细胞线粒体分离试剂盒使用方法

名称:细胞线粒体分离试剂盒

供应商:

产地:国产/进口

规格:50T

储存方式:-20℃保存,一年有效。其中台盼蓝染色液也可以4℃保存,PMSF(晶体)和PMSF(溶剂)在配制成100mM PMSF溶液前可以室温保存。

用途:快速便捷分离动物硬组织(如骨骼肌)中的线粒体的试剂盒,

供货能力:现货 作为实验用品,供研究用,不能直接用于人体。

本试剂盒在分离线粒体的同时可以获得去除线粒体的细胞浆蛋白,可用于研究细胞色素c等线粒体蛋白向胞浆的释放。

本试剂盒提供了蛋白酶抑制剂PMSF,使匀浆时蛋白酶的活性被适当抑制,这样在获得线粒体的同时还可以获得有时有用的去除了大量线粒体的蛋白,在进行蛋白或酶活分析时可以作为对照。

细胞线粒体分离试剂盒使用方法 注意事项

试剂盒中的试剂对于不同的实验目的不必全部使用。

如果不是用于制备线粒体蛋白样品,线粒体分离试剂和线粒体裂解液中不必加入PMSF。PMSF一定要在线粒体分离试剂或线粒体裂解液加入到样品中前2-3分钟内加入,以免PMSF在水溶液中很快失效。

如果用于制备线粒体蛋白样品,线粒体分离试剂和线粒体裂解液中需添加PMSF。PMSF一定要在线粒体分离试剂或线粒体裂解液加入到样品中前2-3分钟内加入,以免PMSF在水溶液中很快失效。

分离线粒体的所有步骤均需在冰上或4℃进行,所用溶液需冰浴或4℃预冷。

通常在分离线粒体时前后两次离心速度选取600g和11,000g,如果希望纯度更高,但对线粒体的得率要求不高,前后两次离心速度可以采用1000g和3500g。

使用本试剂盒中的线粒体储存液稀释或储存的线粒体样品应及时使用,以免线粒体膜电位受影响。如果不能及时使用,建议在-80℃保存。冻存后的线粒体样品不推荐用于膜电位的检测,但可以用线粒体蛋白或核酸的相关检测。

细胞线粒体分离试剂盒使用方法 产品 订购说明

1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。

2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。

3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日*新价格为准。

4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。

5、请办理完货款后,将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、电话等以传真、EMail、短/信、电话等形式通知我们。

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62669-70-9,JC-1 线粒体膜电位荧光探针,Rhodamine 123 罗丹明123

 MX3202 JC-1 线粒体膜电位荧光探针:JC-1 是一种广泛用于检测线粒体膜电△Ψm位的理想荧光探针。JC-1染料以电势依赖性的方式积聚在线粒体内,可以用来检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。

JC-1 线粒体膜电位荧光探针

Rhodamine 123 罗丹明123;JC-1;JC-10;CCCP;CAS:62669-70-9

产品描述

JC-1 是一种广泛用于检测线粒体膜电Ψm位的理想荧光探针。JC-1染料以电势依赖性的方式积聚在线粒体内,可以用来检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。正常线粒体内,JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物,聚合物发出强烈的红色荧光(Ex=585 nm, Em=590 nm);不健康的线粒体由于膜电位的下降或丧失,JC-1只能以单体的形式存在于胞浆中,产生绿色荧光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。JC-1不仅可用于定性检测,因颜色的变化可以非常直接的反映出线粒体膜电位的变化。也可以用于定量检测,因线粒体的去极化程度可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。观察时,只需使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。

JC-1 用于检测细胞的线粒体膜电位时常用的浓度范围为120 µg/ml,对于很多细胞适宜采用的工作浓度为10 µg/ml

产品特性

1)化学名:5,5‘,6,6’-Tetrachloro-1,1‘,3,3’-tetraethylbenzimidazolylcarbocyanine iodide

2)CAS NO3520-43-2 

3)分子式:C25H27Cl4IN4

4)分子量:652.23 g/mol

5)   纯度:95%HPLC

6)   Ex/Em:单体形式(monomer form):Ex=514 nm, Em=529 nm

聚合物形式(J-aggregate form):Ex=585 nm, Em=590 nm

保存与运输方法

保存:-20干燥避光保存。*次使用,建议将储存液分装成单次用量,避免反复冻融,约一年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

  1. JC-1是光敏感性的,所有染色步骤的操作过程中避免强光接触。
  2. JC-1染色完成后,立即进行后续的结果分析非常必要;
  3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法生物资料

