鸡免疫球蛋白G(IgG)ELISA检测试剂盒

鸡免疫球蛋白G(IgG)ELISA检测试剂盒

产品名称:鸡免疫球蛋白G(IgG)ELISA检测试剂盒
供应商:上海
产品规格:96T/48T
运输条件:2-8℃低温运输,用干冰或者冰袋低温运输
产品用途:用于测定人血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性。
检测种属:大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭elisa试剂盒等种属。鸡免疫球蛋白G(IgG)ELISA检测试剂盒  特点:
1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。
3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。
4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察,又可用显微镜观察,也可以用分光光度计进行比色测定,还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变,从而引起被检测物的显示。
5.可以定量测定。溶液中的抗原物质,应用酶免吸附技术进行比色测定,依据光密度值的变化,可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。
6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测,免疫酶技术都能在较短时间内完成。
7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说,不需要荧光显微镜,也不需要测定放射性的特殊仪器,所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂,普通实验室及生产应用单位均易购置.

样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

注意事项
1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

操作步骤:
1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50?l。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40?l,然后再加待测样品 10?l。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂 50?l,空白孔除外。
7.温育:操作同 3。
8.洗涤:操作同 5。
9.显色:每孔先加入显色剂 A50?l,再加入显色剂 B50?l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10.终止:每孔加终止液 50?l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。

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产品名称:鸡免疫球蛋白E(IgE)ELISA检测试剂盒
供应商:上海
产品规格:96T/48T
运输条件:2-8℃低温运输,用干冰或者冰袋低温运输
产品用途:用于测定人血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性。
检测种属:大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭elisa试剂盒等种属。

 

鸡免疫球蛋白E(IgE)ELISA检测试剂盒  特点:
1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。
3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。
4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察,又可用显微镜观察,也可以用分光光度计进行比色测定,还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变,从而引起被检测物的显示。
5.可以定量测定。溶液中的抗原物质,应用酶免吸附技术进行比色测定,依据光密度值的变化,可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。
6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测,免疫酶技术都能在较短时间内完成。
7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说,不需要荧光显微镜,也不需要测定放射性的特殊仪器,所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂,普通实验室及生产应用单位均易购置.

样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

注意事项
1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

操作步骤:
1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50?l。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40?l,然后再加待测样品 10?l。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂 50?l,空白孔除外。
7.温育:操作同 3。
8.洗涤:操作同 5。
9.显色:每孔先加入显色剂 A50?l,再加入显色剂 B50?l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10.终止:每孔加终止液 50?l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。

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鸡脂多糖/内毒素(LPS)elisa试剂盒
鸡脂蛋白脂酶(LPL)elisa试剂盒
鸡孕激素/孕酮(PROG)elisa试剂盒
鸡游离脂肪酸(FFA)elisa试剂盒
鸡抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒
鸡抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒
鸡乙酰辅酶A羧化酶α(ACACA)ELISA试剂盒
鸡胰高血糖素(GC)ELISA试剂盒
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原创作者:上海生物科技有限公司

金畔生物PCR试剂,疫苗评价CRO服务

疫苗评价CRO服务

 

 

 

   背景

自新冠病毒流行爆发以来,在国家药品监督管理局的部署下,2020年8月药审中心组织制定了《新型冠状病毒预防用疫苗研发技术指导原则(试行)》等一系列指导原则。原则中指出对于新冠疫苗的生物效价检测,要求进行体液免疫的指标评价,必要时对细胞免疫等其他免疫也进行相关研究,特别是采用新佐剂/新辅料或载体系统的疫苗,如目前市面上的mRNA疫苗、腺病毒载体疫苗等。金畔生物具有完善的抗原、抗体开发和生产平台以及假病毒构建平台,自主研发了新冠抗体ELISA检测试剂盒以及HIV和VSV双系统的新冠假病毒产品,并积极参与了国内各种新冠疫苗技术路线的临床前和临床研究工作,建立起对体液免疫和细胞免疫等的方法学。金畔生物为您提供新冠疫苗评价服务,从临床前到临床“一站式”解决方案,助力疫苗的快速上市!

 

   生物样本分析

 

1. 体液免疫检测

A.  基于新冠假病毒系统的中和活性检测服务

金畔生物新冠假病毒系统基于非复制型慢病毒,具有较高的安全性。该慢病毒外壳插入新冠病毒Spike蛋白,可以高度模拟新冠病毒经细胞表面受体ACE2而侵入细胞的机制;假病毒携带萤火虫荧光素酶报告基因,感染目的细胞的程度与发光信号成正比。

【服务详情

样本类型

血清、血浆或抗体等样本,由客户自行提供

检测试剂

金畔生物提供实验所需HEK293-ACE2稳转细胞系,表达新冠病毒Spike蛋白的假病毒

质控标准品

提供的阳性对照(人源化多抗)

交付文件

项目检测报告及原始数据

检测周期

8-10个工作日

服务优势

1.技术平台:金畔生物自主研发了HIV和VSV双系统的新冠假病毒产品;

2.突变株种类齐全:WT、Delta、Omicron(包括亚型BA.1、BA.2、BA.3、BA.4/BA.5、BA.2.12.1)等响应速度快;

