线性化聚乙烯亚胺转染试剂,26913-06-4,9002-98-6

线性化聚乙烯亚胺转染试剂 本品是PEI 25K的无菌溶液,浓度为1mg/ml,直接使用即可。按照DNA:PEI25K=1:3的比例来操作,1ml本品足以用来转染330μg DNA,或者,6孔板内约做80-160次转染。)

PEI 25K Transfection Reagent

线性化聚乙烯亚胺转染试剂

PEI 25K; PEI 25000; PEI 40K; 线性化聚乙烯亚胺PEI;PEI转染试剂;PEI 25000;CAS9002-98-6, 26913-06-4;Polysciences;

产品信息

产品名称 产品编号 规格  
PEI 25K Transfection Reagent 线性化聚乙烯亚胺转染试剂 MX2204-1ML 1ml
PEI 25K Transfection Reagent 线性化聚乙烯亚胺转染试剂 MX2204-10ML 10ml
PEI 25K Transfection Reagent 线性化聚乙烯亚胺转染试剂 MX2204-50ML 50ml

产品描述

线性化聚乙烯亚胺PEI 25,000,一种高电荷阳离子聚合物,非常容易结合于高电荷阴离子基质。工业应用上,线性化PEI可改善负电荷染料的物理外观,以调整染料的化学特性和增强染料与固相基质的黏附能力,常用作黏附增强剂,作用同多聚赖氨酸(poly-lysine);科研应用上,线性化PEI能与DNA或其他负电荷生物大分子简单结合,正是这一特性,使得成为一种非常行之有效的载体运输介质(Vector carrier),即转染试剂。

本品是PEI 25K无菌溶液,浓度为1mg/ml,直接使用即可。按照DNAPEI25K=1:3的比例来操作,1ml本品足以用来转染330μg DNA,或者,6孔板内约做80-160次转染。

注意事项

1)收到本品或一次使用,请根据单次用量分装后置于-20℃冻存,尽量降低反复冻融次数。

2)本品为无菌溶液,请操作过程中执行无菌操作。

3)请务必使用高质量的无内毒素质粒。通过260 nm光吸收测定DNA 浓度,260nm / 280nm比值确定 DNA 纯度(比值应该在1.8~2.0的范围之内)。如有可能,请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。

4)使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、真菌或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞,请在转染前至少传代两次。

5)对于某些类型的细胞如 HEK-293、HEK293T、NIH/3T3 和 COS 细胞,在转染前两天铺板可显著提高重组蛋白的表达水平。如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞的汇合度仍为60-80%。

【注意】:以上步骤可通过调整PEI 25K-DNA复合物在无血清培养基内的体积(为培养总体积的10%)来进行放大或缩小(可参考表2)。

 

线性化聚乙烯亚胺转染试剂

线性化聚乙烯亚胺转染试剂

线性化聚乙烯亚胺PEI 25000,9002-98-6

 线性化聚乙烯亚胺PEI 25000,一种高电荷阳离子聚合物,非常容易结合于高电荷阴离子基质。工业应用上,线性化PEI可改善负电荷染料的物理外观,以调整染料的化学特性和增强染料与固相基质的黏附能力,常用作黏附增强剂,作用同多聚赖氨酸(poly-lysine);

Polyethylenimine Linear, MW 25000 (PEI 25K)

线性化聚乙烯亚胺PEI 25000

 

PEI 25K; PEI 25000; PEI 40K; 线性化聚乙烯亚胺PEI;PEI转染试剂;PEI 25000;CAS9002-98-6, 26913-06-4;Polysciences;

产品名称 产品编号 规格  
Polyethylenimine Linear, MW 25000 (PEI 25K) 线性化聚乙烯亚胺PEI 25000 MX2202-250MG 250mg  
Polyethylenimine Linear, MW 25000 (PEI 25K) 线性化聚乙烯亚胺PEI 25000 MX2202-1G 1g
Polyethylenimine Linear, MW 25000 (PEI 25K) 线性化聚乙烯亚胺PEI 25000 MX2202-2G 2g
Polyethylenimine Linear, MW 25000 (PEI 25K) 线性化聚乙烯亚胺PEI 25000 MX2202-5G 5g

产品描述

线性化聚乙烯亚胺PEI 25,000,一种高电荷阳离子聚合物,非常容易结合于高电荷阴离子基质。工业应用上,线性化PEI可改善负电荷染料的物理外观,以调整染料的化学特性和增强染料与固相基质的黏附能力,常用作黏附增强剂,作用同多聚赖氨酸(poly-lysine);科研应用上,线性化PEI能与DNA或其他负电荷生物大分子简单结合,正是这一特性,使得成为一种非常行之有效的载体运输介质(Vector carrier),即转染试剂。

