)-5,6,6A,7-四氢-1,2-二甲氧基-6,6-二甲基-4H-二苯并[DE,G]喹啉;(R)-5,6,6A,7-四氢-1,2-二甲氧基-6,6-二甲基-4H-二苯并[DE,G]喹啉标准品对照品
英文名称：N-Methylnuciferine
英文别名：N-Methylnuciferine;[ “” ];(6Ar)-1,2-dimethoxy-6,6-dimethyl-5,6,6a,7-tetrahydro-4H-dibenzo[de,g]quinolin-6-ium;(R)-5,6,6a,7-Tetrahydro-1,2-dimethoxy-6,6-dimethyl-4H-dibenzo[de,g]quinolinium
CAS号：754919-24-9
分子式：C20H24NO2+
分子量：310.42
纯度：98%(HPLC)

本产品仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。
 
标准品使用与管理注意事项
 
（1） 新开瓶标准品药在瓶上注明开瓶日期，应根据瓶号依次来使用（整瓶使用或者送样情况除外），同一批号的标准品或工作对照品必须使用完一瓶后再开启另一瓶，标准品使用过程中，已取出的标准品严禁再放回原瓶中。
（2） 标准品使用从储藏室取出放入干燥器中平衡至室温，放置一定时间（视具体情况而定）后称量，是为了避免由于温度差导致的标准品吸潮，称量完成后立即用塑胶盖盖好后用封口膜封好，按瓶标签上的储存条件放置。
（3） 同一瓶工作标准品的开启使用次数视具体情况而定，使用次数很少或具有吸湿性的工作对照品分装时应考虑一次性使用分装量。
 
标准品的贮存
不同的标准品应根据其理化性质、贮存要求的不同选择适宜的贮存环境和条件，分别置于规定的位置。
 
常见的标准品保存方法
常温保存：通常用于化学性质比较稳定的标准品，建议保存于干燥阴凉的地方。
+4度冷藏：用于常温下不是很稳定的物质，保存于冰箱冷藏室。
-20度冷冻：用于化学性质不稳定，常温下容易分解的物质。
-80度冷冻：一些具有活性的物质，需要保存于特定的-80度的冰箱。

原创作者：上海生物科技有限公司

Demeditec

 德国Demeditec 公司成立于1987年，是一家老牌的体外诊断试剂专业供应商。产品包括各种RIA, ELISA, PCR检测试剂盒，可以检测血液，血清，血浆，尿液样本，2006年，Demeditec研发出了使用唾液样本即可成功检测游离激素的ELISA检测试剂盒。Demeditec产品涵盖了内分泌学，骨代谢，肾脏学，神经递质，肿瘤标记物，自身免疫，传染病等各个领域。Demeditec产品远销全球各大医院，大学，科研院所，并且深受广大用户的喜爱与好评。Demeditec产品质量过硬，于2003年通过EN ISO 9001 及EN ISO 13485认证，依照IVDD指令，均贴有CE标记。

-Demeditec产品涵盖了内分泌学，骨代谢，肾脏学，神经递质，肿瘤标记物，自身免疫，传染病等各个领域。
-Demeditec产品远销全球各大医院，大学，科研院所，并且深受广大用户的喜爱与好评。
-Demeditec产品质量过硬，于2003年通过EN ISO 9001 及EN ISO 13485认证，依照IVD指令，均贴有CE标记。

公司信息
品牌商名称：Demeditec
联系电话：+49 431 71922 0
公司官网：http://www.demeditec.com

代理商名称：上海生物有限公司
供货：4周左右

原创作者：上海生物科技有限公司

BL21(DE3)受体菌使用说明书

名称：BL21（DE3）受体菌

供应商：

产地：国产/进口

规格：1ml

分类：感受态制备

储存方式：—20℃，12个月

产品用途：基因克隆表达

注意事项：BL21（DE3）受体菌含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因，适合表达非毒性蛋白


BL21（DE3）受体菌使用说明书：

●购买后，请务必确认标签上的注意事项。

●做好预防颠倒，摔坏的措施和管理体制。

●在使用前再次确认标签上的注意事项。做好必要的安全对策。

●对没有标明其危险特性？有害特性的，也要慎重地进行操作。

●必须戴好防护用具，小心翼翼进行操作。

●请参照相关法规，文献，MSDS等信息，理解并掌握好试剂的特性。再进行安全操作。

●通常购买试剂时要想到一次性用完。若估算不足有剩余的话，要更加注意其保管和管理。

●万一试剂操作者并非专业技术人员。必须在专业人士的指导监督下进行操作。

●对于使用后的废弃物，不要或旧的试剂，应按照相关法律法规正当处理。


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免疫染色洗涤液100ml

免疫染色一抗稀释液100ml

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标准品Poliumoside,金石蚕苷,94079-81-9价格