1. 染色工作液制备

注意:因JC-1不溶于水,很可能在稀释到工作液的过程中形成聚集颗粒,建议细胞染色前用离心或者过滤的方法去除这些颗粒后再使用。

2. JC-1染色步骤(流式细胞仪)

数据分析:含有红色JC-1聚集物的健康细胞线粒体用FL2通道检测;含有绿色JC-1单体的凋亡或不健康细胞用FL1FITC)通道检测。

3. JC-1染色步骤(荧光显微镜)

4. JC-1染色步骤(荧光酶标仪)

数据分析:健康细胞,JC-1单体聚集形成聚合物,线粒体呈现强烈的红色荧光(激发波长550 nm,发射波长600 nm)。而凋亡或坏死细胞内JC-1以单体形式存在,线粒体呈强烈的绿色荧光(激发波长485 nm, 发射波长535nm)。之后计算红色荧光信号与绿色荧光信号的比值,用来判断细胞健康程度。

订购信息:现货供应。

产品名称 产品编号 规格
JC-1(5 mg/ml in DMSO) 线粒体膜电位荧光探针 MX3202-200UL 1mg
JC-1 (Powder) 线粒体膜电位荧光探针 MX3203-5MG 5mg
JC-1 (Powder) 线粒体膜电位荧光探针 MX3203-50MG 50mg
JC-1线粒体膜电位检测试剂盒 MX3204-100T 100T

MX3202 JC-1 线粒体膜电位荧光探针

MX3202 JC-1 线粒体膜电位荧光探针

 

Janus Green B

Janus Green B 詹纳斯绿B(健那绿)活线粒体染色剂,同义名:健那绿,真那氏绿,双氮嗪绿,是一种与DNA反应的染料,用于组织学研究包括线粒体的活体染色,因线粒体的氧化还原系统能够揭示电子传递链的变化。

Janus Green B

Janus Green B Methyl blue 甲基蓝mitochondrial staining 线粒体染色Wright’s stain 瑞氏染色CAS2869-83-2

 

产品名称 产品编号 CAS NO. 规格
Janus Green B MS4042-1G 2869-83-2 1g
Janus Green B  MS4042-5G 2869-83-2 5g
Janus Green B  MS4042-25G 2869-83-2 25g

 

Janus Green B,CAS NO. 2869-83-2,是一种与DNA反应的染料,用于组织学研究包括线粒体的活体染色,因线粒体的氧化还原系统能够揭示电子传递链的变化。还能有效且快速的对昆虫弦音器官和外周神经进行染色,使得神经呈现深蓝色,与未染色,组织呈鲜明对照。兔淋巴管研究中使用詹纳斯绿B,发现淋巴管内的线状结构(即Bonghan ducts)细胞富含高密度线粒体。

产品特性

  1. CAS NO2869-83-2
  2. 化学名:3-​Diethylamino-​7-​(4-​dimethylaminophenylazo)​-​5-​phenylphenazinium chloride 3-(二乙基氨基)-7- [[4-(二甲基氨基)苯基]偶氮]-5-苯基吩嗪翁氯化物
  3. 同义名:Janus green; Diazin Green S; Union Green B;
  4. 分子式:C30H31ClN6
  5. 分子量:511.06
  6. 纯度:染料含量~85%
  7. 外观:棕色或深棕色或深暗绿色粉末
  8. 溶解性:溶于水(20mg/ml),微溶于醇 

Janus Green B

Janus Green B

4-Di-1-ASP 线粒体荧光探针,用于活细胞的线粒体染色,68971-03-9

4-Di-1-ASP 线粒体荧光探针,英文全名4-(4-(Dimethylamino)styryl)-N-Methylpyridinium iodide,是一种苯乙烯染料,用于活细胞的线粒体染色。

4-(4-(Dimethylamino)styryl)-N-Methylpyridinium iodide (4-Di-1-ASP)

4-Di-1-ASP;DASPEI;Styryl dye 苯乙烯染料;JC-10 线粒体膜电位探针;MitoTracker® Green FM;罗丹明123 Rhodamine 123;CAS NO:68971-03-9;

产品信息

产品名称

产品编号

规格           

4-(4-(Dimethylamino)styryl)-N-Methylpyridinium iodide (4-Di-1-ASP)

线粒体荧光探针

MX4303-500MG

500mg

 

产品描述

4-Di-1-ASP,英文全名4-(4-(Dimethylamino)styryl)-N-Methylpyridinium iodide,是一种苯乙烯染料,用于活细胞的线粒体染色。4-Di-1-ASP具有很大的荧光斯托克斯位移(Stokes shift),用作膜电位探针时被摄取速度相对较慢。4-Di-1-ASP可用于活大脑组织内的神经胶质瘤细胞染色。

产品特性

1)   CAS NO.:68971-03-9

2)   同义名:4-(4-(Dimethylamino)styryl)-N-Methylpyridinium iodide 4-[4-(二甲氨基)苯乙烯基]-N-甲基典化吡啶;

