NEB代理,RNA 试剂,RNA 分离和检测,p19 siRNA结合蛋白#M0310S

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 分离和检测

p19 siRNA结合蛋白(停产)

#M0310S 1,000 units

停产通知

 产品于 2020年 1 月 2 日停产.

相关产品

几丁质树脂 
几丁质磁珠

特性

 与 siRNA 结合效率高
 可通过几丁质磁珠亲和纯化 siRNA 

概述

p19 siRNA 结合蛋白分子量为 19 kDa,来自于植物香石竹意大利环斑病毒(CIRV)。该蛋白与 siRNA 具有纳摩尔级的亲和力,和 3´ 末端有 2 个核苷酸突出、5´ 末端是磷酸基的 21 nt siRNA 结合力高于其它片段。该蛋白是以二聚体的形式与 siRNA 结合,结合力取决 RNA 片段大小,而与 RNA 序列无关。如果 siRNA 的长度增加 4 个碱基,则与蛋白的亲和力会下降约 100 倍。当 p19 siRNA 结合蛋白在植物体内表达时,能抑制 RNAi 作用。 

来源

p19 siRNA 结合蛋白以融合蛋白的形式在大肠杆菌中克隆和表达。其 N 末端带有 MBP(麦芽糖结合蛋白),C 末端带有 CBD(几丁质结合蛋白)。 

质保声明

无 DNase、RNase 和磷酸酶污染。产品经纯化,琼脂糖凝胶电泳后 EB 染色检测,无 DNA 或 RNA 污染。 

单位定义

1 单位指 25℃ 条件下,1 小时内结合 10 ng 的 siRNA 所需要的蛋白量。

分子量

67 kDa。 

浓度

10,000 units/ml。 

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NEB代理,RNA 试剂,RNA 分离和检测,Oligo d(T)25 纤维素珠

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 分离和检测

Oligo d(T)25 纤维素珠(停产,有替代)                      #S1408S 250 mg

停产通知

产品于 2020 年 3 月 31 日停产。纯化带有 poly A 的mRNA 时,建议替代产品为:Oligo d(T)25 磁珠(NEB#S1419S); NGS 应用时,建议替代产品为:NEBNext Poly(A) mRNA 磁性分离模块(NEB#E7490)。

概述

该产品是能用于从 Poly A 区域中分离 mRNA 的亲和基质。这种基质包含有与纤维素珠共价交联的 Oligo (dT)25

支持介质

用分光光度计来测定每克纤维素结合的 poly rA (M.W.>100,000) 的量。 

结合容量

> 400 A260 units/g。 

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NEB代理,RNA 试剂,RNA 分离和检测,Oligo d(T)25 磁珠,#S1419S

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 分离和检测

Oligo d(T)25 磁珠

#S1419S 25 mg

相关产品

96 孔微孔板磁性分离架

概述

该产品是用于从细胞裂解液和组织中小规模分离 mRNA 的亲和基质。此分离是通过共价偶联的 Oligo d(T)25 与大部分真核生物 mRNA 中携带的 ploy(A) 区域杂交实现的。既可用于细胞裂解后 mRNA 的直接分离,也可用于从先分离得到的总 RNA 中进行第二轮纯化。磁珠分离技术还能放大体系并将分离后的 mRNA 终体积进行调整,从而得到较小体积的完整 RNA 洗脱液,不需要再从洗脱液中沉淀分离的 mRNA。磁珠能再生 3 次,实验者可选择将分离到的 mRNA 洗脱或直接以结合 mRNA 上的 d(T)25 DNA 为引物来进行 cDNA 第一链合成。

支持介质

1 μm 的无孔超顺磁性微粒。

结合容量

1 mg Oligo d(T)25 磁珠能结合 10 μg poly(A)+ RNA。 

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NEB代理 , RNA 试剂 , RNA 分离和检测,链霉亲和素磁珠

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 分离和检测

链霉亲和素磁珠

#S1420S5 ml (20 mg)

相关产品

6 孔磁性分离架
96 孔微孔板磁性分离架

概述

链霉亲和素磁珠由 1 μm 超顺磁微粒与高纯度链霉亲和素共价结合而成。磁珠可用于捕获生物素标记的底物,包括抗原、抗体和核酸。由于生物素-链霉亲和素的相互作用力很强,并且链霉亲和素的非特异性结合率很低,被捕获的底物作为配体可完全满足后续实验要求,包括 mRNA 的分离和一抗、二抗的获得。 
磁珠存储于 0.1% 的 BSA、0.05% 的 Tween-20 和 0.05% 的 NaN3 磷酸缓冲液(PBS)(pH 7.4)中,形成 4 mg/ml 的悬浮液。 

