标签：荧光素酶

Coelenterazine 400a,DeepBlue C,70217-82-2

 Coelenterazine 400 a 腔肠素400a ：常称为DeepBlue C，是一种天然腔肠素衍生物，是一款良好的海肾荧光素酶（Rluc）底物，但不适合用作分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）底物。可用来实时监测钙离子浓度，报告基因分析，以及用作生物发光共振能量转移（BRET）的首玄底物。

Coelenterazine 400 a 腔肠素400a

产品关键词：

Coelenterazine 400 a 腔肠素400a；DeepBlue C；海肾荧光素酶（Rluc）；萤火虫荧光素酶（Fluc）；BRET2 生物发光共振能量转移 ；CAS NO：70217-82-2；

产品信息

产品名称 产品编号 规格
Coelenterazine 400 a 腔肠素400a MX4610-500UG 500μg
Coelenterazine 400 a 腔肠素400a MX4610-1MG 2×500μg

产品描述

天然腔肠素（Coelenterazine Native，CTZ-Native）是自然界中存在丰富的一种腔肠素，也是目前应用普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白（APO）的底物，也是海肾荧光素酶（Rluc）和分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度，后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET，细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平（ROS）的化学发光检测等。

腔肠素400a（Coelenterazine 400a，CTZ 400a），常称为DeepBlue C，是一种天然腔肠素衍生物，是一款良好的海肾荧光素酶（Rluc）底物，但不适合用作分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）底物。可用来实时监测钙离子浓度，报告基因分析，以及用作生物发光共振能量转移（BRET）的首玄底物。腔肠素400a的大射波峰值约在400nm，从而对GFP受体的发射峰干扰小。腔肠素400a用在BRET2体系，该体系通常用来评估蛋白–蛋白相互作用，包括涉及G蛋白偶联受体介导的药物细胞信号通路分析，是一种有效的药物开发和筛选工具。

产品描述

1）   CAS NO：70217-82-2

2）   化学名：2,8-Dibenzyl-6-phenyl-imidazo[1,2a]pyrazin-3-(7H)-one; 6-phenyl-2,8-bis(phenylmethyl)-imidazo [1,2-a]pyrazin-3(7H)-one;

3）   同义名：CTZ 400a; 1-bisdeoxycoelenterazine; di-dehydrocoelenterazine; DeepBlueCTM; 腔肠素400a；

4）   分子式：C26H21N3O

5）   分子量：391.5 g/mol

6）   纯度：>97%

7）   外观：黄色至橙色固体

8）   溶解性：溶于甲醇或乙醇，不要溶于DMSO

9）   化学结构式： Coelenterazine 400 a 腔肠素400a

注意事项

1）   腔肠素400a（Coelenterazine 400a）的另一个通用名DeepBlueCTM是BioSignal Packard公司的商标名。

2）   不同的BRET系统对底物的选择上会有差异（附录3—用于PPI研究的BRET系统汇总表），腔肠素400a 主要用在BRET2系统。

3）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法详细内容见maokangbio网站

一、  腔肠素400a的溶解事项

1）   腔肠素400a不溶于水，接触到空气，水分或任何氧化剂都不稳定。溶于甲醇或乙醇，千万不要溶于DMSO，因会发生未知反应引起腔肠素400a的快速降解并生成未知的代谢产物。

2）   毒性小的溶剂是无水乙醇，可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液，之后加入需要的缓冲液，尽量保持缓冲液pH小于7.0，因碱性条件会快速降解腔肠素400a，有时沉淀会立即产生。

天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

天然腔肠素及其衍生物的应用差异

用于PPI研究的BRET系统汇总表

 

D-Luciferin Sodium 荧光素钠活体成像底物,荧光素酶Luciferase常用底物

D-Luciferin Sodium 荧光素钠活体成像底物，是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，D-荧光素（底物）被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性（见下图）。

Luc报告基因底物/ D-Luciferin荧光素钠盐/超纯级别

活体成像研究/体外生物发光研究/转录水平研究

搜索关键词：

Luc reporter gene 报告基因；In vivo imaging 活体成像研究；转录水平研究；荧光素酶/ATP水平研究；报告基因质粒；报告基yin病毒颗粒；萤火虫荧光素；甲虫荧光素；CAS：103404-75-7；

基本描述：

D-Luciferin 荧光素钠盐 是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，D-荧光素（底物）被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性（见下图）。将携带荧光素酶编码基因（Luc）的质粒转染进入细胞后，导入研究动物如大小鼠体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术（BLI）来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

D-Luciferin Sodium 荧光素钠 活体成像底物 

 

