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T4 DNA连接酶,9015-85-4价格

    T4 DNA连接酶，9015-85-4价格由上海供应，上海生物专业经营进口分装和原装标准品|对照品、国产/进口elisa试剂盒，国产/进口血清，生化试剂，培养基等科研生化试剂等。免费提供产品*新报价、实验原理、产品用途以及中英文说明书。我司多年为各大院校，各类医院，生物工程医药实验室以及其他行业科研消费者提供*全面、*周到的采购，上海欢迎您的来电订购！

    中文名称：T4 DNA连接酶

    英文名称：T4 DNA LIGASE

    供应商：上海

    CAS号：9015-85-4

    储存条件： -20°C

    产品规格：BR，5u/ul，99%

    产品包装：200u/500u/1000u

    形态：buffered aqueous glycerol solution

    供货期：*新批次现货供应，周期短，检验结果准确。

    适用范围：使用前仔细阅读本说明书，仅供科研使用，不得用于医学诊断。

    包装：20mg/50mg/100mg/1g/10g可根据您的需求提供产品的规格及纯度，按要求包装。

    储存方式：该产品纯度高，检测/鉴别精确，稳定性强，为了防止产品含量降低，不宜暴露在空气中，应防潮、避光和抗氧化包装，保存应以提高物质稳定性为原则，尽可能在干燥、低温条件下储藏（液体或易潮解物质分装在熔封的玻璃安瓶内）。

    特点：

    1.安全性高：非生物源性，无过敏危险。组织相容性极好，使用后完美自然。

    2.自身物质参加酶化作用，确保无排异。

    3.网状纤维结构纯物理作用，不会随剧烈的活动流失移位。

    4.方便简洁：无须手术，避免“切肤之痛”，轻轻一针即可正常活动。

    5.长效除皱全面美容，针对面部所有皱纹同时改善。

    6.独有提升效果，产品独特的螺旋结构对下垂的肌肤进行拉伸提升。

    7.一流的制备工艺分保障您的使用安全。

    T4 DNA连接酶，9015-85-4价格，管理窍门：

    一般按用途可以分为通用试剂、高纯试剂、分析试剂、仪器分析试剂、临床诊断试剂、生化试剂、无机离子显色剂试剂等。有四种常用规格：

    1.优级纯或一级品（GR 精密分析和科学研究工作）；

    2.分析纯或二级品（AR 重要分析和一般研究工作）；

    3.化学纯或三级品（CP 工矿及学校一般化学实验）；

    4.实验试剂（L.P.）

    大多数的试剂具有一定的毒性及危险性。对科研试剂的加强管理，不仅是保证分析结果质量的需要，也是确保人民生命财产安全的需要。试剂应根据毒性、易燃性、腐蚀性和潮解性等不同的特点，以不同的方式妥善管理。

    T4 DNA连接酶，9015-85-4价格，。

    T4 DNA连接酶，9015-85-4价格，订购说明：

    1、绝大部分产品备有现货，一般情况下都能订货当日发货。

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    3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化，若有变动以订货当日价格为准。

    4、每日订单截止时间为16点整，部分城市可到17点整，因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。

    5、请办理完货款后，将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、电话等以传真、EMail、电话等形式通知我们。

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原创作者：上海生物科技有限公司

NEB代理,RNA 试剂,RNA 连接酶和修饰酶,5´ DNA 腺苷化试剂盒,#E2610L

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

5´ DNA 腺苷化试剂盒

#E2610L 50 次反应

#E2610S 10 次反应

特性

 酶法对 ssDNA 接头进行 5´ 腺苷化，用于二代测序
 单步反应即可完成定量腺苷化
 比目前其它化学和酶学方法更简便
 产物无需纯化

概述

 5´ DNA 腺苷化试剂盒能将 DNA 寡核苷酸 5´端腺苷化，试剂盒操作简便高效，反应需要 Mth RNA 连接酶、 ATP 和 5´ -磷酸化的单链 DNA。试剂盒经过优化，无论序列有无 3´ 端终止子，都能够生成腺苷化的 DNA。通常该试剂盒能将 95% 的 pDNA转化成 AppDNA。高效的转化，使得反应无需进行胶回收提纯步骤，因此可增加总产量。

5′ DNA 腺苷化试剂盒组份

– Mth RNA 连接酶（重组酶）
– 5´ DNA 腺苷化缓冲液（10X）
– 1 mM ATP 

质保声明

无核酸内切酶、核酸外切酶污染。

注意事项

该酶转化率低，需要约等量摩尔浓度的酶和底物 DNA 相互作用。在二代测序 cDNA文库构建实验中，预腺苷化 DNA 的连接头可用于 RNA 3´ 末端的连接。

上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375

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NEB代理,RNA 试剂,RNA 连接酶和修饰酶,T4 多聚核苷酸激酶T4 PNK,#M0201L

