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Y187 Chemically Competent Cell,酵母菌化学感受态细胞

Y187 Chemically Competent Cell 酵母感受态细胞 克隆与表达分析：Y187是GAL4系统酵母单杂交/双杂交用实验菌株，MATα型，能直接转化质粒或与MATa型酵母菌株（如Y2HGold，AH109等）通过接合（mating）操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。

Y187 Chemically Competent Cell

酵母菌化学感受态细胞

Matchmarker GAL4双杂交系统；Y2HGold；pGBKT7；Y187；pGADT7；AUR1-C；Aureobasidin A （AbA）；金担子素；

产品名称 产品编号 规格
Y187 Chemically Competent Cell 

酵母菌化学感受态细胞

 MF2354-1000UL 10×100μl
MF2354-5000UL 50×100μl

产品包装

组分编号 组分名称 保存

货号（规格）
MF2354-1000UL MF2354-5000UL
MF2354-A Y187 Competent Cell -80℃ 10×100μl 50×100μl
MF2354-B pGADT7 Control Vector (10ng/μl) -80℃ 10μl   10μl  
MF2354-C Carrier DNA (5μg/μl) -20℃ 100μl  500μl 
MF2354-D PEG/LiAC Solution +4℃ 5ml 25ml

产品描述

Y187是GAL4系统酵母单杂交/双杂交用实验菌株，MATα型，能直接转化质粒或与MATa型酵母菌株（如Y2HGold，AH109等）通过接合（mating）操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。Y187-GAL4酵母双杂交系统需要两种质粒配套使用，分别为pGBKT7和pGADT7。前者筛选标志为Trp1，用于表达DNA-BD与诱饵蛋白（bait）的融合蛋白；后者筛选标志为Leu，用于表达AD与诱捕蛋白（prey）的融合蛋白。Y187有两个报告基因：lacZ，MEL1，分别由两种完全异源的Gal4反应启动元件-G1，M1操控，这两种启动子只有GAL4识别的17bp核心区相同，其余部分都不同，因此大大降低了酵母双杂交假阳性发生的概率。

本品为经特殊工艺制备的Y187酵母菌化学感受态细胞，用pGADT7质粒检测转化效率＞104cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存三个月。

基因型

MATα, ura3-52, his3-200, ade 2-101, trp 1-901, leu 2-3, 112, gal4Δ, met-, gal80Δ, URA3:: GAL1UAS–Gal1TATA–– lacZ, MEL1

注意事项

1.在冰上融化感受态细胞。

2.转化高浓度质粒可相应减少用于涂板的菌量。同时转化2-3种质粒可适当增加质粒的用量。

3.Y187对高温敏感，zui适生长温度为27-30℃，一旦高于31℃，生长速度和转化率都呈指数下降。

4.菌落变粉红色并不是污染，而是酵母细胞生长中的一种常见现象。当酵母细胞在平板上培养几天，将平板内的腺嘌呤消耗殆尽，那时酵母试图通过自身代谢途径合成腺嘌呤以供利用。然而，某些菌株ADE2基因被破坏，腺嘌呤合成受阻。且ADE4，5，6，7基因均正常。由此，造成中间产物P-ribosylamino imidazole（AIR）在细胞的积累使得菌落变为粉红色。

5.酵母菌在缺陷培养基上生长速度比YPDA培养基慢，营养缺陷成分越多，生长越慢，以转化涂板为例：涂YPDA平板于29℃，48h培养可见直径1mm克隆；涂SD单缺平板于29℃，48-60h培养可见直径1mm克隆；涂SD双缺平板于29℃，60-80h培养可见直径1mm克隆；涂SD三缺或四缺平板于29℃，80-90h培养可见直径1mm克隆；

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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货号

名称

规格
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MF2352-1000UL Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
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MF2354-1000UL Y187 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2355-300UL AH109 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 300μl
MF2356-1000UL AH109 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2501-200T Yeast Transformation Kit 酵母转化试剂盒 200T
MS6303-350G YPDA Agar Medium YPDA琼脂培养基 350g
MS6304-250G YPDA Medium YPDA液体培养基 250g