支持介质

直径 1 μm 的无孔超顺磁性微粒。 

结合容量

1 mg 磁珠可结合 1000 pmol 以上的游离生物素和 500 pmol 以上的单链 25 bp 生物素标记的寡核苷酸。

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NEB代理,RNA 试剂,RNA 分离和检测,mRNA 磁性分离试剂盒

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 分离和检测

mRNA 磁性分离试剂盒

#S1550S 25 次分离反应

可单独出售的组份

Oligo d(T)25 磁珠
#S1419S   25 mg

相关产品:

6 孔磁性分离架
#S1506S   6 孔 (1.5 ml)

12 孔磁性分离架
#S1509S   12 孔 (1.5 ml)

特性

 适用于自动化、高通量分离
 无需有机溶剂
 无需从洗脱液中沉淀 poly(A)+ 转录物
 1 小时内即可获得完整 poly(A)+ RNA
 无基因组 DNA 污染 

概述

NEB 的 mRNA 磁性分离试剂盒可用于从细胞或组织中分离完整的 poly(A)+ RNA,此过程不需要酚和其它有机溶剂。该技术的原理是将 Oligo d(T)25 与 1 μm 顺磁性磁珠耦联后,以此为固相支持物直接结合 poly(A)+ RNA。利用此方法可以进行多个样本的分离,也适用于自动化高通量分离。此外,磁性分离技术可得到较小体积的完整 RNA 洗脱液,不需要再从洗脱液中沉淀 poly(A)+ 转录物。因此在 1 小时内就能分离得到体现原始样品中 mRNA 分布特性的完整 poly(A)+ RNA。Oligo d(T)25 磁珠可再生 3 次,实验者可选择将分离到的 mRNA 洗脱下来或直接以结合于 mRNA 上的 dT DNA 为引物来进行 cDNA 第一链合成。

NEB代理 , RNA 试剂 , RNA 分离和检测

分离 poly(A)+ RNA 分离试验显示分离结果一致性好,分离范围宽:将细胞数递减的 HEPG2 细胞( 5 X 105 – 1 X 103),直接在微量滴定板上进行裂解/结合,然后加入磁珠分离 mRNA。使用 ProtoScript M-MuLV 第一链 cDNA 合成试剂盒(NEB #E6300),以 oligo(dT) 为引物将 mRNA 的十分之一反转录成 cDNA,并使用特异引物 qPCR 检测低丰度的管家基因;肽基脯氨酰异构酶。

mRNA 磁性分离试剂盒包括

– Oligo d(T)25 磁珠
– 裂解/结合缓冲液
– 洗涤缓冲液 I、 II 、III 和洗脱缓冲液 

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NEB代理,RNA 试剂,polyA Spin™ mRNA 分离试剂盒,#S1560S

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 分离和检测

polyA Spin™ mRNA 分离试剂盒(停产,有替代)

#S1560S 8 次分离反应

停产通知

产品于 2020 年 3 月 31 日停产。纯化带有 poly A 的mRNA 时,建议替代产品为:Oligo d(T)25 磁珠(NEB#S1419S); NGS 应用时,建议替代产品为:NEBNext Poly(A) mRNA 磁性分离模块(NEB#E7490)。

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Oligo d(T)25 纤维素珠(停产,有替代)

polyA Spin 试剂盒组份

– 预装的 Oligo d(T)25 -纤维素珠柱
– 无菌微量离心回收管
– 洗涤缓冲液、洗脱缓冲液、糖原、NaCl 和 NaOAc 

概述

PolyA Spin™ mRNA 分离试剂盒能快速、简便地从真核细胞总 RNA 中分离全长 poly(A)+ mRNA。poly(A)+ RNA 通过离心柱进行亲和层析,离心柱是用 NEB 的 Oligo(dT)25-纤维素珠(NEB  #S1408)预先填充。该纤维素珠具有较强结合容量和超强结合力,是亲和层析 ploy(A)+ RNA 的最佳选择,仅40 分钟即可从多种真核细胞裂解液或样本(包括真菌、植物及动物组织)的总 RNA中获得完整的 mRNA。
该试剂盒提供的试剂可满足分离、沉淀8 个样品中的 poly(A)+ RNA,每个样品总 RNA 的量可高达 1 mg。分离得到的 RNA 可用于体外翻译实验、cDNA 文库制备、Northern 杂交、消减杂交或差异显示等。 