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK）

#M0201L 2,500 units

#M0201S 500 units

#M0201V 250 units

相关产品

T4 多聚核苷酸激酶（3´ 磷酸酶活性缺失）

特性

 DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化，以便进行连接反应
 DNA 或 RNA 的末端标记，用作探针和进行 DNA 测序
 用 T4 多聚核苷酸激酶（NEB #M0201）除去 3´ 磷酸基团
 T4 多聚核苷酸激酶（3´ 磷酸酶活性缺失）（NEB #M0236）将 3´ 端已经磷酸化的单核苷酸 5´磷酸化，制备pNp  底物，用于添加到 DNA 或RNA的 3´ 端
 用 T4 多聚核苷酸激酶（3´ 磷酸酶活性缺失）（NEB #M0236）对 3´ 端有磷酸基团的寡核苷酸的 5´ 端   进行标记

概述

T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链（双链或单链 DNA 或 RNA）的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶（NEB #M0201）还具有 3´ 磷酸酶活性，将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶（NEB #M0236）具有所有激酶的活性，但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。 

来源

重组 E. coli 菌株，克隆有 T4 多聚核苷酸激酶基因。 

反应条件

1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液
[70 mM Tris-HCl（pH 7.6 @ 25℃），10 mM MgCl2，5 mM DTT]，37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

注意事项

达到最佳酶活力，需要新鲜缓冲液（在旧缓冲液中，由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力）。 

放射性标记反应：50 μl 反应体系中，用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。

CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。

DNA 或 RNA 磷酸化反应（放射性和非放射性）操作流程请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率，可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前，先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟，然后冰上冷却，并加入 5%（w/v）的 PEG-8,000。

T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性，但是为了适用于高活力的放射性标记反应，在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。

一般来说，进行激酶反应之后是连接反应。在这种情况下，T4 多聚核苷酸激酶反应在连接酶反应缓冲液中 37℃ 温育 30 分钟即可。反应后的产物可直接进行连接，无需改变缓冲液和进行热失活。如果连接时需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化状态，则需要在连接反应前热失活 T4 多聚核苷酸激酶。

质保声明

T4 多聚核苷酸激酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

单位定义

1 单位即 1 个 Richardson 单位，指 37℃条件下，30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量（1）。

浓度

10,000 units/ml。 

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关于该酶性质和产品应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。 

T4 多聚核苷酸激酶反应


NEB代理 , RNA 试剂 , RNA 连接酶和修饰酶
在 50 μl T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液体系中，37℃温育 30 分钟，γ-磷酸基团从 ATP 转移至 d(T)8 的 5´ 羟基末端 [ATP 与 d(T)8 比例是 1:1，量为 50 pmol]，结果显示 20 单位酶量可使超过 90% 的磷酸基团转移。

NEB代理,RNA 试剂,RNA 连接酶和修饰酶,#M0204L T4 RNA 连接酶1,ssRNA 连接酶

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶）

#M0204L 5,000 units

#M0204S 1,000 units

相关产品

5´ -三磷酸腺苷（ATP）
通用 miRNA 克隆接头

特性

 连接单链 RNA 和 DNA
 用 5´ -[32P] pCp 进行 RNA 3´ 末端标记
 RNA 和 DNA 分子内及分子间的连接
 合成单链寡脱氧核苷酸
 蛋白质中掺入非天然氨基酸 

概述

催化 3´ →5´ 磷酸二酯键的形成，使核苷酸的 5´ -磷酸末端和 3´ -羟基末端连接，伴随着 ATP 水解为 AMP 和 PPi。作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸。 

来源

携带 T4 RNA 连接酶 1 基因的 E. coli 菌株。 

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，加入 1 mM ATP，37℃ 温育。热失活：65℃ 15 分钟或煮沸 2 分钟。 

使用注意事项

pCp 的连接需要加入终浓度为10%（v/v）的 DMSO。 

随酶提供试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
10 mM ATP（NEB #M0204中包含）或 100 mM
 ATP（NEB #M0437中包含）
 50% PEG 8000 

质保声明

无单链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 和磷酸酶污染。 

单位定义

1 单位指 37℃ 条件下，30 分钟内将 1 nmol 的 5´ -[32P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。

浓度

10,000 或 30,000 units/ml。 

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#M0239L NEB代理,RNA 试剂,RNA 连接酶和修饰酶,T4 RNA 连接酶2,dsRNA 连接酶,

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

T4 RNA 连接酶 2（dsRNA 连接酶）

#M0239L 750 units

#M0239S 150 units

特性

 连接粘性末端接头
 连接双链 RNA 中切刻的最佳选择
 可用于 DNA/RNA 杂交链中，RNA 3´ 羟基与 DNA 5´ 磷酸基的连接 

概述

T4 RNA连接酶 2，也被称为 T4 Rnl2（gp24.1），同时具有 RNA 链分子间和分子内连接活性。与 T4 RNA 连接酶 1（NEB #M0204）不同的是， T4 RNA 连接酶 2 对双链 RNA 切刻的连接活性要明显高于对单链 RNA 的末端连接。该酶也可用于连接双链结构中 RNA 3´ 羟基和 DNA 5´ 磷酸基的切刻。

