Y2HGold Yeast Strain

Y2HGold Yeast Strain 酵母甘油菌 克隆与表达分析是GAL4系统酵母双杂交用实验菌株,能直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过接合(mating)操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。

Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌

产品标签

Matchmarker GAL4双杂交系统;Y2HGoldpGBKT7Y187pGADT7AUR1-CAureobasidin A AbA);金担子素;

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格(元)
Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 MF2351-300UL 300μl 750

产品描述

Y2HGoldGAL4系统酵母双杂交用实验菌株,能直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过接合(mating)操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。Y2HGold-GAL4酵母双杂交系统需要两种质粒配套使用,分别为pGBKT7pGADT7。前者筛选标志为Trp,用于表达DNA-BD与诱饵蛋白(bait)的融合蛋白;后者筛选标志为Leu,用于表达AD与诱捕蛋白(prey)的融合蛋白。Y2HGold有四个报告基因:AUR1-CHIS3, ADE2, MEL1,分别由三个完全异源的Gal4反应启动元件-G1G2M1调控,这三种启动子只有GAL4识别的17bp核心区相同,其余部分都不同。这一特征有效缩减假阳性发生的概率。因为,任何诱捕蛋白单独结合引起假阳性都需要识别3个不同序列,激活4个报告基因表达。另外,新报告基因AUR1-C与以往的营养缺陷报告基因相比,其筛选抗生素金担子素(Aureobasidin AAbA)可以有效杀死非抗性克隆,大大降低背景克隆的生长。具有更低背景,这一优势也可降低酵母双杂交假阳性发生的概率。

基因型

MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4Δ, gal80Δ, LYS2::GAL1UASGal1TATAHis3, GAL2UASGal2TATAAde2 URA3::MEL1UASMel1TATA AUR1-C MEL1

基本信息

培养基:YPDA

培养条件:28℃,YPDA,有氧培养

保存方式:30%甘油,-20保存

转化方式:PEG/LiAC;电激;

基本应用:酵母双杂交实验

使用说明

生物提供的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品三个月内通知我司。收到甘油菌后,请及时在固体平板上划线培养,挑取单菌落接种到液体培养基中,震荡培养后使用并保存新的甘油菌。

相关产品

货号

名称

规格

MF2351-300UL Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 300μl
MF2352-1000UL Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2353-300UL Y187 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 300μl
MF2354-1000UL Y187 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2355-300UL AH109 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 300μl
MF2356-1000UL AH109 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2501-200T Yeast Transformation Kit 酵母转化试剂盒 200T
MS6303-350G YPDA Agar Medium YPDA琼脂培养基 350g
MS6304-250G YPDA Medium YPDA液体培养基 250g

 Y2HGold Yeast Strain 酵母甘油菌 克隆与表达分析

Y2HGold Yeast Strain 酵母甘油菌 克隆与表达分析

酵母双杂交用甘油菌 克隆与表达分析

AH109 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 克隆与表达分析,AH109是GAL4系统酵母双杂交用实验菌株,来源于PJ69-2A酵母菌株,引入lacZ报告基因从而产生AH109。AH109是MATa型,能直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过接合(mating)操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。

AH109 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌

Matchmarker GAL4双杂交系统;Y2HGoldpGBKT7Y187pGADT7AUR1-CAureobasidin A AbA);金担子素;

产品名称 产品编号 规格
AH109 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 MF2355-300UL 300μl

AH109GAL4系统酵母双杂交用实验菌株,来源于PJ69-2A酵母菌株,引入lacZ报告基因从而产生AH109

AH109MATa型,能直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过接合(mating)操作进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。AH109-GAL4酵母双杂交系统需要两种质粒配套使用,分别为pGBKT7pGADT7。前者筛选标志为Trp,用于表达DNA-BD与诱饵蛋白(bait)的融合蛋白;后者筛选标志为Leu,用于表达AD与诱捕蛋白(prey)的融合蛋白。AH109有四个报告基因:lacZHIS3, ADE2, MEL1,分别由三个完全异源的Gal4反应启动元件-G1G2M1调控,这三种启动子只有GAL4识别的17bp核心区相同,其余部分都不同。这一特征有效缩减假阳性发生的概率。因为,任何诱捕蛋白单独结合引起假阳性都需要识别3个不同序列,激活4个报告基因表达。

MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4Δ, gal80Δ, LYS2::GAL1UASGal1TATAHis3, MEL1GAL2UASGal2TATAAde2, URA3::MEL1UASMEL1TATA- lacZ

基本信息

培养基:YPDA

培养条件:28YPDA,有氧培养

保存方式:30%甘油,-20保存

转化方式:PEG/LiAC;电转;

基本应用:酵母双杂交实验

使用说明

生物提供的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品三个月内通知我司。收到甘油菌后,请及时在固体平板上划线培养,挑取单菌落接种到液体培养基中,震荡培养后使用并保存新的甘油菌。

注意事项

1/使用甘油菌时可不完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可;也可完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,菌株的活力会逐渐下降。

2/为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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货号

名称

规格

MF2351-300UL Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 300μl
MF2352-1000UL Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2353-300UL Y187 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 300μl
MF2354-1000UL Y187 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2355-300UL AH109 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 300μl
MF2356-1000UL AH109 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 10×100μl
MF2501-200T Yeast Transformation Kit 酵母转化试剂盒 200T
MS6303-350G YPDA Agar Medium YPDA琼脂培养基 350g
MS6304-250G YPDA Medium YPDA液体培养基 250g

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EGY48酵母化学感受态细胞

EGY48酵母化学感受态细胞是LexA系统酵母双杂交用实验菌株,MATα型,能直接转化质粒进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。转化标记为ura3,his3,trp1。报告基因为LEU2。EGY48-LexA酵母双杂交系统需要三种质粒配套使用,分别为pLexA、pB42AD和p8op-LacZ。

EGY48 Chemically Competent Cell

酵母菌化学感受态细胞

产品标签

LexA双杂交系统;EGY48Y2HGoldpGBKT7pLexAAureobasidin A AbA);金担子素;

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格(元)
EGY48 Chemically Competent Cell

酵母菌化学感受态细胞

MF2358-1000UL 10×100μl 290
MF2358-5000UL 50×100μl 1320

产品包装

组分编号 组分名称 保存

货号(规格)

MF2358-1000UL MF2358-5000UL
MF2358-A EGY48 Chemically Competent Cell -80 10×100μl 50×100μl
MF2358-B pGBKT7 Control Vector (10ng/μl) -80 10μl   10μl  
MF2358-C Carrier DNA (10μg/μl) -20 100μl  500μl 
MF2358-D PEG/LiAC Solution +4 5ml 25ml

产品描述

酵母双杂交系统是用于体内研究蛋白相互作用的一种非常便利的工具,目前采用的有LexA系统和GAL4系统。在LexA系统中,DNA结合域(DNA- BD)由一个完整的原核蛋白LexA构成,转录激活域(AD)由一个大肠杆菌来源的含88个氨基酸残基的酸性肽B42构成),在酵母中能活化基因的转录。正常情况,BDAD不会结合,将待检测的蛋白质分别与BDAD融合,形成诱饵融合蛋白(bait-DNA)和诱捕融合蛋白(prey-DNA),只有当诱饵和诱捕蛋白发生相互作用,促使BDAD的相互接近,才能激活报告基因的转录。

EGY48LexA系统酵母双杂交用实验菌株,MATα型,能直接转化质粒进行蛋白相互作用验证或双杂交文库筛选和构建。转化标记为ura3his3trp1。报告基因为LEU2EGY48-LexA酵母双杂交系统需要三种质粒配套使用,分别为pLexApB42ADp8op-LacZ。质粒pLexA的筛选标志为HIS3,用于表达诱饵融合蛋白。pB42AD的筛选标志为TRP1,用于表达诱捕融合蛋白。报告质粒p8op-LacZ的筛选标志为URA3,报告基因为LacZ,报告基因UAS来源于LexA op (x6),只有当诱饵(Bait)和诱捕(Prey)相互作用才能启动LacZ表达。

本品为经特殊工艺制备的EGY48酵母菌化学感受态细胞,用pGBKT7质粒检测转化效率>104cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存三个月。

