MCE抑制剂∣Abcam CST Santa抗体∣蛋白、酶、磁珠
在装柱过程中，需小心防止气泡产生（气泡会影响流速）。
图 2：IMPACT 系统流程图。
表 1：IMPACT 载体及其应用。
pTXB1 是大肠杆菌表达载体，携带有一个小的蛋白自剪切元件即来自 Mycobacterium xenopi gyrA 基因的 mini 内含肽［Mxe GyrA 内含肽，22 kDa］。蛋白自剪切元件经修饰后与来自芽孢杆菌（Bacillus circulans）的几丁质结合域（CBD）一起共同形成一个内含肽标签。该标签可与几丁质珠（NEB #S6651）结合。使用硫醇试剂（如 DTT）或 MESNA（2-mercaptoethanesulfonic acid）（后续连接用）诱导内含肽自我剪切并释放出目的蛋白。
图 1：单柱亲和纯化麦芽糖结合蛋白。泳道 1：未诱导细胞提取物。泳道 2：诱导表达融合蛋白细胞提取物。泳道 3：4℃ 过夜诱导裂解得到麦芽糖结合蛋白。泳道 4：麦芽糖结合蛋白偶联到含有 N 端半胱氨酸的肽链上。Marker M：蛋白分子量标准（NEB #P7703）。
图 2：IMPACT 系统流程图
图 3：内含肽介导的蛋白连接（IPL）流程图。
表 1：IMPACT 载体及其应用。
a实际切割效率取决于临近的残基和融合蛋白的折叠。b DTT 仅用于蛋白纯化。MESNA 可以使分离的蛋白拥有一个 C-末端的巯酯键，可用于连接、标记和环化。c 半胱氨酸可用来替代 DTT。
关于本产品特点与应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。
该产品已停产，替代产品： 抗 MBP 单克隆抗体（NEB #E8032）
产品于2020 年 6 月 30 日停产，替代产品为：NEBExpressTM MBP 融合表达及纯化系统（E8201）
该产品可直接替换 NEB #E8200，pMAL™ 蛋白融合表达系统
在 NEBExpress® MBP 融合表达及纯化系统中，pMAL-c6T 载体提供了一种将克隆基因或开放阅读框编码的蛋白质表达和纯化的方法。首先，将目标克隆基因插入大肠杆菌编码麦芽糖结合蛋白（MBP）的 malE 基因框架下游；这样构建的载体可表达 MBP 融合蛋白（2,3）。pMAL-c6T 载体表达 N 端标记六组氨酸的 malE 基因（缺少分泌信号序列，并且经改造可以与直链淀粉更紧密地结合），其后是 TEV 蛋白酶识别序列、多克隆酶切位点和三位终止密码子。pMAL-c6T 载体在细胞质中表达 MBP 融合蛋白。这种方法使用“tac”强启动子和 malE 翻译起始信号，从而能够使克隆序列进行高水平表达（4,5）。然后，利用 MBP 与麦芽糖的亲和特性，使用直链淀粉树脂对融合蛋白进行一步纯化（6）。
试剂盒组分
随产品提供如下试剂
| 名称 | 储存温度(℃) | 浓度 |
| pMAL-c6T DNA | 200 µg/ml | |
| Amylose Resin
|
4 | |
| TEV Protease
|
-20 | 10,000 units/ml |
| TEV Protease Reaction Buffer | -20 | 10 X |
| Anti-MBP Monoclonal Antibody | -20 | |
| MBP6 Protein | -20 | 40 µg/ml |
| MBP6-TEV-Paramyosin ΔSal | -20 | 5 mg/ml |
| E. coli ER2523 (NEB Express) (Glycerol Stock) | -20 |
-20℃
·pMAL-c6T 是 NEBExpress® MBP 融合表达及纯化系统（NEB＃E8201）中推荐的载体
pMAL-c6T 载体提供了一种从克隆基因或开放阅读框到蛋白表达的方法。克隆基因插入到大肠杆菌的 malE 基因下游，malE 基因编码麦芽糖结合蛋白（MBP），从而使 MBP 融合蛋白在细胞质中表达（1，2）。MBP 经设计改造，可更紧密的结合到 Amylose 树脂上。该方法利用 “tac” 强启动子和 malE 翻译起始信号，使克隆序列得到高水平表达（3，4），同时可利用 MBP 对麦芽糖的亲和力，一步纯化融合蛋白（5）。该载体表达 N 端六组氨酸标记的 malE 基因（缺少分泌信号序列），随后是包含 TEV 蛋白酶识别序列的多克隆酶切位点，以及三位终止密码子。从而可在纯化后，使用 TEV 蛋白酶将 MBP 从目标蛋白上切下来。该载体还携带 lacIq 基因，该基因编码 Lac 阻遏蛋白。在没有 IPTG 诱导的情况下，可使 Ptac 低水平表达