来源

纯化自携带 T4 RNA 连接酶 2 基因的重组 E. coli 菌株。 

反应条件

1X T4 RNA 连接酶 2 反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，2mM MgCl2，1 mM DTT，400 μM ATP]，37℃ 温育。 

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶污染

单位定义

1 单位指 20 μl 反应体系中， 37℃ 条件下， 30 分钟完全连接 0.4 μg 的 23-mer 和 17-mer RNA等摩尔混合物所需的酶量。

浓度

10,000 units/ml。 

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NEB代理,RNA 试剂,RNA 连接酶和修饰酶,T4 RNA 连接酶2截短型,#M0242L

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

T4 RNA 连接酶 2，截短型

#M0242L 10,000 units

#M0242S 2,000 units

相关产品

通用 miRNA 克隆接头

特性

 将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端
 将单链腺苷化引物连接至小 RNA 上，用于 cDNA 文库构建
 将单链腺苷化引物连接至 RNA 上，用于链特异 cDNA 文库构建 

概述

T4 RNA 连接酶 2，截短型（T4 Rnl2 截短型）可特异性地将 5´ 端预腺苷化的 DNA 或 RNA连接到 RNA 3´ 末端。该酶连接时不需要 ATP，但需要预腺苷化底物。 T4 Rnl2 截短型的表达来自E. coli 质粒，该质粒编码 T4 RNA 连接酶 2 基因的前 249 个氨基酸。与全长的 T4 RNA 连接酶 2 不同， T4 Rnl2 截短型不能将底物的 5´ 末端腺苷化，因此无法将 RNA 或 DNA 的 5´ 磷酸末端连接到 RNA的 3´ 端。该酶即 Rnl2（1-249），可用于 microRNA 克隆中接头连接的优化，因为此酶只能利用腺苷化的引物，因此可以降低连接背景。

来源

携带 T4 RNA 连接酶 2， 截短型基因的重组 E. coli 菌株。 

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，25℃ 温育。热失活：65℃ 20 分钟。 

随酶提供的试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000 

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶的污染。

单位定义

200 单位指 20 μl 反应体系中， 25℃ 条件下， 1 小时将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端[miRNA 通用性克隆接头（NEB#S1315） ]末端所需的酶量。

浓度

200,000 units/ml。 

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NEB代理 , RNA 试剂 , RNA 连接酶和修饰酶,RNase If

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

RNase If

#M0243L25,000 units

#M0243S5,000 units

特性

 重组酶
 去除 DNA 和蛋白质制备过程中的 RNA
 降解单链 RNA 生成单、二或三核苷酸
 用于核糖核酸酶保护试验 

概述

核糖核酸酶  If（RNase If）是一种 RNA 核酸内切酶，能够切割所有 RNA 二核苷酸键，产生 5´ 羟基和 2´ , 3´ 环状单核苷酸。该酶对单链 RNA 的活性比双链 RNA 高。重组 RNase If 是 RNase I（来源于E. coli）与麦芽糖结合蛋白的融合蛋白，与野生型RNase I 具有相同活性。
 

来源

重组 E. coli 菌株，携带来自 E. coli 的 RNase I 基因（rna）及编码麦芽糖结合蛋白（MBP）的基因。 

反应条件

1X NEBuffer 3
[100 mM NaCl，50 mM Tris-HCl，10 mM MgCl2，1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ]，37℃ 温育。
热失活：70℃ 20 分钟。 

使用注意事项

RNase If 不能降解 DNA。降解单链 RNA 的能力比降解双链 RNA 的能力强。 

质保声明

无核酸内切酶、核酸外切酶污染

单位定义

1 单位指 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，15 分钟完全降解 1 pmol 合成的 33-mer ssRNA 所需的酶量。反应在 1X NEBuffer 3 中进行，20% 丙烯酰胺凝胶电泳（40:1 Bis），SYBR® Gold 染色后观察结果。

浓度

50,000 units/ml。 

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NEB代理 , RNA 试剂 , RNA 连接酶和修饰酶,ShortCut® RNase III,#M0245L

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

ShortCut® RNase III

#M0245L 1,000 units

#M0245S 200 units

特性

 为 RNA 干扰研究提供 siRNA
 基因沉默
 靶标确认
 去除 dsRNAs

概述

ShortCut RNase III 能将较长双链 RNA 切割成一组大小不同的由 18-25 bp 组成的小片段干扰RNA（siRNA），更适合用于哺乳动物细胞的 RNA干扰实验。用 1.5 个单位（1 μl）的 ShortCut RNase III 能够将 1 μg 的 dsRNA 完全切割成 siRNA。