中文名称：金石蚕苷

英文名称：Poliumoside

CAS号：94079-81-9

分子量：C35H46O19

分子量： 770.73

外观：淡黄色粉末

纯度：HPLC＞98%

储存方式： 2-8°C，避光保存。

注意事项： 本品应在低温下保存，长时间在暴露在空气中，含量会有所降低。

质量承诺： 非人为照成的产品质量问题，我司负责退货换货。

供应商：上海
适用范围：使用前仔细阅读本说明书，仅供科研使用，不得用于医学诊断。

包装：20mg/50mg/100mg/1g/10g可根据您的需求提供产品的规格及纯度，按要求包装。

标准品Poliumoside,金石蚕苷，94079-81-9

标准品Poliumoside,金石蚕苷，94079-81-9注意事项：

①试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

②实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

③使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

④加入试剂的顺序一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

⑤按说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

标准品Poliumoside,金石蚕苷，94079-81-9价格，订购说明：

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产地：国产/进口

规格：10×100ul

分类：感受态制备

储存方式：—20℃，12个月

产品用途：基因克隆表达

注意事项：BL21（DE3）受体菌含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因，适合表达非毒性蛋白


BL21（DE3）感受态细胞使用说明书：

●购买后，请务必确认标签上的注意事项。

●做好预防颠倒，摔坏的措施和管理体制。

●在使用前再次确认标签上的注意事项。做好必要的安全对策。

●对没有标明其危险特性？有害特性的，也要慎重地进行操作。

●必须戴好防护用具，小心翼翼进行操作。

●请参照相关法规，文献，MSDS等信息，理解并掌握好试剂的特性。再进行安全操作。

●通常购买试剂时要想到一次性用完。若估算不足有剩余的话，要更加注意其保管和管理。

●万一试剂操作者并非专业技术人员。必须在专业人士的指导监督下进行操作。

●对于使用后的废弃物，不要或旧的试剂，应按照相关法律法规正当处理。


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Worthington代理,L-15 Media Powder (L15NK),现货供应

中文名称

L-15 Media Powder (L15NK)

英文名字
L-15 Media Powder (L15NK)
供应商
Worthington
产品货号
WBC-LK003250
产品报价
￥询价/1ea
Worthington的所有产品都是从活细胞中提取的材料，因此无毒。Worthington在自然条件下持续生产酶和其它蛋白质的能力是其持续成功的关键。

酶是Worthington的主要产品线。从技术上讲，Worthington实际上并不制造酶，而是从各种动植物组织和各种微生物来源（如细菌、真菌和霉菌）中提取酶。根据该酶在材料中的普遍性选择特定酶的起始材料。例如，一种功能涉及使肌肉工作的酶将主要存在于肌肉组织中，因此起始材料可能是兔肌肉或猪心；参与发酵的酶最好在酵母中找到。 Worthington使用的一些动物组织包括牛胰腺、猪肾、牛眼、马肝、兔肌肉、牛肝、猪心、马血和小牛肠。各种蛋白质也从辣根、红薯、杏仁和美洲商陆中提取。一些产品是从大肠杆菌、几种梭状芽胞杆菌和各种其它细菌中分离出来的。还使用酵母、蘑菇、全脂牛奶和鸡蛋等。

常卖产品，现货供应，欢迎咨询18301939375
胶原蛋白酶Collagenase（Type 1-7） WBC-LS005337
弹性蛋白酶Elastase WBC-LS002292
木瓜蛋白酶papain WBC-LS003118
脱氧核糖核酸酶I WBC-LS002138
胰蛋白酶Trypsin WBC-LS003708

上海金畔生物科技有限公司是Worthington Biochemical品牌代理商 ，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

大肠杆菌化学感受态细胞表达分析,

大肠杆菌化学感受态细胞 表达分析 大肠杆菌OverExpress C43（DE3）菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率可达5×108 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。

OverExpress C43(DE3) Chemically Competent Cell

大肠杆菌化学感受态细胞

 

OverExpress C43(DE3)；C43(DE3) pLysS；BL21 (DE3)；OverExpress C41(DE3)；表达感受态细胞；毒性蛋白表达；pET表达载体；

货号 产品名称 规格  
MF2342-1000UL OverExpress C43(DE3) Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2342-5000UL OverExpress C43(DE3) Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 50×100μl

 

OverExpress C41(DE3)、C41(DE3) pLysS、C43(DE3)和C43(DE3) pLysS都是大肠杆菌（E. Coli）菌株，有效表达不同物种有机生物体包括细菌、酵母菌、植物、病毒和哺乳动物来源的毒性蛋白。