pMAL-c6T 载体的 malE 基因上具有明确的信号序列缺失，箭头指示转录方向，多克隆酶切位点（MCS）中标注了限制性内切酶位点
pTXB1 是大肠杆菌表达载体，携带有一个小的蛋白自剪切元件即来自 Mycobacterium xenopi gyrA 基因的 mini 内含肽［Mxe GyrA 内含肽，22 kDa］。蛋白自剪切元件经修饰后与来自芽孢杆菌（Bacillus circulans）的几丁质结合域（CBD）一起共同形成一个内含肽标签。该标签可与几丁质珠（NEB #S6651）结合。使用硫醇试剂（如 DTT）或 MESNA（2-mercaptoethanesulfonic acid）（后续连接用）诱导内含肽自我剪切并释放出目的蛋白。
图 1：单柱亲和纯化麦芽糖结合蛋白。泳道 1：未诱导细胞提取物。泳道 2：诱导表达融合蛋白细胞提取物。泳道 3：4℃ 过夜诱导裂解得到麦芽糖结合蛋白。泳道 4：麦芽糖结合蛋白偶联到含有 N 端半胱氨酸的肽链上。Marker M：蛋白分子量标准（NEB #P7703）。
图 2：IMPACT 系统流程图
图 3：内含肽介导的蛋白连接（IPL）流程图。
表 1：IMPACT 载体及其应用。
a实际切割效率取决于临近的残基和融合蛋白的折叠。b DTT 仅用于蛋白纯化。MESNA 可以使分离的蛋白拥有一个 C-末端的巯酯键，可用于连接、标记和环化。c 半胱氨酸可用来替代 DTT。
关于本产品特点与应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。
pTXB1 是大肠杆菌表达载体，携带有一个小的蛋白自剪切元件即来自 Mycobacterium xenopi gyrA 基因的 mini 内含肽［Mxe GyrA 内含肽，22 kDa］。蛋白自剪切元件经修饰后与来自芽孢杆菌（Bacillus circulans）的几丁质结合域（CBD）一起共同形成一个内含肽标签。该标签可与几丁质珠（NEB #S6651）结合。使用硫醇试剂（如 DTT）或 MESNA（2-mercaptoethanesulfonic acid）（后续连接用）诱导内含肽自我剪切并释放出目的蛋白。
图 1：单柱亲和纯化麦芽糖结合蛋白。泳道 1：未诱导细胞提取物。泳道 2：诱导表达融合蛋白细胞提取物。泳道 3：4℃ 过夜诱导裂解得到麦芽糖结合蛋白。泳道 4：麦芽糖结合蛋白偶联到含有 N 端半胱氨酸的肽链上。Marker M：蛋白分子量标准（NEB #P7703）。
图 2：IMPACT 系统流程图
图 3：内含肽介导的蛋白连接（IPL）流程图。
表 1：IMPACT 载体及其应用。
a实际切割效率取决于临近的残基和融合蛋白的折叠。b DTT 仅用于蛋白纯化。MESNA 可以使分离的蛋白拥有一个 C-末端的巯酯键，可用于连接、标记和环化。c 半胱氨酸可用来替代 DTT。
关于本产品特点与应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。
pTWIN1 is an E. coli expression vector which can be used with the IMPACT™ Kit (NEB #E6901). pTWIN vectors are designed for protein purification or for the isolation of proteins with an N-terminal cysteine and/or a C-terminal thioester (1). A polylinker in the vector is designed for the in-frame fusion of a target gene between the modified Ssp DnaB (2) and Mxe GyrA inteins (3,4). The presence of the chitin binding domain from Bacillus circulans (5,6) facilitates purification. The double-stranded vector is 7,375 base pairs in length.