来源

重组 E. coli 菌株，克隆表达融合有麦芽糖结合蛋白（MBP）的 E. coli RNase III 基因（rnc）。 

反应条件

1X ShortCut RNase III 反应缓冲液 [50 mM Tris-HCl， 50 mM NaCl， 1 mM DTT（pH 7.5 @ 25℃）]。补加 20 mM MnCl2（随产品提供），37℃ 温育。 

质保声明

无核酸内切酶和核酸外切酶污染。 

单位定义

1 单位指 50 μl 的反应体系中，37℃ 条件下，20 分钟将 1 μg dsRNA 切割成 siRNA 所需要的酶量。

浓度

2,000 units/ml。 

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ShortCut RNase III 的优势

 制备适合任何基因靶点的有效 siRNA
 异源 siRNA 可以确保沉默靶基因
 从 DNA 模板到转染只需要一天
 避免了使用合成 siRNA 需反复摸索实验条件的问题

NEB代理 , RNA 试剂 , RNA 连接酶和修饰酶


图：使用 ShortCut RNase III 制备的 siRNA：A) 不同单位数量的 ShortCut RNase III 与 2 μg 500 bp 的 dsRNA 孵育 20 分钟。B) 用 ShortCut RNase III 消化 dsRNA 片段（1 kb 和 175 bp）。消化产物通过 20% TBE 聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分析。

NEB代理,RNA 试剂,RNA 连接酶和修饰酶,#M0265L,核酸外切酶 T

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

核酸外切酶 T

#M0265L 1,250 units

#M0265S 250 units

特性

 去除 DNA 或 RNA 3´ 突出末端生成平末端 

概述

核酸外切酶 T（Exo T），又称为 RNase T，是一种单链 RNA 或 DNA 特异性核酸酶，该酶需要游离的 3´ 末端，以 3´ →5´ 方向去除核苷酸。核酸外切酶 T 对于 DNA 的活性比 RNA 高十倍。核酸外切酶 T 可用于含有 3´ 突出末端的 RNA 或 DNA 的末端平滑化。

来源

核酸外切酶 T 与麦芽糖结合蛋白（MBP）进行 C-端融合后，过表达并纯化。随后用 Factor Xa 蛋白酶从核酸外切酶 T 上切除 MBP，最后纯化去除 Xa 因子 和 MBP。从 MBP 上切割的核酸外切酶 T 在 N 端多出一个氨基酸，且 Phe 替换了 Met（即 Glu-Phe-Exo T 而非 Met- Exo T）。 

反应条件

1X NEBuffer 4
[50 mM KAc，20 mM Tris-Ac，10 mM Mg (Ac)2，1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ]，25℃ 温育。
热失活：65℃ 20 分钟。 

质保声明

无核酸内切酶和外切酶污染。 

单位定义

1 单位指 100 μl 反应体系中，25℃ 条件下，30 分钟从 1 nmol [3H]-标记的多聚胸腺嘧啶生成 0.1 nmol TCA 可溶性核苷酸所需要的酶量。 

浓度

5,000 units/ml。 

使用注意事项

Exo T 对 DNA 和 RNA 的反应效率不同，DNA 是 RNA 的 100 倍。对于 RNA，在标准反应条件下，完全消化 1.0 pmol rA20 需要 1 单位 Exo T，反应结果通过凝胶电泳检测。 

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NEB代理 , RNA 试剂 , RNA 连接酶和修饰酶

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

RNase HII

#M0288L 1,250 units

#M0288S 250 units

特性

 对掺入有 rNTP 的聚合酶产物进行切刻
 与 T7 核酸内切酶 I 联合使用时，在掺入有 rNTP 的区域位点处产生双链断裂
 降解冈崎片段或其它 RNA-DNA 杂交链中的 RNA 部分

概述

核糖核酸酶 HII（RNase HII）为核糖核酸内切酶，适用于在双链 DNA 内部切刻核糖核酸的 5´ 末端，产生 5´ 磷酸和 3´ 羟基末端。RNase HII 还可以在冈崎片段的 RNA 部分进行多处切刻切割。 

来源

重组 E. coli 菌株，该菌株携带来自 E. coli 用 Factor Xa 蛋白酶将 RNase HII 从融合蛋白中切割分离，然后再进行纯化去除 MBP 和 Factor Xa 蛋白酶。从 MBP 中切割下来的 RNase HII 在其 N 端多出四个氨基酸（Ile-Ser-Glu-Phe）。

反应条件

1X ThermoPol 反应缓冲液[10 mM KCl，20 mM Tris-HCl，10 mM (NH4)2SO4，2 mM MgSO4，0.1% Triton X-100 (pH 8.8 @ 25℃) ]，37℃ 温育。 