3.检测能力:检测通量高,已为多家疫苗公司及科研机构提供假病毒中和抗体检测服务,保证结果真实可靠

 

【数据展示

使用假病毒系统,在P2安全等级实验室条件下,测评具有潜在中和活性的候选抗体,并绘制抑制曲线(图1)。经P3实验室真病毒感染Vero E6的体外中和功能验证,确认候选抗体体外真病毒中和功能活性与本次假病毒试验结果基本一致。

供试品免疫小鼠后,于不同时间点收集血清,检测免疫后小鼠血清中针对WT假病毒毒株的中和抗体水平(图2)。

疫苗评价CRO服务

 

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   B. 基于ELISA的结合抗体检测服务

酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,简写ELISA)指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。

【服务详情

样本类型

血清、血浆等样本,由客户自行提供

检测试剂

小鼠新型冠状病毒RBD抗体/S抗体(IgG)检测试剂盒

小鼠新型冠状病毒Spike (Delta)抗体(IgG)检测试剂盒

小鼠新型冠状病毒Spike (Omicron)抗体(IgG)检测试剂盒

新型冠状病毒RBD抗体/S抗体(IgG)检测试剂盒

新型冠状病毒RBD抗体/S抗体(IgG)定量检测试剂盒

交付文件

项目检测报告及原始数据

检测周期

8-10个工作日

服务优势

1.技术平台:金畔生物具有完善的抗原、抗体开发和生产平台,自主研发了新冠抗体ELISA检测试剂盒;

2.检测能力:响应速度快,已为多家疫苗企业及科研单位提供抗体检测服务;

3.可针对突变株(Delta、Omicron)进行结合抗体的检测

 

【案例展示

用ELISA法半定量的方法(起始稀释倍数为500),测定小鼠血清中的新型冠状病毒的S相关IgG抗体。

表1 小鼠血清S IgG抗体滴度检测结果汇总表

样品编号

Sample Number

滴度值

Titer Value of Antibody

空白组1

<500

空白组2

<500

低剂量1

4500

低剂量2

500

高剂量1

13500

高剂量2

13500

(注:表中数据为我司内部研发数据)

 

试验结果判断:

样本A值≥500,则测试样本为IgG抗体检测阳性。

样本A值<500,则测试样本为IgG抗体检测阴性。

 

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2. 细胞免疫检测

《新型冠状病毒预防用疫苗研发技术指导原则(试行)》指南中明确提出,对于新冠疫苗的生物效价检测,由于对病原体认知有限及不同类型疫苗免疫机制不尽相同,鼓励对细胞免疫水平的生物学活性开展相关研究,特别是采用新佐剂/新辅料或载体系统的疫苗,如目前市面上的mRNA疫苗、腺病毒载体疫苗等。因此细胞免疫检测具有重要意义。

 

C. 基于ELISpot的细胞因子检测服务

【检测原理】

在以PVDF膜为基质的96孔板中预先包被抗细胞因子的抗体,待检细胞与抗原刺激物共同在板孔中孵育,受到刺激后的待检细胞会产生细胞因子,细胞因子当即就被位于细胞下方的膜上的单克隆抗体所捕获。在洗去细胞之后,被捕获的细胞因子可以与生物素标记的第二抗体结合,然后用酶标亲和素再与生物素结合,进行化学酶联显色就会形成清晰可辨的斑点,一个斑点代表着一个能够产生细胞因子的细胞。根据斑点数目就可以分析分泌该细胞因子的细胞的频率,可直观的展示出细胞免疫的效果。

【服务详情】

样本类型

脾细胞、PBMC等,由客户自行提供

检测指标

IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-5、IL-13等常见细胞因子

交付文件

项目检测报告

检测周期

8-10个工作日

服务优势

可提供新冠病毒野生株S蛋白全长肽库;可进行方法学验证

【案例展示】

利用野生株S蛋白肽库刺激小鼠脾细胞,检测疫苗免疫后T细胞免疫反应效果,即可通过斑点数监测细胞因子的表达。

 

疫苗评价CRO服务

图 3

 

D. 基于ICS的细胞因子检测服务

【检测原理】

用抗细胞因子抗体与细胞表面或胞内特定亚群标志组合,即可检测不同细胞亚群细胞因子的分泌情况。不同于传统的细胞表面抗体染色,此方法先对细胞进行固定,以便稳定细胞膜和交联蛋白质,之后破膜处理,使抗体进入细胞内结合胞内细胞因子并显色。利用3激光10色流式细胞仪,检测疫苗免疫后的T细胞免疫,分析Th1和Th2比例。

【服务详情】

样本类型

脾细胞、PBMC等,由客户自行提供

检测指标

IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-5、IL-13等常见细胞因子

交付文件

项目检测报告

检测周期

15-20个工作日

服务优势

可提供新冠病毒野生株S蛋白全长肽库

 

【案例展示】

利用ICS技术从单细胞水平上分析不同类型细胞因子的表达和对应细胞因子的细胞类型,用多种荧光标记单克隆抗体可在同一细胞水平上,同时测定多种不同的细胞因子表达情况。

疫苗评价CRO服务

图 4

 

   服务流程

 

业务咨询 →  签订合同 →  样品收验 →  实验检测 →  出具报告 →  交付结果