A pBR322 derivative
Chitin-Binding Domain (CBD)
-20°C
产品于2020 年 6 月 30 日停产，替代产品为：pMAL-c6T 载体（N0378）
pMAL 载体用于 pMAL 蛋白融合表达和纯化系统（NEB #E8200）。利用“Ptac”强启动子和 MBP 起始
翻译信号，目的基因与 malE 基因（编码 MBP 蛋白）融合表达。同时，它们含有与 NEB 其它表达系统
相兼容的多克隆位点。pMAL-c5 载体删除了malE信号序列，融合蛋白将在细胞质中表达。pMAL-p5X 载
体含有 malE 信号序列，它将引导融合蛋白穿越质膜。pMAL-c5XHis 载体可以在其目的蛋白的 C – 末端
添加 6个his 标签。所有的载体都含有一段特异性蛋白酶识别位点序列，融合蛋白纯化后，通过蛋白酶可
将目的蛋白与 MBP 切割分离。[载体 pMALc5E含有一个肠激酶（NEB #P8070）的特异性切割位点；载
体 pMAL-c5X ，pMAL-p5X 和 pMAL-p5XHis含有一个 Factor Xa 蛋白酶（NEB #P8010）的特异性切割
位点.
145 ~ 240 μg/ml。
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推荐用于测序的引物（不随产品提供）如下：
正向引物（24-mer，位于 malE 基因上游）
5´d(GGTCGTCAGACTGTCGATGAAGCC)3´
反向引物（24-mer，位于多克隆位点下游）
5´d(TGTCCTACTCAGGAGAGCGTTCAC)3´
产品于2020 年 6 月 30 日停产
pMAL 载体用于 pMAL 蛋白融合表达和纯化系统（NEB #E8200）。利用“Ptac”强启动子和 MBP 起始
翻译信号，目的基因与 malE 基因（编码 MBP 蛋白）融合表达。同时，它们含有与 NEB 其它表达系统
相兼容的多克隆位点。pMAL-c5 载体删除了malE信号序列，融合蛋白将在细胞质中表达。pMAL-p5X 载
体含有 malE 信号序列，它将引导融合蛋白穿越质膜。pMAL-c5XHis 载体可以在其目的蛋白的 C – 末端
添加 6个his 标签。所有的载体都含有一段特异性蛋白酶识别位点序列，融合蛋白纯化后，通过蛋白酶可
将目的蛋白与 MBP 切割分离。[载体 pMALc5E含有一个肠激酶（NEB #P8070）的特异性切割位点；载
体 pMAL-c5X ，pMAL-p5X 和 pMAL-p5XHis含有一个 Factor Xa 蛋白酶（NEB #P8010）的特异性切割
位点。
145 ~ 240 μg/ml。
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推荐用于测序的引物（不随产品提供）如下：
正向引物（24-mer，位于 malE 基因上游）
5´d(GGTCGTCAGACTGTCGATGAAGCC)3´
反向引物（24-mer，位于多克隆位点下游）
5´d(TGTCCTACTCAGGAGAGCGTTCAC)3´
1 mg/ml。
TEV 蛋白酶也称烟草蚀纹病毒蛋白酶，是一种高度特异性的半胱氨酸蛋白酶，可识别氨基酸序列 Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-（Gly/Ser）并在 Gln 和 Gly/Ser 之间切割。常用于从融合蛋白中去除亲和纯化标签，例如麦芽糖结合蛋白（MBP）或多组氨酸。为了方便纯化烟草蚀纹病毒蛋白酶（TEV）携带 7xHis标签，可以使用镍亲和树脂轻松去除，该酶经生物工程改造具有更高的性能
克隆自烟草蚀纹病毒（Tobacco Etch Virus），在 E. coli 中表达。
28,000 daltons
1 单位指 10 μl 反应体系中，30℃ 条件下，1 小时内将 2 μg MBP-融合蛋白（MBP5-TEV-paramyosin ΔSal），达到 95％ 的切割所需的酶量，反应缓冲液含量如下：0.5 mM EDTA 和 1mM DTT 的 50 mM Tris-HCl（pH 7.5，25℃）