质保声明

无核酸内切酶、核酸外切酶和 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指 1X ThermoPol 反应体系中，37℃ 条件下，30 分钟产生与切刻切割 100 pmol 合成的双链 RNA 底物产生相同的荧光信号所需的酶量。该合成的双链底物在荧光/淬火基团对的淬火基团附近含有单个核糖核苷。

浓度

5,000 units/ml。 

注意事项

与 0.1% SDS 一起温育足以失活 RNase HII。 

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NEB代理,RNA 试剂,RNA 连接酶和修饰酶,小牛肠碱性磷酸酶CIP,#M0290L

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

小牛肠碱性磷酸酶（CIP）(停产有替代)

#M0290L 5,000 units

#M0290S 1,000 units

停产通知

 请注意：该产品已停产，库存售完为止，替代产品为M0525

特性

 DNA 和 RNA 的去磷酸化

 克隆载体去磷酸化，防止载体自连
 测序或 SNP 分析前除去 PCR 反应中dNTP 和焦磷酸盐
 T4 PNK 标记 5´ DNA 末端前的去磷酸化

概述

小牛肠碱性磷酸酶（CIP）催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外，CIP 水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸（NTP 和 dNTP）。CIP 在分子生物学研究中应用广泛，如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团，用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中，对线性载体去磷酸化，防止自连。该酶可以作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端。CIP 也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP，用于制备测序模板和 SNP 分析。 

来源

 小牛肠粘膜。

反应条件

1X 反应缓冲液
[50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)2, 100 μg/ml BSA (pH 7.9 @ 25℃)]，37℃ 温育。 

质保声明

小牛肠碱性磷酸酶（CIP）经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指在 1 ml 反应体系中，37℃ 条件下，1 分钟催化 1 μmol 的对硝基苯磷酸盐（PNPP）水解成对硝基苯酚所需的酶量。

浓度

10,000 units/ml。 

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NEB代理 , RNA 试剂 , RNA 连接酶和修饰酶,RNase H,#M0297L

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

RNase H

#M0297L 1,250 units

#M0297S 250 units

特性

 重组酶
 除去杂交到 poly(dT) 上的 mRNA poly(A)
 在 cDNA 第二链合成时除去 mRNA 

概述

核糖核酸酶 H（RNase H）是一种核糖核酸内切酶，它能够特异性地水解杂交到 DNA 链上的 RNA 磷酸二酯键。该酶不能消化单链或双链DNA。

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从 E. coli 中克隆的 RNase H（rnh）基因。 

反应条件

1X RNase H 反应缓冲液 [75 mM KCl，50 mM Tris-HCl (pH 8.3 @ 25℃)，3 mM MgCl2 和 10 mM DTT]，37℃ 温育。热失活：65℃ 20 分钟。 

质保声明

无核酸内切酶、核酸外切酶污染。 

单位定义

1 单位指 50 μl 反应体系中， 37℃ 条件下， 20 分钟从 20 pmol荧光标记的 50 bp RNA-DNA杂交链中水解生成 1 nmol 核苷酸所需的酶量。
 

浓度

5,000 units/ml。 

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NEB代理,RNA 试剂,RNA 连接酶和修饰酶,5´ 去腺苷化酶#M0331S

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

5´ 去腺苷化酶

#M0331S 2,500 units

特性

 DNA 和 RNA 5´ 末端的去腺苷化
 Aprataxin 依赖的 DNA 修复检测
 分析双核苷四磷酸

概述

酵母 5´ 去腺苷化酶是组氨酸三聚体（HIT）家族中的一员，属于组氨酸三聚体核苷结合蛋白（Hint）的分支。它是 aprataxin 在酵母中的直系同源物。人 aprataxin 的突变会导致神经系统疾病，如共济失调伴眼动失用症 I。通过从 DNA 的 5´ 末端去除 AMP（AMP-DNA 水解酶活性），人源 5´ 去腺苷化酶可以去除未连接中间体，它还可以通过去除 3´ -磷酸和 3´ -磷酸乙醇酸修复 DNA 的 3´ 末端损伤。人 aprataxin 作用于小分子，如核苷多磷酸双腺苷四磷酸（AppppA）和 lysyl-AMP。

5´ 去腺苷化酶是由酿酒酵母（S. cerevisiae）的 HNT3基因编码。 NEB 研究显示该蛋白能从 DNA 和 RNA的 5´ 末端去腺苷化，余下 5´ 末端磷酸。它也能切割 AppppA 生成 ATP 和 AMP。未检测出其对 lysylAMP 有作用。

来源

从携带编码酿酒酵母 5´ 去腺苷化酶质粒的 E. coli 菌株中纯化而得。

反应条件

20 μl 反应体系：1X NEBuffer 2 [50 mM NaCl，10 mM Tris-HCl，10 mM MgCl2，1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ]，5–50 pmol 腺苷化 DNA (AMPDNA)，30℃ 温育。
热失活：70℃ 20 分钟。 

