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小鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA试剂盒

小鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)elisa试剂盒

名称：小鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)elisa试剂盒
供应商：生物
产品规格：48T/96T
试剂盒成分：酶标板，试剂，标准品等。
性状：液体
经营种类：国产/进口原装/进口分装。
产品用途：科研实验，不能用于临床应用
试剂盒保存：2-8℃（长期不使用时，部分试剂应放在-20℃条件下）
保质期：6个月，所有试剂盒均提供*新批次。
预期应用：ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。
注意要点：请仔细阅读产品的详细使用说明,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果。
服务承诺：工作时间内免费代测，免费技术咨询和指导。我们的销售工程师经过专业培训的，将为您提供满意的产品和真诚的服务。

 

 

小鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA试剂盒  操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，*终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

操作洗板方法：
1.手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内，浸泡1-2分钟，根据需要，重复此过程数次。
2.自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
说明
1.在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染，试剂避免受到微生物的污染，因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
2.浓洗涤液会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3.刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
4.所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。
5.有效期：6个月。
6.本操作说明适用于48T试剂盒，但48T试剂盒所有试剂减半。
7.电子版说明书仅供参考，实际操作请按照随产品发送的印刷版说明书；中英文说明书可能会有不一致的地方，以英文说明书为准。

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产品特色优势：
1. 国内对照品行业领导者，长达14年对照品的专业研发及标准制定
2. 高效稳定的纯化技术-高速逆流色谱技术的运用
3. 特有的高速逆流色谱对照品研发中心及生产中心，保证对照品的质量可控性及批量生产的稳定性
4. 严格的质量控制，通过全面的检测（1HNMR 13CNMR MS HPLC）
5. 部分对照品已获得国家质量监督检验检疫总局颁发的标准物质证书
6. 完善的库存及供应体系，所有产品均能现货供应
7. 高效的销售团队，99%的咨询可即时回复

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原创作者：上海生物科技有限公司

鸡巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA检测试剂盒

鸡巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA检测试剂盒

产品名称：鸡巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA检测试剂盒
供应商：上海
产品规格：96T/48T
运输条件：2-8℃低温运输，用干冰或者冰袋低温运输
产品用途：用于测定人血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性。
检测种属：大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭elisa试剂盒等种属。

 

鸡巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA检测试剂盒 特点：
1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应，而免疫酶技术以免疫反应为基础，所检测的对象是抗原（或抗体），使用的抗体除标记了酶以外，与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶，因此，借助于酶与底物的显色反应，显示抗原与抗体的结合，大大提高了检测的灵敏性，使检测水平接近放射免疫测定法。
3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定，因此有利于样品的保存。
4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察，又可用显微镜观察，也可以用分光光度计进行比色测定，还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变，从而引起被检测物的显示。
5.可以定量测定。溶液中的抗原物质，应用酶免吸附技术进行比色测定，依据光密度值的变化，可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。
6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测，免疫酶技术都能在较短时间内完成。
7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说，不需要荧光显微镜，也不需要测定放射性的特殊仪器，所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂，普通实验室及生产应用单位均易购置.

样本处理及要求：
1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

注意事项：
1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
2.试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
3.使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
5.洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
7.加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
9.底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

操作步骤：
1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50?l。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40?l，然后再加待测样品 10?l。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50?l，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50?l，再加入显色剂 B50?l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15 分钟.
10.终止：每孔加终止液 50?l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。

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