10,000 units/ml
NEBExpress® E. coli 裂解试剂是化学裂解溶液，由专有的非离子和两性离子去垢剂以及 Tris 缓冲液组成，可用于破碎 E. coli 细胞，而不会降解或变性其内的可溶性蛋白。
产品组分与保存条件
|
货号 |
名称 |
保存温度（°C） |
体积 |
浓度 |
|
P8116S |
NEBExpress® E. coli 裂解试剂 |
25 |
1 x 100 ml |
1 x |
|
P8116L |
NEBExpress® E. coli 裂解试剂 |
25 |
5 x 100 ml |
1 x |
包括即用型预装镍离心柱和纯化所需的所有缓冲液
镍离心柱包含亲和基质，用于小规模分离和纯化带有多组氨酸标签（His 标签）的融合蛋白。使用 NEBExpress™ 镍离心柱进行固定化金属亲和层析（IMAC）可以在天然或变性条件下进行纯化，从而一步纯化即可获得高纯度的蛋白质。使筛选表达条件及简化靶蛋白的功能和结构研究成为可能。
平衡 NEBExpress 镍离心柱，并加入 500 μl 大肠杆菌粗提物，其中含有表达 His6-GluRS 或 His6-NDK 融合蛋白的质粒。经洗涤、洗脱、跑 SDS-PAGE 胶检测，以确认靶蛋白的高度分离和极地的非特异性蛋白结合。Marker（M）包含彩色预染蛋白 Standard（NEB＃P7719），第 1 道：GluRS 蛋白质上样液，第 2 道：GluRS 经流液，第 3 道：GluRS 第一次洗脱，第 4 道：GluRS 第二次洗脱，第 5 道：NDK 蛋白质上样液，第 6 道：NDK 经流液，第 7 道：NDK 第一次洗脱，第 8 道：NDK 第二次洗脱。
随产品提供的试剂：
|
储存温度(°C) |
浓度 |
|
|
2X IMAC Buffer |
4 |
2 X |
|
2M Imidazole |
2 M |
产品类别：树脂、磁珠和磁力架产品、蛋白表达和纯化产品
应用：标记蛋白的表达，偶联蛋白的表达和纯化
储存温度：4°C
储存条件：20% 乙醇
每 1 ml 镍柱填料可纯化≥10 mg 组氨酸标签蛋白
用于重力或压力液流柱以及批量纯化
高特异性结合带有组氨酸标签的蛋白质，分离和纯化后纯度>95％
牢固的镍离子结合使其对 EDTA 和还原剂有极高的耐受性。与市场上基于去污剂的细胞裂解试剂兼容
可在天然或变性条件下分离和纯化组氨酸标签蛋白
NEBExpress™ 镍柱填料也有离心柱形式在售，NEB #S1427
An affinity matrix for the isolation of target proteins fused to an intein-chitin binding domain fusion (1）
Storage Temperature
4°C
2.0 mg maltose-binding protein/ ml bed volume released from the resin after cleavage of the fusion protein expressed from pMYB5.
Yes
GG799 是 K. lactis 蛋白表达试剂盒中提供的基础菌株。其特点是细胞生长密度与异源蛋白表达效率极高，GG799 细胞未经遗传修饰。
蛋白质的分泌过程。在细胞核中，整合表达载体编码了一个含有 ɑ-MF 结构域（蓝色）和目的蛋白（黑色）的融合蛋白。融合蛋白表达后，位于 ɑ-MF 上的信号肽就会指导融合蛋白转运至内质网（ER），信号肽即被信号肽酶（SP）切除。融合蛋白质转运至高尔基体，Kex 蛋白酶在此将 α-MF 结构域切除。随后，目的蛋白质被分泌到细胞外。
K. lactis 的蛋白表达。SDS-PAGE 电泳分离检测分泌性表达的重组麦芽糖结合蛋白（MBP），菌体生长在富含蛋白胨（peptone）的培养基中，直接上样检测。考马斯亮蓝染色鉴定。泳道 1：蛋白分子量 Marker；泳道 2：野生型 K. lactis 细胞培养液（15 μl）；泳道 3：整合有大肠杆菌 malE 基因表达框的 K. lactis 细胞培养液（15 μl）。