线性化聚乙烯亚胺PEI 25000Polyethylenimine Linear, MW 25000)是一款优等、低成本、值得信赖的瞬时性转染试剂。在HEK293和CHO表达系统中,PEI在宽广的生产规模内(从96孔板到100L生物反应器)能提供连续性的高基因表达。

产品特性

1)CAS NO.9002-98-6, 26913-06-4

2)分子量:25,000

3)外观:白色至黄色固体

4)溶解性:溶于热水、冷水(低pH),甲醇和乙醇;不溶于苯、二乙醚、丙酮

1)于1L玻璃烧杯,将1g PEI 25K分加入900ml Milli-Q®超纯水或其他相当级别的生物用水

2)将磁性转子放入烧杯内,打开搅拌模式使产生小型漩涡。边搅拌边逐滴加入盐酸(12M)调节pH,直至pH<2.0。

3)盖住烧杯口,持续搅拌直至粉末完全溶解(溶解时间高达3h)。整个过程pH<2.0。【注意】:可能会存在一些小纤维状颗粒不能溶解,这是正常现象。

4)边搅拌边逐滴加入NaOH(10M)调节pH,直至到6.9-7.1。

5)将溶液转入量筒内,加入水定容到1L,用一次性0.1-0.2µm PES真空过滤器过滤除菌,即得到1mg/ml的储存液。

6)根据单次用量将储存液分装,保存在-20℃,高达1年稳定。储存液再次融化后,可置于4℃保存,高达2周稳定,但绝不可重新冻存。

注意事项

1)对于本品的转染方法,可参考我司提供的PEI 25K Transfection Reagent 线性化聚乙烯亚胺转染试剂

(货号:MX2204-1ML),或参考以下几篇文献:

Durocher, Y., Perret, S. & Kamen, A. High-level and high-throughput recombinant protein production by transient transfection of suspension-growing human 293-EBNA1 cells. Nucleic acids research 30, E9 (2002).

 Thomas M, Lu JJ, Ge Q, Zhang C, Chen J, Klibanov AM. (2005). Full deacylation of polyethylenimine dramatically boosts its gene delivery efficiency and specificity to mouse lung. Proc Natl Acad Sci U S A. 102(16):5679-84.

 Wulhfard, S., Baldi, L., Hacker, D. L. & Wurm, F. Valproic acid enhances recombinant mRNA and protein levels in transiently transfected Chinese hamster ovary cells. Journal of Biotechnology 148, 128–132 (2010).

 Baranyi, L. et al. Rapid Generation of Stable Cell Lines Expressing High Levels of Erythropoietin, Factor VIII, and an Antihuman CD20 Antibody Using Lentiviral Vectors. Human Gene Therapy Methods 24, 214–227 (2013).

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

PEI25K客户使用案例(逐步增加中)

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订购信息:

品牌 货号 名称 规格 *(元)
Polysciences 23966-2 线性聚乙烯亚胺(MW 25000 2g 咨询
另,提供更高转化效率的PEI Max 40000,自由基形式分子量相当于PEI 25000,研究证实其体外质粒DNA转染效率提高达21倍。
Polysciences 24765-2 线性聚乙烯亚胺盐酸盐Max,(MW 40000 (Equivalent to Mw 25,000 in Free Base Form) 2g 咨询

使用方法 

1. Pour ~450 mL of Milli-Q H2O into a 500-mL glass beaker. 往500ml玻璃烧杯内导入去离子水450ml;

2. Add 500 mg of PEI to the beaker with stirring. 加入500mg PEI到烧杯内并搅拌;

3. Add concentrated HCl drop-wise to the solution to pH <2.0. 逐滴加入浓盐酸直至溶液pH小于2.0;

4. Stir until the PEI is dissolved (~2-3 h). Maintain the pH <2.0 throughout. 保持搅拌直至PEI完全溶解(约需2-3小时)。整个溶解过程维持pH小于2.0。

Approximay 800 μL of 12 M HCl will be required for full PEI dissolution. There may still be some small fiber particles that will not dissolve. 约需加入800 μL 12M HCl才能让PEI完全溶解。可能会有一些小量的纤维状颗粒不能完全溶解。

5. Add concentrated NaOH drop-wise to the solution to pH 7.0. 逐滴加入浓NaOH调节溶液pH到7.0。

Approximay 500 μL of 10 M NaOH will be required to neutralize the PEI solution. 约需500 μL 10M NaOH来中和PEI溶液。

6. Pour the solution into a 500-mL glass cylinder. Adjust the final volume to 500 mL with Milli-Q H2O. 将溶液倒入500ml玻璃烧杯内,用去离子水定容体积到500ml。

7. Filter-sterilize the solution through a 0.22-μm membrane. 用0.22μm 滤膜过滤除菌溶液。

8. Store aliquots of the desired volume at -20°C. 根据所需体积分装溶液并保存在-20℃。

线性化聚乙烯亚胺 PEI 25000 细胞转染试剂

线性化聚乙烯亚胺 PEI 25000 细胞转染试剂