单位定义

1 单位指 30℃ 条件下，10 分钟从 5´ 腺苷化 DNA 寡聚体中去除 10 pmol AMP 所需的酶量。 

浓度

50,000 units/ml。 

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NEB代理,RNA 试剂,RNA 连接酶和修饰酶,

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

T4 RNA 连接酶 2,截短型 K227Q

#M0351L10,000 units

#M0351S2,000 units

相关产品

通用 miRNA 克隆接头

特性

 将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端
 将腺苷化单链引物连接至小 RNA 上，用于 cDNA 文库构建
 将腺苷化单链引物连接至 RNA 上，用于链特异性 cDNA 文库构建 

概述

 T4 RNA 连接酶 2，截短型 KQ（T4 Rnl2tr KQ）能特异性将 5´ 末端预腺苷化的 DNA 或 RNA 连接到RNA 的 3´ OH 末端。反应无需 ATP，但需预腺苷化接头。

T4 Rnl2tr KQ 是 T4 RNA 连接酶 2，截短型（NEB#M0242）的双点突变体。 K227 的突变降低了赖氨酰腺苷化。由于降低了 T4 Rnl2tr 从接头将腺苷基团转移到 RNA 5´ 磷酸基的活性， K227Q 可以减少 T4 Rnl2tr 非特异性的连接（串联体和环）。在 T4 Rnl2tr K227Q 中进一步突变 R55K，提高了酶的连接活性，使其与野生型 T4 Rnl2tr 连接活性水平一致。

因为不再使用 ATP，而改用预腺苷化接头，同时降低赖氨酰腺苷化酶的活性，所以连接反应的背景可以降至最低。该酶已用于二代测序 Small RNA的文库构建中，优化了接头的连接过程。

来源

重组 E. coli 菌株，携带有 MBP 融合表达的质粒，该质粒克隆有含编码 T4 RNA 连接酶 2 的前249 个氨基酸序列。 T4 Rnl2tr K227Q 是将 227 位的赖氨酸突变为谷氨酸。 T4 Rnl2tr KQ 分别在 55 和 位置进行了突变，精氨酸突变为赖氨酸、赖氨酸突变为谷氨酰胺。

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，25℃ 温育。
热失活：65℃ 20 分钟。 

随酶提供的试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000 

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶的污染。

单位定义

200 单位指 20 μl 反应体系中， 25℃ 条件下， 1 小时能将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端 [miRNA 通用克隆接头（NEB#S1315）] 所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。

浓度

200,000 units/ml。 

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NEB代理 , RNA 试剂 , RNA 连接酶和修饰酶,#M0356S

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

RNA 5´ 焦磷酸水解酶（RppH）

#M0356S 200 units

特性

 将 5´ 三磷酸 RNA 转化为单磷酸 RNA
 制备用于连接的 5´ 磷酸 RNA
 分析 RNA 5´ 末端修饰 

概述

细菌 RNA 5´ 焦磷酸水解酶（RppH）能从 5´末端三磷酸化的 RNA 中去除焦磷酸盐产生 5´ 单磷酸 RNA。 RppH 蛋白又叫 NudH/YgdP，可以将二腺苷五磷酸 (diadenosine penta-phosphate) 分解成 ADP和 ATP。

来源

纯化自携带有 RppH 基因的 E. coli 菌株。 

反应条件

1X NEBuffer 2 [10 mM Tris-HCl，50 mM NaCl，1 mM DTT，10 mM MgCl2，( pH 7.9 @ 25℃ ) ]，37℃ 温育。 

随酶提供的试剂

10X NEBuffer 2。 

单位定义

1 单位指 37℃ 条件下，30 分钟内将 1 μg 300-mer RNA 转录产物转化成 XRN-1 可消化的 RNA 所需要的酶量。 

浓度

5,000 units/ml。 

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NEB代理,RNA 试剂,RNA 连接酶和修饰酶,T4 RNA 连接酶 2截短型 KQ

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

T4 RNA 连接酶 2截短型 KQ

#M0373L 10,000 units

#M0373S 2,000 units

相关产品

通用 miRNA 克隆接头

特性

 将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端
 将腺苷化单链引物连接至小 RNA 上，用于 cDNA 文库构建
 将腺苷化单链引物连接至 RNA 上，用于链特异性 cDNA 文库构建 

概述

 T4 RNA 连接酶 2，截短型 KQ（T4 Rnl2tr KQ）能特异性将 5´ 末端预腺苷化的 DNA 或 RNA 连接到RNA 的 3´ OH 末端。反应无需 ATP，但需预腺苷化接头。

