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CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit

细胞增殖与示踪检测试剂盒

产品关键词：

CFDA, SE；Calcein AM钙黄绿素；Cell Division细胞分化（分裂）；Fluorescein diacetate (FDA)；PKH26；CAS NO：150347-59-4；

产品信息

产品描述

CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒（CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit）是一款基于荧光探针CFDA, SE，用于细胞增殖检测和细胞荧光示踪的检测试剂盒。此方法目前广泛替代MTT法或者³H-胸腺嘧啶核苷掺入法（³H-thymidine incorporation）等细胞增殖检测方法。本试剂盒包含粉末形式的CFDA, SE探针，细胞培养级的溶剂，以及细胞标记液，使用方便，操作简单。按照每个样本的标记体积为1ml来算，我司（生物）提供两种规格的试剂盒，分别可检测500个和1000个样品。

CFDA, SE，英文全名5(6)-Carboxyfluorescein diacetate N-succinimidyl ester，CAS NO. 150347-59-4，是一种稳定的、细胞膜渗透性的非荧光染料，由两个醋酸基团和一个琥珀酰亚胺酯（SE）官能团组成的一个荧光分子。一旦主动扩散进入细胞，其醋酸基团被胞内酯酶切割，生成荧光素酯CFSE。CFSE具有高度荧光，且能通过其琥珀酰亚胺酯基团共价结合到细胞内的蛋白氨基基团。正是这个共价偶联反应，CFSE能够极其长期的保留在细胞内，长达数个月。另外，归因于这一稳定连接，一旦染料进入细胞，不会转移到邻近细胞。无活力细胞仍然是非荧光。而活细胞一旦分化，CFSE能够很均匀的分散到子细胞中，每分裂一次子代细胞约能得到亲本细胞1/2的荧光强度，因此，通过流式细胞仪对荧光强度的检测，能够依次分选出未分裂细胞，分裂一次的细胞（1/2荧光强度），分裂两次的细胞（1/4荧光强度），分裂三次的细胞（1/8荧光强度），以及以此类推其他分裂次数的细胞。CFSE可以检测分裂多达8次或更多次数的细胞增殖。

CFSE广泛用于细胞增殖和体内细胞示踪研究。CFSE的zui大激发和发射波长分别为492nm和517nm，标记细胞后呈绿色荧光。使用流式细胞仪检测可用FL1检测通道。也能用荧光显微镜观察，使用FITC滤片。

产品包装

注意事项

1）   CFDA SE溶剂在低温（如4℃，冰浴）等条件下会凝固而粘在离心管底、管壁或盖子上，可将其置于25℃温育片刻直至全部融解后使用。

2）   CFDA SE粉末经溶剂溶剂配制成储存液后一个月内用完，zui多不超过三个月。因CFDA SE容易被水解，并在水溶液中变质。使用过程中尽量避免接触水。而在标记过程中接触到水是在允许范围内。

3）   荧光染料均存在淬灭问题，操作和储存过程中需注意避光，以减缓荧光淬灭。

4）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法内容maokangbio

1.       CFDA SE储存液（1000X）制备

2.       CFDA SE标记液（1X）制备

3.       染色步骤

常见应用和数据示例：

根据荧光信号的稀释来检测细胞增殖和分化（示踪）（Cell proliferation and cell division by Dye Dilution Method），此方法主要用来体内外检测淋巴细胞（T细胞和B细胞）的增殖，也能用来检测NK细胞，成纤维细胞甚至细菌。也有用来研究可移植造血干细胞的增殖。

示例1（体外）.

Fig 1. Murine CD₄⁺ lymphocytes, labelled with CDFA-SE were cultured with antigen-presenting cells with different peptides to stimulate either the memory or the memory and naïve cells. Up to five cell divisions can be observed.

示例2（体内）.

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