3)   分子式:C16H19IN2

4)   分子量:366.2

5)   Ex/Em:474/606 nm (MeOH)

6)   外观:红色固体

7)   溶解性:溶于DMSO、DMF

8)   化学结构式:4-Di-1-ASP 线粒体荧光探针

 

注意事项

1)   荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

4-Di-1-ASP 线粒体荧光探针

4-Di-1-ASP 线粒体荧光探针

4-Di-2-ASP 线粒体荧光探针,105802-46-8

4-Di-2-ASP 线粒体荧光探针,英文全名4-(4-Diethylaminostyryl)-1-methylpyridinium iodide,是一种阳离子苯乙烯染料,用于线粒体染色。4-Di-2-ASP能用于突触前神经末梢染色,不依赖于神经元活动。
4-(4-Diethylaminostyryl)-1-methylpyridinium iodide (4-Di-2-ASP) 线粒体荧光探针4-Di-2-ASP ;4-Di-1-ASP;DASPEI;Styryl dye 苯乙烯染料;JC-10 线粒体膜电位探针;MitoTracker® Green FM;CAS 05802-46-8;

 

产品名称

产品编号             

规格            

 

4-(4-Diethylaminostyryl)-1-methylpyridinium iodide (4-Di-2-ASP)

线粒体荧光探针

MX4304-500MG

500mg

 

4-Di-2-ASP,英文全名4-(4-Diethylaminostyryl)-1-methylpyridinium iodide,是一种阳离子苯乙烯染料,用于线粒体染色。4-Di-2-ASP能用于突触前神经末梢染色,不依赖于神经元活动。4-Di-2-AS对光稳定且对细胞无毒,能用于兔角膜上皮、大鼠表皮以及小鼠、蛇和青蛙神经肌肉接头处的活神经末梢染色,也能用来观察人脉络膜和整体胃肠道的神经支配。有文献使用4-Di-2-ASP对活动物神经元细胞进行成像。

产品特性

1)   CAS NO.:105802-46-8

2)  同义名:4-(4-Diethylaminostyryl)-1-methylpyridinium iodide; 4-(4-diethylaminostyryl)-N-methylpyridinium iodide; 4-[4-(二乙氨基)苯乙烯基]-1-甲基典化吡啶;4-[4-(二乙氨基)苯乙烯基]-N-甲基典化吡啶;

3)   分子式:C18H23IN2

4)   分子量:394.29

5)   Ex/Em:485/607 nm (MeOH)

6)   溶解性:溶于DMSO、DMF

7)   化学结构式:4-Di-2-ASP 线粒体荧光探针

注意事项

1)   荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4-Di-2-ASP 线粒体荧光探针

4-Di-2-ASP 线粒体荧光探针

TMRE 罗丹明线粒体探针,15532-52-0,测定线粒体膜电位

TMRE 罗丹明线粒体探针:除了选择性标记线粒体外,与JC-1一样,四甲基罗丹明乙酯(Tetramethylrhodamine Ethyl Ester, TMRE)广泛用来测定线粒体膜电位。

Tetramethylrhodamine Ethyl Ester (TMRE)

TMRE 四甲基罗丹明乙酯;4-Di-2-ASP;DASPEI;Styryl dye 苯乙烯染料;MitoTracker® Green FM;CAS 15532-52-0;

 

产品名称

产品编号

规格           

Tetramethylrhodamine Ethyl Ester (TMRE) 四甲基罗丹明乙酯

MX4305-25MG

25mg

 

带正电荷的罗丹明染料(比如罗丹明酯)选择性定位在线粒体,因此,普遍用来标记活细胞线粒体。除了选择性标记线粒体外,与JC-1一样,四甲基罗丹明乙酯(Tetramethylrhodamine Ethyl Ester, TMRE)广泛用来测定线粒体膜电位。TMRE在细胞膜不会形成聚集物,与膜蛋白的相互作用非常小。因此,该染料的跨膜分布与膜电位直接相关。TMRE的光谱特性类似于TRITC,使用起来相当方便。

产品特性

1)   CAS NO.:115532-52-0

2)   化学名:3,6-bis(dimethylamino)-9-[2-(ethoxycarbonyl)phenyl]-xanthylium, perchlorate

3)   同义名:Tetramethylrhodamine ethyl ester perchlorate 四甲基罗丹明乙酯高氯酸盐;TMR ethyl ester TMR乙酯;