基因型

MATα, ura3, his3, trp1, LexAop (x6)-LEU2

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

  1. 100 µl冰上融化的EGY48化学感受态细胞,依次加入预冷的目的质粒2-5 µgCarrier DNA 95-100 孵育5 min,快速冰浴。重复一次。)10 µlPEG/LiAc 500µl,用枪吹打几次充分混匀,30水浴30 min(在15min时翻转6-8次混匀)。
  2. 之后将管子放42水浴15 min(在7.5min时翻转6-8次混匀)。
  3. 5000 rpm离心40s弃上清,用400 µl ddH2O重悬沉淀,离心30s弃上清。
  4. 50 µl ddH2O重悬,涂板,放入29培养48-96 h

 

EGY48酵母化学感受态细胞

EGY48酵母化学感受态细胞

pGADT7-T Vector 酵母双杂交对照载体

pGADT7-T Vector 酵母双杂交对照载体 pGADT7-T是阳性对照质粒,能编码SV40大T抗原(a.a. 87-708)和GAL4 AD(a.a. 768-881)的融合蛋白。SV40大T抗原cDNA来源于Li&Fields(1993)年文献提到的质粒,克隆到pGADT7载体(由Clontech改造所得)。
pGADT7-T Vector 酵母双杂交对照载体

pGBKT7-53 Vector;pGADT7-T;pGBKT7-Lam;SD/-Trp;Clontech;Yeast two-hybrid (Y2H) 酵母双杂交;

货号 产品名称 规格  
MF3605-2UG pGADT7-T Vector 酵母双杂交对照载体 2μg  

基本信息

载体类型 酵母双杂交系统载体
载体大小: 10kb
原核抗性: 氨苄青霉素(Ampicillin, Amp
克隆菌株: DH5α
载体标签 HA
筛选标记 LEU2
启动子: ADH1
表达宿主 酵母细胞
5′ 测序引物: T7: TAATACGACTCACTATAGGG
3′ 测序引物: 根据序列设计引物

描述:pGADT7-T是阳性对照质粒,能编码SV40大T抗原(a.a. 87-708)和GAL4 AD(a.a. 768-881)的融合蛋白。SV40大T抗原cDNA来源于Li&Fields(1993)年文献提到的质粒,克隆到pGADT7载体(由Clontech改造所得)

保存与运输方法

保存:-20℃保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1) 我司提供的载体/质粒/菌株都经过严格的质量控制。请收到货后先进行转化,再挑取单克隆扩增。产品使用中若遇到质量问题,请和我司及时沟通。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

pGADT7 AD Vector 酵母双杂交克隆载体

pGADT7 AD Vector 酵母双杂交克隆载体 pGADT7 AD是一种酵母双杂交表达载体,特别设计用来表达介于GAL4 AD(a.a. 768-881)和目的蛋白之间的融合蛋白。

pGADT7 AD Vector 酵母双杂交克隆载体

pGADT7 AD ; pGBKT7 VectorpGADT7-TpGBKT7-LamSD/-TrpClontech;Yeast two-hybrid (Y2H) 酵母双杂交;

货号 产品名称 规格  
MF3604-2UG pGADT7 AD Vector 酵母双杂交克隆载体 2μg  
载体类型 酵母双杂交系统载体
载体大小: 7987bp
原核抗性: 氨苄青霉素(Ampicillin, Amp
克隆菌株: DH5α
载体标签 HA
筛选标记 LEU2
启动子: ADH1
复制子:
表达宿主 酵母细胞
5′ 测序引物: T7: TAATACGACTCACTATAGGG
3′ 测序引物: 根据序列设计引物


描述:
pGADT7 AD一种酵母双杂交表达载体,特别设计用来表达介于GAL4 AD(a.a. 768-881)和目的蛋白之间的融合蛋白。在ADH1全长启动子的驱动下高水平表达融合蛋白。融合蛋白含一个HA表位标签。为了便于体外转录/翻译,在GAL4 AD和HA表位标签之间又引入T7启动子。

注意事项

1) 我司提供的载体/质粒/菌株都经过严格的质量控制。请收到货后先进行转化,再挑取单克隆扩增。产品使用中若遇到质量问题,请和我司及时沟通。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。