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Thermo Fisher ROS,单线态氧活性氧探针SOSG

单线态氧活性氧探针SOSG：Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG高度选择性结合单线态氧（1O2）。不像其他的荧光和化学发光的单线态氧检测试剂，SOSG与其他活性氧物质（ROS），包括羟基自由基（·OH）、超氧阴离子（·O2–）和一氧化氮（NO）无可见反应。

单线态氧荧光探针 Singlet Oxygen Sensor Green（SOSG）

Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG；单线态氧（Singlet Oxygen , 1O2）；单线态氧荧光探针；S36002；Thermo Fisher; ROS（Reactive oxygen species）活性氧物质；

活性氧引起的许多生理损伤都可能归因于单线态氧（1O2），包括与脱氧鸟苷选择性反应形成8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）的核酸修饰。Thermo fisher（molecular probe）公司开发的Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG是目前商业化可得且应用广泛的单线态氧荧光探针，从材料学到药物学领域，比如光动力学疗法。

特异性强Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG高度选择性结合单线态氧（1O2）。不像其他的荧光和化学发光的单线态氧检测试剂，SOSG与其他活性氧物质（ROS），包括羟基自由基（·OH）、超氧阴离子（·O2–）和一氧化氮（NO）无可见反应见图1。

单线态氧活性氧探针SOSG

图1、Singlet Oxygen Sensor Green (SOSG)的荧光反应和对单线态氧（1O2）的特异性。A）用荧光光度计（Ex/Em=488/525nm）测定溶液内的荧光，溶液内含SOSG（1 µM ）和亚甲基蓝（10 µM）溶于100mM pH 7.5 Tris Buffer; 单线态氧清除剂叠氮钠（NaN3，1 mM）；或50% D2O（重水，能够延长1O2的寿命）。每20s完成一次荧光测定，每次测定间隔30s（如灰条标示）。在这30s的间隔中，样本暴露于激光辐射（630–680 nm，<5 mW），导致亚甲基蓝光敏生成1O2。B）用荧光光度计（Ex/Em=488/525nm）测定溶液内的荧光，溶液为50mM pH 7 Tris buffer，1mM ，SOSG（1 µM ），或含SOSG（1 µM ）。产生尿酸和超氧化物。超氧化物瞬间被H2O2降解。

荧光特征Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG与单线态氧（1O2）反应前，探针初发弱蓝色荧光，激发峰在372nm和393nm，发射峰在395nm和416nm。当含单线态氧（1O2），探针发射绿色荧光，光谱特征类似于荧光素（大激发/发射波长约504/525nm）。

线性化关系研究发现Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG的荧光产物在某些溶液中随着时间被降解，且在不含单线态氧的碱性pH溶液中，Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG会发荧光。不过，当进行适当的操作，绿色荧光信号的强度与单线态氧（1O2）含量相关，且不会受其他ROS的明显干扰。

应用Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG证实能用来检测溶液和植物组织中的单线态氧（1O2）。

使用方法单线态氧活性氧探针SOSG

  1. SOSG储存液制备：收到货按照≤-20℃避光干燥保存。用甲醇来制备储存液，每100µg粉末加入33µl甲醇制备~5mM储存液。正式实验前制备工作液，不能用完的工作液需丢弃，不可保存后再用。
  2. 溶液检测：SOSG不具细胞膜渗透性，设计用来检测溶液环境内的单线态氧。加的稀释缓冲液和工作浓度需根据经验来调整。建议起始工作浓度为1-10µM。

争议点单线态氧活性氧探针SOSG

Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG不具有细胞膜渗透性，能用于细胞单线态氧（1O2）检测？整理专丽持有方thermo（molecular probe）官芳说明此探针不具有细胞膜渗透性，适用于溶液体系单线态氧（1O2）检测。然而，Gollmer A et al.报道SOSG能插入活哺乳动物细胞（文献来源：Gollmer A et al. Singlet Oxygen Sensor Green®: photochemical behavior in solution and in a mammalian cell. Photochem Photobiol. 2011 May-Jun;87(3):671-9.）。

订购信息：Thermo fisher原装正品

品牌 货号 名称 规格
Thermo fisher

（Invitrogen）

 S36002 Singlet Oxygen Sensor Green 单线态氧荧光探针 100μg

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货号 名称 规格
MX4801-1KIT Reactive Oxygen Species (ROS) Assay Kit

活性氧（ROS）检测试剂盒

 100~500T
MX4804-1MG Aminophenyl fluorescein (APF) 氨基苯基荧光素 1mg
MX4805-1MG Hydroxyphenyl fluorescein (HPF) 羟苯基荧光素 1mg
MX4802-50MG H2DCFDA (DCFH-DA, DCFH) 活性氧（ROS）荧光探针 50mg
M36008（Invitrogen） MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator 50 µg