关于这些产品特点与应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。
GG799 是 K. lactis 蛋白表达试剂盒中提供的基础菌株。其特点是细胞生长密度与异源蛋白表达效率极高，GG799 细胞未经遗传修饰。
蛋白质的分泌过程。在细胞核中，整合表达载体编码了一个含有 ɑ-MF 结构域（蓝色）和目的蛋白（黑色）的融合蛋白。融合蛋白表达后，位于 ɑ-MF 上的信号肽就会指导融合蛋白转运至内质网（ER），信号肽即被信号肽酶（SP）切除。融合蛋白质转运至高尔基体，Kex 蛋白酶在此将 α-MF 结构域切除。随后，目的蛋白质被分泌到细胞外。
K. lactis 的蛋白表达。SDS-PAGE 电泳分离检测分泌性表达的重组麦芽糖结合蛋白（MBP），菌体生长在富含蛋白胨（peptone）的培养基中，直接上样检测。考马斯亮蓝染色鉴定。泳道 1：蛋白分子量 Marker；泳道 2：野生型 K. lactis 细胞培养液（15 μl）；泳道 3：整合有大肠杆菌 malE 基因表达框的 K. lactis 细胞培养液（15 μl）。
关于这些产品特点与应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。
K.lactis的蛋白表达。SDS-PAGE 电泳分离检测分泌性表达的重组麦芽糖结合蛋白（MBP），菌体生长在富含蛋白胨（peptone）的培养基中，直接上样检测。考马斯亮蓝染色鉴定。泳道 1：蛋白分子量 Marker；泳道 2：野生型 K. lactis 细胞培养液（15 μl）；泳道 3：整合有大肠杆菌 malE 基因表达框的 K. lactis细胞培养液（15 μl）。
NEBuffer 1.1: <10%
NEBuffer 2.1: 50%
NEBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 25%
重组酶、省时酶。
NEBuffer 3.1，37℃。
热失活：80℃ 20 分钟。
10,000 units/ml。
对 dcm 甲基化敏感。
甘油浓度 ＞ 5% 条件下可能出现星号活性。
NEBuffer 1.1: 10%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
CutSmart、重组酶、省时酶。
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活：65℃ 20 分钟。
20,000 units/ml。
对哺乳动物基因组 DNA CpG 甲基化敏感。
某些 Sacll 的识别位点不能被切割，如 λDNA 右臂上的 Sacll 识别位点，有关底物位点优势效应。
NEB 提供多种适用于各类蛋白表达的感受态细胞。Shuffle® 菌株在表达含多个二硫键的重组蛋白时，显著提高形成正确二硫键的能力。通过 Lemo21（DE3）可实现 T7 的可调控表达，这种菌株是表达包括膜蛋白在内的问题蛋白的理想选择。NiCo21（DE3）可用于 His 标记蛋白的表达和纯化。NEB 表达系统和 T7 表达系统均可实现对蛋白表达水平的调控。其中有些菌株可以通过 lacIq 调控非T7 质粒的诱导（IPTG）表达。然而只有 NEB 提供通过 lysY 基因对表达进行更为严格调控的菌株。每种表达菌株都提供一份优化的表达方案。
* NEB Express 是 pMAL 蛋白融合表达与纯化系统的推荐菌株。
PURExpress® 体外蛋白合成试剂盒是新型无细胞转录/翻译系统，用于基因快速表达分析，是由大肠杆菌翻译所必需组份纯化而构成。PURExpress 系统无核酸酶和蛋白酶的污染，保护了 DNA 和 RNA模板/复合体，避免了蛋白的修饰及降解。转录和翻译过程仅需将两管试剂混合，一步反应即可完成，几个小时就可观察实验结果，PURExpress 系统大大地节省了宝贵的实验时间，特别适合于高通量技术。