T4 Rnl2tr KQ 是 T4 RNA 连接酶 2，截短型（NEB#M0242）的双点突变体。 K227 的突变降低了赖氨酰腺苷化。由于降低了 T4 Rnl2tr 从接头将腺苷基团转移到 RNA 5´ 磷酸基的活性， K227Q 可以减少 T4 Rnl2tr 非特异性的连接（串联体和环）。在 T4 Rnl2tr K227Q 中进一步突变 R55K，提高了酶的连接活性，使其与野生型 T4 Rnl2tr 连接活性水平一致。
因为不再使用 ATP，而改用预腺苷化接头，同时降低赖氨酰腺苷化酶的活性，所以连接反应的背景可以降至最低。该酶已用于二代测序 Small RNA的文库构建中，优化了接头的连接过程。

来源

重组 E. coli 菌株，携带有 MBP 融合表达的质粒，该质粒克隆有含编码 T4 RNA 连接酶 2 的前249 个氨基酸序列。 T4 Rnl2tr K227Q 是将 227 位的赖氨酸突变为谷氨酸。 T4 Rnl2tr KQ 分别在 55 和 位置进行了突变，精氨酸突变为赖氨酸、赖氨酸突变为谷氨酰胺。

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，25℃ 温育。
热失活：65℃ 20 分钟。 

随酶提供的试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000 

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶的污染。

单位定义

200 单位指 10 μl 反应体系中，25℃ 条件下，1 小时能将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端 [miRNA 通用克隆接头（NEB #S1315）] 所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。 

浓度

200,000 units/ml。 

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NEB代理,RNA 试剂,RNA 连接酶和修饰酶,#M043M,T4 RNA 连接酶 1

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

T4 RNA 连接酶 1（ssRNA 连接酶）（高浓度）        #M043M 5,000 units

相关产品

5´ -三磷酸腺苷（ATP）
 通用 miRNA 克隆接头

特性

 连接单链 RNA 和 DNA
 用 5´ -[32P] pCp 进行 RNA 3´ 末端标记
 RNA 和 DNA 分子内及分子间的连接
 合成单链寡脱氧核苷酸
 蛋白质中掺入非天然氨基酸 

概述

催化 3´ →5´ 磷酸二酯键的形成，使核苷酸的 5´ -磷酸末端和 3´ -羟基末端连接，伴随着 ATP 水解为 AMP 和 PPi。作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸。 

来源

携带 T4 RNA 连接酶 1 基因的 E. coli 菌株。 

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，加入 1 mM ATP，37℃ 温育。热失活：65℃ 15 分钟或煮沸 2 分钟。 

使用注意事项

pCp 的连接需要加入终浓度为10%（v/v）的 DMSO。 

随酶提供试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
10 mM ATP（NEB #M0204中包含）或 100 mM ATP（NEB #M0437中包含）50% PEG 8000 

质保声明

无单链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 和磷酸酶污染。 

单位定义

1 单位指 37℃ 条件下，30 分钟内将 1 nmol 的 5´ -[32P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。

浓度

10,000 或 30,000 units/ml。 

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NEB代理 , RNA 试剂 , RNA 连接酶和修饰酶,#M0458S,RtcB 连接酶

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

RtcB 连接酶

#M0458S 25 次反应

特性

连接单链 RNA 或单链 DNA 的 3´ -磷酸基团或 2´ ,3´ -环磷酸基团连接到单链 RNA 的 5´ -羟基上

 含有匹配末端的单链 RNA 环化

概述

来源于 E. coli 的 RtcB 连接酶能将单链线性RNA 分子中的 3´ -磷酸基或 2´ , 3´ -环磷酸基团与另一个 RNA 分子的 5´ -羟基进行连接。连接反应需有 GTP 和 MnCl2 的参与，并在反应过程中会形成反应中间体-鸟苷酸。如底物末端含有 2´ , 3´ -环磷酸基团，需先行水解成 3´ -磷酸基，然后再通过 GMP 进行 3´ 末端活化和连接。

来源

重组 E. coli 菌株，携带有 His 标签的 RtcB 连接酶基因。

反应条件

1X RtcB 反应缓冲液 [50 mM Tris-HCl (pH8.3 @ 2℃), 75 mM KCl, 3 mM MgCl2, 10 mM DTT]，补加0.1 mM GTP 和 1 mM MnCl2。 37℃ 温育。

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶的污染。

浓度

15 μM

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NEB代理,RNA 试剂,RNA 连接酶和修饰酶,耐热 RNase H,#M0523S

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

耐热 RNase H

#M0523S 250 units

特性

 NEB代理 , RNA 试剂 , RNA 连接酶和修饰酶

概述

 耐热 RNaseH 特异性识别并切割 RNA-DNA 杂交体中 RNA 序列的磷酸二酯键，同时保持DNA 序列完整。这种热稳定的核酸酶具有与大肠杆菌 RNaseH 相同的酶学性质，但在更高的温度下具有活性。