OverExpress C43(DE3)菌株来源于OverExpress C41(DE3)菌株，通过筛选OverExpress C41(DE3)对另一个不同毒性蛋白的抗性菌株而获得。OverExpress C41(DE3)来源于BL21(DE3)，此菌株含一个突变，能降低T7 RNA聚合酶（T7 RNAP）的水平，从而预防许多重组毒性蛋白过表达引起的细胞死亡。OverExpress C43(DE3)菌与OverExpress C41(DE3)相比，至少携带另一个不同突变，使其获得更广泛更高的毒性蛋白表达能力。

OverExpress C43(DE3)菌株含DE3区，表明该菌株染色体上整合λ噬菌体DE3溶原体（其上携带lacUV5启动子调控的T7 RNA聚合酶基因），适用于靶基因克隆进入T7启动子表达载体比如pET系列的蛋白生产。

OverExpress C43(DE3)菌株基因型：F– ompT hsdSB (rB– mB–) gal dcm (DE3)

产品描述

本品是大肠杆菌OverExpress C43(DE3)菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率可达5×108 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。

产品包装

组分编号 组分名

货号（规格）
MF2342-1000UL MF2342–5000UL
MF2342-A OverExpress C43(DE3) Competent Cell 10×100μl 50×100μl
MF2342-B Control Plasmid puC19, 10pg/μl 10μl 10μl

 注意事项

1） 感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存，不可反复冻融且放置时间过长，否则会减低感受态细胞的转化效率。

2） hao在冰上融化感受态细胞，不可在冰上放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。

3） 进行转化操作时，需在相应温度及无菌条件下进行。

4） 为防止转化实验不成功，可保留部分连接反应液以重新转化，将损失降到低。

5） 产品包装内含质粒pUC19 DNA(10pg/μl)，供对照实验用。

6） 转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。

7） 诱导时，IPTG浓度范围可选：0.1~2mM。

8） 为了得到足量的蛋白，需就加诱导时间、温度、IPTG浓度进行优化。

9） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】

1） 从-80℃冰箱取出取感受态细胞，迅速置于冰浴中，5min后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物），用手轻弹管底轻轻混匀（避免用枪吸打），冰浴静置25min。

2） 42℃水浴热激45s，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2min。此过程不要摇动离心管。

3） 向每个离心管中加700 μl无菌的2YT或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃ 摇床，200 rpm振荡培养60min，目的使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。

4） 低速离心收菌（比如5000rpm，1min），留取100μl左右上清，用枪轻轻吹打重悬菌块，之后加到筛选抗生素的2YT或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于室温（或37℃）直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养过夜。

【注意】：

a）涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可不用离心，直接取少量转化产物涂布平板；反之，若转化的DNA总量较少，则通过离心（5000 rpm，1min）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。

b）新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。

c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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MF2341-1000UL Rosetta-gami(DE3)pLysS Chemically Competent Cell大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2342-1000UL OverExpress C43(DE3) Chemically Competent Cell 大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2343-1000UL TB1 Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2344-1000UL Tuner(DE3) Chemically Competent Cell 大肠杆菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2339-1000UL Rosetta-gami 2(DE3) Chemically Competent Cell 大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2340-1000UL Rosetta-gami B(DE3) Chemically Competent Cell 大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2334-1000UL BL21 Star (DE3) Competent Cell 大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MF2335-1000UL BL21 Star (DE3) pLysS Competent Cell 大肠杆菌感受态细胞 10×100μl
MS0021-10G Chloramphenicol, USP Grade 氯霉素 10g
MS0018-10G Ampicillin, Sodium Salt 氨苄青霉素钠 10g
MS0017-5G Carbenicillin, Disodium Salt 羧苄青霉素二钠盐 5g
MS0019-10G Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素 10g
MS0014-1G Rifampicin, USP Grade 利福平 1g
MF2002-1G IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 1g

附录I 蛋白诱导步骤（仅作参考）

1）从新鲜涂布平板上挑取一单克隆，转移到含相应抗生素的5ml LB液体培养基内。

2）37℃摇菌培养过液。为了小化诱导前目的蛋白的小化表达，添加葡萄糖（终浓度为0.2% w/v）到生长培养基内。

3）将步骤2）中过夜培养的菌液吸取0.5ml接种到含相应抗生素的50ml LB液体培养基内。

4）37℃摇菌培养直至OD600达到0.6~0.8。

5）加入IPTG使其终浓度为1mM。目的蛋白的加诱导时间可能在2~16h，依蛋白而异。

6）37℃培养3~4h。为了确定目的蛋白的加诱导时间，建议作一个时间周期优化实验，范围从2~16h。

7）将培养物冰浴10min。4℃，5,000 x g离心10min收集菌株。

8）吸掉上清，将沉淀保存在-20℃（也能保存在更低的温度）。

IPTG母液（1M）配制

称量2.38g IPTG（Mw: 238.30）溶于适量去离子水，充分溶解后，调整终体积到10ml，并过滤除菌，即得到1M ITPG母液。

 

大肠杆菌化学感受态细胞 表达分析

大肠杆菌化学感受态细胞 表达分析