该专利产品的成分为蛋白质与缓冲液，当 PURExpress 系统合成或 E. coli S30 提取的目的蛋白具有较多二硫键时，能帮助其正确折叠。在合成反应开始时加入 PURExpress 二硫键增强剂，能够协助半胱氨酸硫醇的氧化，并纠正硫醇的错误氧化，从而提高可溶性蛋白及具有功能活性蛋白的产量。
此试剂盒中移除了核糖体，使得研究蛋白翻译的用户能够使用自己的修饰核糖体。试剂盒还提供单独一管的对照核糖体（2 次反应用量）。
释放因子通过识别 mRNA 序列上的终止密码子参与蛋白翻译的终止过程。采用 PURExpress 进行核糖体展示实验时，缺乏释放因子能够稳定 mRNA-核糖体-新生肽链形成的三元复合体。因此 cDNA 的回收率会更高。该试剂盒单独提供三种释放因子，用户能够自行选择在有或无释放因子的条件下进行蛋白质体外合成或核糖体展示。
该试剂盒单独提供 tRNA 与氨基酸，用户能够向反应体系中加入修饰过的氨基酸与 tRNA 混合液进行蛋白质合成反应。
大肠杆菌的 70S 核糖体由一个小亚基（30S）与一个大亚基（50S）组成。该核糖体试剂在 NEB 的PURExpress体外蛋白合成试剂盒（NEB #E6800）中活性很高，在核糖体结构与功能研究中，能够用于药物筛选的靶标以及分离天然核糖体 RNA（5S、16S、23S）的起始材料。该产品溶液浓度为 33.3 mg/ml。
PURExpress® 体外蛋白合成试剂盒是新型无细胞转录/翻译系统，用于基因快速表达分析，是由大肠杆菌翻译所必需组份纯化而构成。PURExpress 系统无核酸酶和蛋白酶的污染，保护了 DNA 和 RNA模板/复合体，避免了蛋白的修饰及降解。转录和翻译过程仅需将两管试剂混合，一步反应即可完成，几个小时就可观察实验结果，PURExpress 系统大大地节省了宝贵的实验时间，特别适合于高通量技术。
该专利产品的成分为蛋白质与缓冲液，当 PURExpress 系统合成或 E. coli S30 提取的目的蛋白具有较多二硫键时，能帮助其正确折叠。在合成反应开始时加入 PURExpress 二硫键增强剂，能够协助半胱氨酸硫醇的氧化，并纠正硫醇的错误氧化，从而提高可溶性蛋白及具有功能活性蛋白的产量。
此试剂盒中移除了核糖体，使得研究蛋白翻译的用户能够使用自己的修饰核糖体。试剂盒还提供单独一管的对照核糖体（2 次反应用量）。
释放因子通过识别 mRNA 序列上的终止密码子参与蛋白翻译的终止过程。采用 PURExpress 进行核糖体展示实验时，缺乏释放因子能够稳定 mRNA-核糖体-新生肽链形成的三元复合体。因此 cDNA 的回收率会更高。该试剂盒单独提供三种释放因子，用户能够自行选择在有或无释放因子的条件下进行蛋白质体外合成或核糖体展示。
该试剂盒单独提供 tRNA 与氨基酸，用户能够向反应体系中加入修饰过的氨基酸与 tRNA 混合液进行蛋白质合成反应。
大肠杆菌的 70S 核糖体由一个小亚基（30S）与一个大亚基（50S）组成。该核糖体试剂在 NEB 的 PURExpress体外蛋白合成试剂盒（NEB #E6800）中活性很高，在核糖体结构与功能研究中，能够用于药物筛选的靶标以及分离天然核糖体 RNA（5S、16S、23S）的起始材料。该产品溶液浓度为 33.3 mg/ml。
PURExpress® 体外蛋白合成试剂盒是新型无细胞转录/翻译系统，用于基因快速表达分析，是由大肠杆菌翻译所必需组份纯化而构成。PURExpress 系统无核酸酶和蛋白酶的污染，保护了模板 DNA 和 RNA，避免了蛋白的修饰及降解。转录和翻译过程仅需将两管试剂混合，一步反应即可完成，几个小时就可观察实验结果，PURExpress 系统大大地节省了宝贵的实验时间，特别适合于高通量技术。
使用 PURexpress 体外蛋白合成试剂盒表达蛋白质。25 μl 反应体系中加入 250 ng 模板 DNA 和 20 单位 RNase 抑制剂，37℃ 反应 2 小时。各取 2.5 μl 反应液，进行 10-20% Tris-甘氨酸 SDS-PAGE 电泳分析。红点处指示的为目的蛋白。Marker M 是蛋白质分子量标准（NEB #P7703）