基本应用：

D-荧光素也常用于体外研究，包括荧光素酶和ATP水平分析；报告基因分析；高通量测序和各种污染检测。

常见商业化类型的差异（荧光素钾，钠，游离酸）：

目前市场上有三种产品形式，D-荧光素（游离酸），D-荧光素（钠盐），和D-荧光素（钾盐）。这三种产品主要差别在于溶解特性。

1）D-荧光素（游离酸）在水以及缓冲体系内的溶解性都很弱，除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇（10 mg/ml）和DMSO（50 mg/ml）。

2）D-荧光素（钠盐）和D-荧光素（钾盐）能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，特别适合体内实验。配成溶液后的三种产品，在绝大多数应用上都没有实质性的差别。

3）D-荧光素（钠盐）和D-荧光素（钾盐）基本上没有差别，主要是使用习惯等因素影响。整体来看，钾盐的应用文献明显多于钠盐。

基本特性：

1）   CAS NO：103404-75-7

2）   化学名：(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid sodium salt; D-Luciferin firefly, sodium salt monohydrate;

3）   分子式：NaC11H7N2O3S2 · H2O

4）   分子量：320.32 g/mol

5）   纯度：＞99% (HPLC)，分子生物学级（超纯）

6）   外观：浅黄色至黄色粉末

7）   溶解性：溶于水（高达100 mg/ml）

使用方法：

A．体外生物发光检测

B．活体成像分析

产品订购：

货号 产品名称 规格
MX4602-100MG D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素（钠盐 ） 100mg
MX4602-500MG D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素（钠盐 ） 500mg
MX4602-1G D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素（钠盐 ） 1g
MX4602-5G D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素（钠盐 ） 5×1g
MX4602-10G D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素（钠盐 ） 10×1g


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MX4604-10MG DMNPE-caged Luciferin D-荧光素（DMNPE笼闭 ） 10mg


注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

D-Luciferin Sodium 荧光素钠 活体成像底物

D-Luciferin Sodium 荧光素钠 活体成像底物

 

Coelenterazine Native 天然腔肠素,

Coelenterazine Native 天然腔肠素（CTZ-Native）是自然界中存在较丰富的一种腔肠素，也是目前应用较普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白（APO）的底物，也是海肾荧光素酶（Rluc）和分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）等荧光素酶的作用底物。

Coelenterazine Native 天然腔肠素

Coelenterazine (CTZ) 天然腔肠素；海肾荧光素酶（Rluc）；分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）；萤火虫荧光素酶（Fluc）；In vivo bioluminescence imaging 活体动物体内成像技术；CAS NO：50909-86-9；

产品信息

产品名称 产品编号 规格
Coelenterazine Native 天然腔肠素

MX4606-500UG

500μg
Coelenterazine Native 天然腔肠素 MX4606-1MG 2×500μg
Coelenterazine Native 天然腔肠素 MX4606-5MG 5mg
Coelenterazine Native 天然腔肠素 MX4606-10MG 10mg

产品描述

腔肠素（Coelenterazine）是在水生生物中发现的一种发光基团（luminophore），是许多荧光素酶的作用底物，包括海肾荧光素酶（Renilla reniformis luciferase, Rluc），分泌型膜锚定荧光素酶（Gaussia luciferase, Gluc）和薮枝虫荧光素酶（Obelia luciferase），和发光蛋白包括水母发光蛋白（Aequorin）的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶，在含分子氧的条件下，氧化腔肠素产生高能量的中间产物，在此过程发射蓝色光，光波长在450~480nm见图1。而甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶（FLuc）系统不同，其在含分子氧的条件下，还需要ATP和Mg2+的存在才能同时发光，光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异，RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究，或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛，包括：1）活细胞或组织的钙离子检测；2）细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子（活性氧，ROS）化学发光检测；3）基因报告基因检测；4）动物活体检测；5）ELISA和生物发光共振能量转移（BRET）用于蛋白相互作用研究；6）药物高通量筛选（HTS）；天然腔肠素（Coelenterazine Native，CTZ-Native）是自然界中存在丰富的一种腔肠素，也是目前应用普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白（APO）的底物，也是海肾荧光素酶（Rluc）和分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度，后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET，细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平（ROS）的化学发光检测等。

产品特性

1）   CAS NO：55779-48-1

2）   化学名：8-benzyl-6-(4-hydroxyphenyl)-2-[(4-hydroxyphenyl)methyl] -7H-imidazo [1,2-a]pyrazin-3-one

3）   同义名：Coelenterazine, nativ; native Coelenterazine; Coelenterazine free base; native-CTZ; 腔肠素游离酸；

4）   分子式：C26H21N3O

5）   分子量：423.46 g/mol

6）   纯度：>95%

7）   外观：黄色至棕黄色结晶性粉末

8）   溶解性：溶于甲醇或乙醇，不要溶于DMSO

9）   化学结构式： Coelenterazine Native 天然腔肠素

 