4)   分子式:C26H27ClN2O7

5)   分子量:514.95

6)   Ex/Em:549/574nm

7)   纯度:≥95%

8)   溶解性:溶于DMSO

9)   化学结构式:TMRE 罗丹明线粒体探针

注意事项

1)   荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

TMRE 罗丹明线粒体探针

TMRE 罗丹明线粒体探针

JC-1,Powder线粒体膜电位荧光探针

JC-1 (Powder) 线粒体膜电位荧光探针 JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电△Ψm位的理想荧光探针。JC-1染料以电势依赖性的方式积聚在线粒体内,可以用来检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。

JC-1 线粒体膜电位荧光探针

产品标签

Rhodamine 123 罗丹明123;JC-1;JC-10;CCCP;CAS:62669-70-9

产品信息

产品名称 产品编号 CAS NO. 规格
JC-1 (Powder) 线粒体膜电位荧光探针 MX3203-1MG 3520-43-2 1mg  
JC-1 (Powder) 线粒体膜电位荧光探针 MX3203-5MG 3520-43-2 5mg
JC-1 (Powder) 线粒体膜电位荧光探针 MX3203-25MG 3520-43-2 25mg

 

JC-1 是一种广泛用于检测线粒体膜电Ψm位的理想荧光探针。JC-1染料以电势依赖性的方式积聚在线粒体内,可以用来检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。正常线粒体内,JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物,聚合物发出强烈的红色荧光(Ex=585 nm, Em=590 nm);不健康的线粒体由于膜电位的下降或丧失,JC-1只能以单体的形式存在于胞浆中,产生绿色荧光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。JC-1不仅可用于定性检测,因颜色的变化可以非常直接的反映出线粒体膜电位的变化。也可以用于定量检测,因线粒体的去极化程度可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。观察时,只需使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。

本品以冻干粉形式提供,CAS NO. 3520-43-2 ,细胞培养级。用于检测细胞的线粒体膜电位时常用的浓度范围为1~20 µg/ml,对于很多细胞适宜采用的工作浓度为10 µg/ml。

产品特性

1) CAS NO:3520-43-2 

2) 化学名:5,5‘,6,6’-Tetrachloro-1,1‘,3,3’-tetraethylbenzimidazolylcarbocyanine iodide

3) 分子式:C25H27Cl4IN4

4) 分子量:652.23 g/mol

5) 纯度:>95%(HPLC)

6) 外观:红褐色粉末

7) 溶解性:溶于DMSO、DMF,几乎不溶于水

8) Ex/Em:单体形式(monomer form):Ex=514 nm, Em=529 nm;

聚合物形式(J-aggregate form):Ex=585 nm, Em=590 nm;

注意事项

  • JC-1是光敏感性的,所有染色步骤的操作过程中避免强光接触。
  • JC-1染色完成后,立即进行后续的结果分析非常必要;

3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1. 染色工作液制备

1) JC-1储存液制备:将JC-1粉末室温回温20min左右,直接加1ml 无水DMSO到5mg粉末,颠倒混匀

使其充分溶解后,即得到5mg/ml的储存液。溶液单次用量分装存于-20,避光干燥且避免反复冻融。

  • JC-1工作液制备:将冻存的储存液置于室温充分融化,之后用缓冲液或者预热的培养基直接稀释储存液(5 mg/ml)到需要的工作浓度,边震荡边稀释,充分混匀。为了去除任何不溶颗粒,建议13,000 x g离心工作液1 min,小心吸取上清转移到新的管子内。整个过程要避光操作。

注意】:因JC-1不溶于水,很可能在稀释到工作液的过程中形成聚集颗粒,建议细胞染色前用离心或者过滤的方法去除这些颗粒后再使用。

  • JC-1染色步骤(流式细胞仪)

数据分析:

含有红色JC-1聚集物的健康细胞线粒体用FL2通道检测;含有绿色JC-1单体的凋亡或不健康细胞用FL1(FITC)通道检测。

  • JC-1染色步骤(荧光显微镜)

A. 悬浮细胞

B. 贴壁细胞

  • JC-1染色步骤(荧光酶标仪)

1) -7)同上JC-1染色步骤(流式细胞仪);

8) 用0.3 ml缓冲液重悬细胞;然后按照每孔0.1 ml的量将染色好的细胞转移到黑色的96孔板内,即可进行荧光酶标板分析。【注意】:马上进行荧光显微分析,此细节重要。

数据分析:

健康细胞,JC-1单体聚集形成聚合物,线粒体呈现强烈的红色荧光(激发波长550 nm,发射波长600 nm)。而凋亡或坏死细胞内JC-1以单体形式存在,线粒体呈强烈的绿色荧光(激发波长485 nm, 发射波长535nm)。之后计算红色荧光信号与绿色荧光信号的比值,用来判断细胞健康程度。

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产品编号 产品名称 规格
MX3203-1MG JC-1 (Powder) 线粒体膜电位荧光探针(粉末) 1mg
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JC-1 (Powder) 线粒体膜电位荧光探针

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