Mag-Fluo-4 AM, Cell 镁离子荧光探针 ,具细胞膜渗透性的Mag-Fluo-4 AM是Fluo-4 AM(货号:MX4504-50UG)的一种结构类似物,对镁离子(Mg2+)和钙离子(Ca2+)的Kd值分别是4.7mM和22µM,是一种非常有用的细胞内镁离子指示剂和低亲和性钙离子指示剂。
Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant 镁离子荧光探针
Mag-Fluo-4 AM;Mg2+ Indicator 镁离子指示剂(荧光探针);Fluo-4 AM;Low-affinity Ca2+ indicator 低亲和钙离子指示探针;Magnesium Green Indicator;
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
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Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant 镁离子荧光探针 |
MX4544-100UG |
2×50μg |
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Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant 镁离子荧光探针 |
MX4544-500UG |
10×50μg |
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具细胞膜渗透性的Mag-Fluo-4 AM是Fluo-4 AM(货号:MX4504-50UG)的一种结构类似物,对镁离子(Mg2+)和钙离子(Ca2+)的Kd值分别是4.7mM和22µM,是一种非常有用的细胞内镁离子指示剂和低亲和性钙离子指示剂。
产品优势
1)镁离子指示探针
Mag-Fluo-4与Thermo(invitrogen)公司的Magnesium Green indicator相比,具更加灵敏的Mg2+荧光反应。由于细胞内Mg2+的生理波动幅度通常很小,这一点点灵敏度的提高都是值得考虑的优势。与Fluo-4一样,Mag-Fluo-4在不含二价阳离子的情况下基本无荧光,一旦与Mg2+结合后,呈明显的荧光加强,但无光谱迁移(见下图)。
图. Mag-Fluo-4在0-50mM Mg2+溶液内的荧光发射光谱
2)钙离子指示探针
Mag-Fluo-4是Fluo-4的类似物,具有更低钙离子结合亲和性,特别适合用于检测1 µM~1 mM范围内的胞内钙离子水平。
产品特性
1) 同义名:Mag-Fluo-4 acetoxymethyl ester, cell permeant
2) 分子式:C37H33F2NO18
3) 分子量:817.65 g/mol
4) 外观:橙色固体
5) 纯度:≥90%
6) Ex/Em:494/516 nm
7) 溶解性:溶于DMSO
8) 化学结构式:
注意事项
1) 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 储存液制备
取一管低温保存的Mag-Fluo-4 AM,置于室温回温至少20min。之后加入高质量无水DMSO配制成1~5mM储存液,比如50μg Mag-Fluo-4 AM(Mw:817.65 g/mol)溶于12μl DMSO,充分溶解后,即得到5mM储存液。【注意】未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融,且要避光保存。尽快使用完。
2. 操作步骤
【注意】以下使用方法仅作参考,需根据具体的细胞类型和实验要求做出调整。
应用示例(来自文献,仅用作参考)
文献一、Zheng JM et al. MagT1 regulated the odontogenic differentiation of BMMSCs induced byTGC-CM via ERK signaling pathway. Stem Cell Res Ther. 2019 Jan 31;10(1):48.
使用方法(细胞内镁离子水平的流式检测):1)用生理培养液(120 mM NaCl, 20 mM HEPES, 4.7 mM KCl, 1.2 mM KH2PO4, 1.2 mM MgSO4, 1.25 mM CaCl2, and 10 mM glucose)于37℃预孵育BMMSCs细胞10min使其达到离子梯度的稳定和平衡;2)用DMSO配制Mag-Fluo-4-AM储存液1mM;3)取4ul Mag-Fluo-4-AM储存液(1mM)和5ul 20% F-127,加入1ml培养基内,充分混匀;4)取0.25ml 分散液加入0.75ml含细胞培养液,使得探针终浓度为1uM;继续孵育30min,之后清洗细胞3次,之后再孵育30min保证细胞内AM基团的完全去酯化;5)之后用流式细胞仪分析荧光强度(Ex/em:480/520nm)。
Fig 1. MagT1 knockdown reduced intracellular Mg2+ level in BMMSCs. Intracellular Mg2+ level was significantly reduced in MagT1 knockdown BMMSCs measured by indicator Mag-Fluo-4-AM using flow cytometry.
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