操作步骤

一、  腔肠素工作液制备

有关腔肠素溶解的注意事项：

1）   腔肠素溶于甲醇或乙醇，不可溶于DMSO。腔肠素的水溶性相对比较低，一般情况需先将腔肠素溶于酸化的醇类溶剂配成相对高浓度的母液，然后再用水溶性缓冲液稀释到需要的工作浓度，现配现用。

2）   腔肠素在溶液中的稳定性比较低，号于正式实验前才配制溶液（包括高浓度母液）。但若实际要求，必须保存母液，目前来说稳定的溶剂是丙二醇，往内加入少量L-抗坏血酸，β-巯基乙醇，DTT，DTE，或少量HCl能维持其还原态。不过，还原剂可能会减低氧化腔肠素（氧化为Coelenteramide）的动力学速率。也有可能破坏荧光素酶活性。而冻存在醇类溶剂中可能引起腔肠素沉淀，实际取决于溶液浓度。当然，可通过加热50-60℃，使得沉淀重新溶解。必须确保无可见沉淀，或在实验前（特别是活体动物实验）离心去沉淀。

1.1    腔肠素母液制备

1.2    腔肠素工作液制备

二、  操作方法

2.1 体外生物发光

2.2 体内动物成像

注意：腔肠素的注射剂量可能根据动物类型、品种、注射方式以及报告基因种类有所差异。加的注射剂量请自行摸索或参考文献来做。

对于海肾荧光素酶报告基因系统，通过腹腔（IP）或静脉注射（IV）按照25-100μg/只小鼠能得到良好结果。对于分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）报告基因系统，由于分泌型膜锚定荧光素酶代谢活性增加，相对来说需要更高量的腔肠素。文献（Tannous BA. Gaussia luciferase reporter assay for monitoring of biological processes in culture and in vivo.Nat Protoc.2009;4(4):582-591.）提到，当用静脉注射（IV）按照4mg/kg体重给药能得到良好结果。

a）根据自身实验室条件选择适当方法麻醉动物，视情况决定是否去皮（通常黑色皮毛动物需去皮）。

b）根据实际情况往动物体内注射相应剂量步骤1.2 配制好的腔肠素工作液。比如，对于海参荧光素酶报告基因系统，使用26-gauge针头注射器尾静脉注射100µl 2 mM (~1mg/ml)腔肠素工作液，然后立即对动物进行体内成像检测，以获得峰值信号。

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重组萤火虫荧光素酶探针染色,61970-00-1

重组萤火虫荧光素酶 探针染色是一种分子量~60kD的蛋白，在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，可以催化萤光素（Luciferin）氧化成氧化荧光素（Oxyluciferin），在此氧化过程中释放出生物萤光（Bioluminescence）。

Firefly Luciferase, Recombinant

重组萤火虫荧光素酶

Firefly Luciferase 萤火虫荧光素酶；Photinus pyralis；报告基因检测；D-luciferin sodium D-荧光素钠盐；ATP生物发光检测；CAS：61970-00-1；

产品信息

产品名称 产品编号 规格
Firefly Luciferase, Recombinant 重组萤火虫荧光素酶 MF4021-1MG 1mg

产品描述

萤火虫萤光素酶（Firefly Luciferase）是一种分子量~60kD的蛋白，在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，可以催化萤光素（Luciferin）氧化成氧化荧光素（Oxyluciferin），在此氧化过程中释放出生物萤光（Bioluminescence）。这一荧光可通过化学发光仪（Luminometer）或液闪测定仪进行测定【见图. 萤火虫荧光素酶的生物发光原理】。

本品是北美萤火虫（Photinus pyralis）来源的荧光素酶基因进行克隆表达得到的重组酶，提供一种可靠且可依赖的工具进行研究或配制ATP或荧光素底物检测用的生物发光检测试剂盒。重组荧光素酶能避免天然纯化荧光素酶可能存在的季节和区域变化。

萤火虫荧光素酶是常用的报告基因之一，用来研究基因调控和功能，以及药物筛选实验。还能用于微量ATP的检测。荧光素酶催化的生物发光反应是基因表达测定灵敏的分析工具之一。

产品特性

1） CAS NO：61970-00-1

2） EC .13.12.7

3） 同义名：Recombinant Firefly Luciferase; Firefly luciferin luciferase; Photinus pyralis luciferase; Luciferase from Photinus pyralis (firefly), Recombinant; Luciferin 4-monooxygenase; 萤光素4-单加氧酶；

4） 分子量：~60kDa

5） 外观：液体（1mg/ml）

6） 检测范围：≤1 femtomole ATP（0.2μg luciferase）

保存与运输方法

保存：-20℃保存，1年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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MF4001-100T Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂 100T
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