Y187 Chemically Competent Cell 酵母感受态细胞 克隆与表达分析

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EHA105 Competent Cell 化学感受态细胞

EHA105 Competent Cell 化学感受态细胞：生物提供的EHA105化学转化感受态细胞经特殊工艺制作，基因型为C58 （rifR） Ti pEHA105 （pTiBo542DT- DNA） Succinamopine，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率>104 cfu/μg DNA。
EHA105 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞

EHA101菌株；农杆菌感受态细胞；Rifampicin（Rif） 利福平；Kanamycin（kan）卡那霉素； EHA105；LBA4404；GV3101；AGL1；植物转基因研究；

货号 产品名称 规格
MF2302-1000UL EHA105 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 10×100μl

MF2302-2000UL EHA105 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞 20×100μl
MF2302-5000UL

EHA105 Chemically Competent Cell 农杆菌化学感受态细胞

 50×100μl

EHA105菌株由EHA101菌株改造而来，染色体背景为C58，核基因含利福平抗性基因rif，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒pEHA105（pTiBo542DT-DNA），此质粒含有vir基因（vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件，pEHA105（pTiBo542DT-DNA）质粒自身的T-DNA转移功能虽被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移）。EHA105菌株适用于水稻、烟草等植物的转基因操作。
我司提供的EHA105化学转化感受态细胞经特殊工艺制作，基因型为C58 (rifR) Ti pEHA105 (pTiBo542DT- DNA) Succinamopine，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率>104 cfu/μg DNA。

根癌农杆菌介导的转化原理：

根癌农杆菌能在自然条件下趋化性的感染大多数双子叶植物或裸子植物的受伤部位，诱导产生冠瘿瘤。诱发冠瘿瘤的原因在于根癌农杆菌Ti质粒上的T-DNA含8个左右的基因能在植物细胞内表达，指导合成一种非常特殊的化合物冠瘿碱，进而引发转化细胞癌变；根癌农杆菌Ti质粒（150～200kb）上的一段T-DNA，随着农杆菌侵染植物伤口进入细胞后，T-DNA脱离质粒并整合到植物基因组。因此，将外源基因插入到改造的T-DNA中，借助农杆菌的感染作用，从而达到将外源基因转化并整合进入受体植物的目的。

产品组分：

组分编号 组分名称

货号（规格）

1000UL

2000UL

5000UL
MF2302-A EHA105 Chemically Competent Cell

10×100μl

20×100μl

50×100μl
MF2302-B pCAMBIA2301 Control Vector (10ng/μl)

10μl

10μl

10μl

注意事项

1）   培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌；根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止Ti质粒丢失，但链霉素不利于农杆菌的转基因操作，一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素，因Ti质粒丢失的概率极低（基本可以忽略）。

2）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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MF2306-1000UL EHA101电转感受态细胞 10×100μl 根癌农杆菌
MF2306-5000UL EHA101电转感受态细胞 50×100μl 根癌农杆菌
MF2307-1000UL EHA105电转感受态细胞 10×100μl 根癌农杆菌
MF2307-5000UL EHA105电转感受态细胞 50×100μl 根癌农杆菌
MF2308-1000UL LBA4404电转感受态细胞 10×100μl 根癌农杆菌
MF2308-5000UL LBA4404电转感受态细胞 50×100μl 根癌农杆菌
MF2309-1000UL GV3101电转感受态细胞 10×100μl 根癌农杆菌
MF2309-5000UL GV3101电转感受态细胞 50×100μl 根癌农杆菌
MF2310-1000UL AGL1电转感受态细胞 10×100μl 根癌农杆菌
MF2310-5000UL AGL1电转感受态细胞 50×100μl 根癌农杆菌

附表3常见农杆菌对抗生素敏感性总表

农杆菌菌株

羧苄（carb）

链霉素（strep）

利福平（rif）

庆大霉素（gent）

卡那霉素（kan）

EHA101

S

S

R

S

R

EHA105

S

S

R

S

S

LBA4404

S

R

R

S

S

GV3101

S

S

R

R

S

AGL1

R

S

R

S

S

备注：S代表敏感，R代表抗性。

 EHA105 Competent Cell 化学感受态细胞 EHA105 Competent Cell 化学感受态细胞