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NEB代理,RNA 试剂,RNA Marker 和 Ladder,RNA 上样染料

产品资料 – RNA 试剂 – RNA Marker 和 Ladder

RNA 上样染料(2X)

#B0363S 4 ml

概述

RNA 上样染料为 2X 预混液,适用于变性和非变性聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)/琼脂糖凝胶。 

质保声明

无 DNA 核酸内切酶、外切酶及 RNase 污染。 

RNA 上样染料组成

1X RNA 上样染料:
47.5% 甲酰胺,0.01% SDS,0.01% 溴酚蓝,0.005% 氟代二甲苯和 0.5 mM EDTA。 

NEB代理 , RNA 试剂 , RNA Marker 和 Ladder,ssRNA Ladder

产品资料 – RNA 试剂 – RNA Marker 和 Ladder

ssRNA Ladder

#N0362S 25 gel lanes

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microRNA Marker
ssRNA Ladder
低分子量 ssRNA Ladder

概述

NEB 提供 17-9,000 个碱基的一系列 RNA Marker 和Ladder。ssRNA Ladder 作为 RNA 分子量标准适用于变性或非变性胶,两种 ssRNA Ladder 均随产品附带 2X 上样缓冲液,并提供双倍浓度的片段作为参考条带。microRNA Marker 为即用型,溶于变性缓冲液中,是聚丙烯酰胺凝胶或 Northern blot 中分子量 marker 的最佳选择,用 SYBR-Gold(Molecular Probes 公司)染色可获得最佳效果,同时附带的还有 3´ 生物素标记的 21-mer 寡核苷酸探针,它同样可被 [γ-32P] ATP 和 T4 PNK 标记(NEB #M0201)。dsRNA Ladder 在非变性聚丙烯酰胺和琼脂糖凝胶电泳中均适合作为 dsRNA 和 RNAi 分析的分子量标准。

NEB代理 , RNA 试剂 , RNA Marker 和 Ladder

浓度

低分子量 ssRNA Ladder 和 dsRNA Ladder 的浓度均为 500 μg/ml;ssRNA Ladder 的浓度为 2,000 μg/ml;MicroRNA Marker 浓度为 12 ng/μl。

NEB代理,RNA 试剂,RNA Marker 和 Ladder,dsRNA Ladder #N0363S

产品资料 – RNA 试剂 – RNA Marker 和 Ladder

dsRNA Ladder

#N0363S 25 gel lanes

相关产品

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microRNA Marker
ssRNA Ladder
低分子量 ssRNA Ladder

概述

NEB 提供分子量大小从 17-9,000 个碱基的一系列 RNA Ladders 和 Markers。低分子量 ssRNA Ladder 适用于变性和非变性凝胶电泳中  RNA  分子量标准。两种 ssRNA Ladder 均提供 2X 上样缓冲液,亮度加倍的条带可作为参照带。microRNA Marker 已溶于即用型变性上样液中,可用作变性聚丙烯酰胺凝胶和 Northern 杂交中分子量标准,使用 SYBR-Gold 染料染色效果最佳。随 Marker 提供 3´ – 生物素标记的 21-mer 寡核苷酸探针,可以用  γ-32P- ATP 和 T4 PNK 标记(NEB #M0201)进行标记。dsRNA Ladder 适用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖电泳,作为 dsRNA 和 RNAi 分析的分子量标准。

NEB代理 , RNA 试剂 , RNA Marker 和 Ladder

浓度

低分子量 ssRNA Ladder 和 dsRNA Ladder 的浓度均为 500 μg/ml;ssRNA Ladder 的浓度为 2,000 μg/ml;MicroRNA Marker 浓度为 12 ng/μl。