该专利产品的成分为蛋白质与缓冲液，当 PURExpress 系统合成或 E. coli S30 提取的目的蛋白具有较多二硫键时，能帮助其正确折叠。在合成反应开始时加入 PURExpress 二硫键增强剂，能够协助半胱氨酸硫醇的氧化，并纠正硫醇的错误氧化，从而提高可溶性蛋白及具有功能活性蛋白的产量。
PURexpress 二硫键增强剂。（PDBE）促进活性 vtPA 的正确折叠。反应按照 PURExpress 系统说明进行，以 vtPA DNA 为模板。37℃ 下温育 2 小时后，取 5 μl 反应液进行活性检测，在 1 小时内监测发光底物的剪切反应。
此试剂盒中移除了核糖体，使得研究蛋白翻译的用户能够使用自己的修饰核糖体。试剂盒还提供单独一管的对照核糖体（2 次反应用量）。
释放因子通过识别 mRNA 序列上的终止密码子参与蛋白翻译的终止过程。采用 PURExpress 进行核糖体展示实验时，缺乏释放因子能够稳定 mRNA-核糖体-新生肽链形成的三元复合体。因此 cDNA 的回收率会更高。该试剂盒单独提供三种释放因子，用户能够自行选择在有或无释放因子的条件下进行蛋白质体外合成或核糖体展示。
该试剂盒单独提供 tRNA 与氨基酸，用户能够向反应体系中加入修饰过的氨基酸与 tRNA 混合液进行蛋白质合成反应。
大肠杆菌的 70S 核糖体由一个小亚基（30S）与一个大亚基（50S）组成。该核糖体试剂在 NEB 的 PURExpress体外蛋白合成试剂盒（NEB #E6800）中活性很高，在核糖体结构与功能研究中，能够用于药物筛选的靶标以及分离天然核糖体 RNA（5S、16S、23S）的起始材料。该产品溶液浓度为 33.3 mg/ml。
1.5 mg/ml
一种亲和介质，能少量分离纯化与 MBP（麦芽糖结合蛋白）相融合的目的蛋白。本品通过将 Amylose 共价耦联到一种顺磁颗粒上而形成，由于该共价结合可以在很宽的 pH 范围内保持稳定，使得 Amylose 磁珠可以从细胞培养上清液中分离 MBP 融合蛋白。随后，被磁珠结合的融合蛋白可以从细胞裂解液中捕获与之发生相互作用的靶蛋白。
Amylose 磁珠是直径约为 10 μm 的超顺磁微粒。
1 mg Amylose 磁珠能结合 ≥ 10 μg MBP 融合蛋白。
一种亲和介质，能少量分离纯化与 CBD（Chitin Binding Domain）融合的目的蛋白。由于该磁珠有一个磁力核心，因此可以从细胞培养上清液中磁力分离与 CBD 融合的蛋白。再生之后磁珠不会影响结合能力。随后，被磁珠结合的融合蛋白可以从细胞裂解液中捕获与之发生相互作用的靶蛋白。
一种亲和介质，能少量分离纯化与 MBP（麦芽糖结合蛋白）相融合的目的蛋白。本品通过将 Amylose 共价耦联到一种顺磁颗粒上而形成，由于该共价结合可以在很宽的 pH 范围内保持稳定，使得 Amylose 磁珠可以从细胞培养上清液中分离 MBP 融合蛋白。随后，被磁珠结合的融合蛋白可以从细胞裂解液中捕获与之发生相互作用的靶蛋白。
Amylose 磁珠以 25 mg/ml 的浓度悬浮贮存于含 20% 乙醇的水溶液中。
几丁质磁珠是直径约为 50-70 μm 的顺磁微粒。
Amylose 磁珠是直径约为 10 μm 的超顺磁微粒。
100 μl 几丁质磁珠能结合 30-50 μg CBD 融合蛋白。
1 mg Amylose 磁珠能结合 10-20 μg MBP 融合蛋白。
直径 1 μm 的无孔超顺磁性微粒。
链霉素亲和磁珠由 1 μm 超顺磁颗粒与高纯度链霉亲和素共价结合形成。磁珠可用于捕获生物素标记的底物，包括生物素标记的抗原、抗体和核酸。生物素-链霉亲和素相互作用的结合常数为 Ka = 1015 M-1，再加上链霉亲和素的高特异性，使得捕获的底物可满足后续实验要求，包括 mRNA 分离、捕获一抗、二抗抗体。
1 μm 无孔超顺磁微粒（#S1420）或 2 μm 无孔超顺磁微粒（#S1421）。