反应条件：1X RNase H 反应缓冲液，50℃ 温育。
单位定义：1 单位指 50 μl 反应体系中，50℃ 条件下，20 分钟从 40 pmol荧光标记的 25 bp RNA-DNA 杂交链中水解得到 1 nmol 核糖核苷酸所需的酶量。单位活性检测条件请登陆。
浓度：5,000 units/ml

NEB代理,RNA 试剂,RNA 连接酶和修饰酶,Sce 假尿嘧啶合成酶 I,#M0526S

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

Sce 假尿嘧啶合成酶 I

#M0526S 5,000 pmol

特性

 Ÿ   Sce PUS1 用于在体外将单链 RNA 中尿嘧啶转化为假尿嘧啶

Ÿ   Sce PUS1 是一款独立的酶，不需要 RNA 向导或辅助因子即可修饰 RNA

Ÿ   使用 Sce PUS1 对特定序列进行假尿苷修饰可以替代通过 RNA 聚合酶随机掺入修饰核苷酸的方法

产品说明

 该酶是创新酶（Enzyme for Innovation, EFI）。创新酶工程由 NEB 发起，旨在为科研界提供独一无二的酶，从而为新的创新应用的发现创造条件。这些酶均具有独特的功能和特性。

Sce 假尿嘧啶合成酶 I（Sce PUS1）可将单链 RNA 中尿嘧啶转化为假尿嘧啶，对单链 RNA 中尿嘧啶的转化率高于双链 RNA。最佳底物为≥15 nt无特殊结构的 RNA。

NEB代理 , RNA 试剂 , RNA 连接酶和修饰酶

NEB代理 , RNA 试剂 , RNA 连接酶和修饰酶,NudC 焦磷酸酶,#M0607S

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

NudC 焦磷酸酶

#M0607S 250 pmol

特性

·对含 ADP 的、非经典启动核苷酸，如 NAD+ 和 NADH 进行脱帽，生成可连接的 5′ 末端为单磷酸的基团
·水解 NADH 生成 AMP 和还原型烟酰胺单磷酸核苷（NMNH）；水解 NAD+ 产生 AMP和烟酰胺单磷酸核苷（NMN+）
·水解二磷酸二核苷酸和含有 ADP 基团的代谢辅助因子，如 AppA、FAD、辅酶 A 等
·当 NAD+ 是 RNA 的 5’ 启动核苷酸时，可用于 NAD+ 脱帽或去除 NAD
·适用于基于连接方法的研究，如 5’ RACE 和 RNA 测序，以检测和鉴定含有非经典启动核苷酸的RNA
该酶是一种创新酶（EFI，Enzyme for Innovation）。EFI 是由 NEB 发起的一个项目，旨在为科学界提供独特的酶，以期发现新应用。这类酶既有趣又特别。

概述

 NudC 是 NUDIX 焦磷酸酶家族中的一员，可高效水解带 NAD+ 帽 和 NADH 帽的 RNA，生成连接可用的带 5′ 单磷酸末端的 RNA（NAD+ 脱帽或去除 NAD）（1）。研究表明：nudC 基因的缺失增加了大肠杆菌中 NAD+ 帽化 RNA 的比例（2）。

该酶还能以不同的效率水解含 ADP 基团的小分子，如 NADH、NAD+、AppA、ADP-核糖、ADP-葡萄糖和代谢辅助因子，如 FAD、辅酶 A 和乙酰辅酶 A（3 和未发表结果）。由于其对各种二核苷酸和代谢辅因子的活性，该酶有望通过对帽的焦磷酸化水解作用和核苷酸产物的分析，来识别带有非经典帽结构的 RNA，或使用基于 5′ 连接的方法（如 RNA 测序或 5′ RACE（4））来识别带有 5′ 单磷酸末端的 RNA。
NEB代理 , RNA 试剂 , RNA 连接酶和修饰酶
随酶提供的试剂
NEBuffer™ 3.1
100 mM DTT
浓度
10 µM
单位定义
在 1X NEBuffer 3.1 和 5 mM DTT 的反应条件中，加入 1 µM NudC，37℃ 温育 30 分钟，能将 200 µM 或更多 NAD+ 水解成 NMN+ 和 AMP。
反应条件
1X NEBuffer™ 3.1，补加 5 mM DTT，37℃ 温育。

热失活
65℃ 加热 10 分钟。
储存温度
-20℃
质保声明 
NudC 焦磷酸酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理

1.  Frick D.N. and Bessman M.J. (1995).  J. Biol. Chem. 270, 1529-1534.

2.  Cahová, H. et al. (2015). Nature. 519, 374-377.

3.  Höfer K. et al. (2016). Nat Chem Biol. 12, 730-734.

4.  Vvedenskaya I.O., et al (2018). Mol Cell. 70, 553-564.e9.