NEB代理,RNA 试剂,RNA Marker 和 Ladder,#N0364S

产品资料 – RNA 试剂 – RNA Marker 和 Ladder

低分子量 ssRNA Ladder

#N0364S 100 gel lanes

产品概述

• 分子量范围:50 bp – 1,000 bp
• 与变性聚丙烯酰胺-尿素凝胶、变性琼脂糖凝胶和非变性琼脂糖凝胶兼容
• 易于识别的参照带(300 bp)
低分子量 ssRNA Ladder 由 6 组 RNA 分子组成,这些 RNA 分子由 6 组线性 DNA 模板体外转录制备。RNA 的分子量大小分别为 1000、500、300、150、80 和 50 bp,其中 300 bp 条带作为参照带,有双倍的亮度。这个产品适用于作为变性聚丙烯酰胺-尿素凝胶、变性或非变性琼脂糖凝胶的 ssRNA 分子量标准。
使用建议
该产品不用于精确定量 ssRNA 的质量。
变性琼脂糖凝胶 VS 非变形琼脂糖凝胶
通常的做法是在完全变性的琼脂糖凝胶上进行 RNA 电泳,如含甲醛琼脂糖凝胶(1)。然而,在许多情况下,可能在非变性琼脂糖凝胶上进行 RNA 电泳,以获取相应数据。实际工作中,RNA 电泳需要至少 3 个小时,这期间 RNA 样品在变性缓冲液中一直处于变性状态(2,3)。使用非变性琼脂糖凝胶可以避免有毒化学品相关的问题,以及对甲醛凝胶染色和印迹时遇到的困难。
样品制备
低分子量 ssRNA Ladder 也兼容基于甲醛的上样缓冲液。
1 µg/lane,2.0% TBE 琼脂糖凝胶
产品组分与保存条件
组分名称 保存温度(°C) 体积 浓度
低分子量 ssRNA Ladder -20 1 x 0.05 ml 不适用
2X RNA 上样缓冲液 -20 1 x 1 ml 1 x 1 ml
保存缓冲液
20 mM 柠檬酸钠
1 mM EDTA
pH 6 @ 25°C

NEB代理,RNA 试剂,RNA Marker 和 Ladder,microRNA Marker#N2102S

产品资料 – RNA 试剂 – RNA Marker 和 Ladder

microRNA Marker

#N2102S 100 gel lanes

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概述

NEB 提供 17-9,000 个碱基的一系列 RNA Marker 和Ladder。ssRNA Ladder 作为 RNA 分子量标准适用于变性或非变性胶,两种 ssRNA Ladder 均随产品附带 2X 上样缓冲液,并提供双倍浓度的片段作为参考条带。microRNA Marker 为即用型,溶于变性缓冲液中,是聚丙烯酰胺凝胶或 Northern blot 中分子量 marker 的最佳选择,用 SYBR-Gold(Molecular Probes 公司)染色可获得最佳效果,同时附带的还有 3´ 生物素标记的 21-mer 寡核苷酸探针,它同样可被 [γ-32P] ATP 和 T4 PNK 标记(NEB #M0201)。dsRNA Ladder 在非变性聚丙烯酰胺和琼脂糖凝胶电泳中均适合作为 dsRNA 和 RNAi 分析的分子量标准。

NEB代理 , RNA 试剂 , RNA Marker 和 Ladder

浓度

低分子量 ssRNA Ladder 和 dsRNA Ladder 的浓度为 500 μg/ml;ssRNA Ladder 的浓度为 2,000 ug/ml;MicroRNA Marker 浓度为 12 ng/μl。

NEB代理 , RNA 试剂 , RNA Marker 和 Ladder,miRNA 通用克隆接头

产品资料 – RNA 试剂 – RNA Marker 和 Ladder

miRNA 通用克隆接头

#S1315S0 83 nmol

相关产品

T4 RNA 连接酶 2,截短型 KQ

概述

5zz端腺苷化、3´ 端封闭的寡核糖核苷酸可用于 Bartel 方法中短片段 RNA 分子的克隆(1)。RNA 连接酶可以识别“活化”的腺苷化寡核糖核苷酸,无需 ATP,即可将其 5´ 端与第二条单链 RNA 的 3´ 端 OH 共价连接。利用此 5´ 端腺苷化、3´ 端封闭的寡核糖核苷酸,加入 T4 RNA 连接酶 2,截短型、T4 RNA 连接酶 2,截短型 K227Q 或 T4 RNA 连接酶 1(有/无 ATP),只能与核酸混合物中的目的寡核苷酸连接。

腺苷化的 DNA 寡核苷酸序列是:
5´ -rAppCTGTAGGCACCATCAAT-NH2 3´ 。

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(1) Lau et al. (2001) Science, 294, 858–856.