关于本产品特点与应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。
抗 MBP 磁珠
几丁质磁珠：一种亲和介质，能少量分离纯化与 CBD（Chitin Binding Domain）融合的目的蛋白。由于该磁珠有一个磁力核心，因此可以从细胞培养上清液中磁力分离与 CBD 融合的蛋白。再生之后磁珠不会影响结合能力。随后，被磁珠结合的融合蛋白可以用于从细胞裂解液中捕获与之发生相互作用的靶蛋白。
2 μm 无孔超顺磁微粒。
2 μm 无孔超顺磁微粒。
1 ml Protein A 或 Protein G 磁珠结合 > 280 μg 人 IgG。
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该产品于 2021 年 12 月 15 日停产，替代产品包括 Protein A 磁珠（NEB #S1425）和 Protein G 磁珠（NEB #S1430）
一种亲和介质，能少量分离纯化兔 IgG。羊抗兔 IgG 共价耦联到无孔顺磁颗粒上，此二抗能与兔 IgG 各种亚型的重链相结合，适合用兔的初级多克隆抗体 IgG 的免疫实验，还可以用兔 IgG 抗体定义细胞表面抗原来对细胞进行分离和分类。
一种亲和介质，能少量分离纯化小鼠 IgG。羊抗小鼠 IgG 共价耦联到无孔顺磁颗粒上，此二抗能与小鼠 IgG 各种亚型的重链相结合，适合用小鼠的初级单克隆抗体 IgG 的免疫实验，还可以用小鼠 IgG 抗体定义细胞表面抗原来对细胞进行分离和分类。
一种亲和介质，能少量分离纯化大鼠 IgG。羊抗大鼠 IgG 共价耦联到 1 μm 无孔顺磁颗粒上，此二抗能与大鼠的初级单克隆 IgG Fc 亚单位结合，适用于大鼠初级单克隆抗体 IgG 的免疫实验，还可以用大鼠 IgG 抗体定义细胞表面抗原来对细胞进行分离和分类。
直径 1 μm 的无孔超顺磁微粒。
1 mg 磁珠能结合 5 μg IgG。
该产品于 2021 年 12 月 15 日停产，替代产品包括 Protein A 磁珠（NEB #S1425）和 Protein G 磁珠（NEB #S1430）
直径 1 μm 的无孔超顺磁微粒。
1 mg 磁珠能结合 5 μg IgG。
该产品于 2021 年 12 月 15 日停产，替代产品包括 Protein A 磁珠（NEB #S1425）和 Protein G 磁珠（NEB #S1430）
一种亲和介质，能少量分离纯化兔 IgG。羊抗兔 IgG 共价耦联到无孔顺磁颗粒上，此二抗能与兔 IgG 各种亚型的重链相结合，适合用兔的初级多克隆抗体 IgG 的免疫实验，还可以用兔 IgG 抗体定义细胞表面抗原来对细胞进行分离和分类。
一种亲和介质，能少量分离纯化小鼠 IgG。羊抗小鼠 IgG 共价耦联到无孔顺磁颗粒上，此二抗能与小鼠 IgG 各种亚型的重链相结合，适合用小鼠的初级单克隆抗体 IgG 的免疫实验，还可以用小鼠 IgG 抗体定义细胞表面抗原来对细胞进行分离和分类。
一种亲和介质，能少量分离纯化大鼠 IgG。羊抗大鼠 IgG 共价耦联到 1 μm 无孔顺磁颗粒上，此二抗能与大鼠的初级单克隆 IgG Fc 亚单位结合，适用于大鼠初级单克隆抗体 IgG 的免疫实验，还可以用大鼠 IgG 抗体定义细胞表面抗原来对细胞进行分离和分类。
直径 1 μm 的无孔超顺磁微粒。
1 mg 磁珠能结合 5 μg IgG。
磁性分离架是专为使用磁珠进行少量分离而设计的产品。磁体位于分离架侧壁，可减少移液过程中样本的损失。
钕永磁材料。
6-管磁力架 (3″ x 2″ x 1¾”), 12-管磁力架 (5½” x 2″ x 1¾”), 50 ml 磁力架 (3½” x 4¼” x 3½”) 和 96 孔微孔板磁性分离架 (5½” x 1¼” x 3¾”)。
钕永磁材料。
6-管磁力架 (3″ x 2″ x 1¾”), 12-管磁力架 (5½” x 2″ x 1¾”), 50 ml 磁力架 (3½” x 4¼” x 3½”) 和 96 孔微孔板磁性分离架 (5½” x 1¼” x 3¾”)。
