MCE抑制剂∣Abcam CST Santa抗体∣蛋白、酶、磁珠
NEB 的 2-Log、1 kb 和 100 bp DNA Ladder 现均提供四种不同剂型。您可以选择常规型的 Ladder、以非荧光紫色染料或者溴酚蓝为指示剂的 Quick-Load 型或含三种指示剂的 TriDye 型，便于观察 DNA 迁移。
NEBuffer 1.1: <10%
NEBuffer 2.1: 50%
NEBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 25%
重组酶、省时酶。
NEBuffer 3.1，37℃。
热失活：80℃ 20 分钟。
10,000 units/ml。
对 dcm 甲基化敏感。
甘油浓度 ＞ 5% 条件下可能出现星号活性。
小鼠 RNase 抑制剂
10,000 units/ml。
NEB 的 2-Log、1 kb 和 100 bp DNA Ladder 现均提供四种不同剂型。您可以选择常规型的 Ladder、以非荧光紫色染料或者溴酚蓝为指示剂的 Quick-Load 型或含三种指示剂的 TriDye 型，便于观察 DNA 迁移。
NEBuffer 1.1: 10%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
CutSmart、重组酶、省时酶。
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活：65℃ 20 分钟。
20,000 units/ml。
对哺乳动物基因组 DNA CpG 甲基化敏感。
某些 Sacll 的识别位点不能被切割，如 λDNA 右臂上的 Sacll 识别位点，有关底物位点优势效应。
·Faustovirus 病毒加帽酶（FCE）用于在 RNA 5′末端的三磷酸和二磷酸位置加 m7G-帽（Cap-0）
Faustovirus 病毒加帽酶（FCE）在转录产物 5′末端的三磷酸和二磷酸位置催化加入 N7–甲基鸟苷帽（m7G），产生带有 Cap-0 帽的 RNA。FCE 是一种单亚基酶，具有给 RNA 加 Cap-0 帽所需的三种酶活：三磷酸酶，鸟嘌呤转移酶，（鸟嘌呤-N7）–甲基转移酶。真核生物 mRNA 成熟的关键步骤是：添加 Cap-0 帽结构、第一个核苷酸 2′-O-甲基化（Cap-1）和多聚腺苷化加尾（poly（A））。Cap-0 结构还增加了 RNA 的稳定性，避免三磷酸化的 RNA 激活天然免疫反应。
FCE 从低温至 55℃ 高温范围内，均能够维持加帽活性。一般情况下，1 µl FCE（25 units）可以在 37°C 条件 1 小时内完成＞100 µg RNA 的加帽。本产品提供加帽所需的 GTP 和 S-腺苷甲硫氨酸（SAM）。
来源：由大肠杆菌（E. coli）质粒表达 Faustovirus 病毒加帽酶（FCE）编码序列，C-端带有 His-tag。
图 1：FCE 提高加帽效率，优化操作流程
A. 分别使用 FCE 和牛痘病毒加帽系统（VCE）在 37℃ 条件下加帽。以含有不同 5´-UTR 序列（如图所示）的 FLuc 转录本（1.77 kb）作为加帽底物（200 μg，相当于约 350 pmol，浓度为 7 μM），分别使用 FCE（25 units 相当于 1 pmol，在 50 μl 体系中浓度为 20 nM）或 VCE（25 units 相当于 1 pmol，在 50 μl 体系中浓度为 20 nM）37℃ 孵育 1 小时。需要注意的是，上述条件低于我们推荐的酶用量，用以展示 FCE 比 VCE 的加帽效率更高，以及在流程优化上的优势。
B. 使用 FCE 分别在 37℃ 和 42℃ 条件下进行 mRNA 加帽。以含有不同 5´-UTR 序列（如图所示）的 FLuc 转录本（1.77 kb）作为加帽底物（200 μg，相当于约 350 pmol，浓度为 7 μM），使用 FCE（25 units 相当于 1 pmol，浓度为 20 nM）37℃ 孵育 1 小时。需要注意的是，上述条件低于我们推荐的酶用量，用以展示 FCE 在流程优化上的优势。加帽反应体系为 50 μl，含有 0.1 mM SAM、0.5 mM GTP、以及用于 FCE 反应的 1X FCE 加帽缓冲液或用于 VCE 反应的 1X 加帽缓冲液。反应结束后，进行靶向 RNase H 切割，并使用 LC-MS 检测 mRNA 加帽效率。
图 2：FCE 的 RNA 加帽反应适用于更宽泛的温度范围
分别使用 FCE 和 VCE 在 15℃-60℃ 条件下进行 RNA 加帽。20 μl 加帽反应体系中含有：2.5 μM RNA 底物（5´-三磷酸 20mer 3´-FAM）、8 nM 加帽酶、0.1 mM SAM 和 0.5 mM GTP。FCE 加帽反应在 1X FCE 加帽缓冲液中进行，VCE 加帽反应在 1X 加帽缓冲液中进行。所有反应在指定的反应温度下孵育 30 分钟。通过毛细管电泳检测反应产物。
图 3：FCE 可对各种 RNA 进行高效 5’加帽（50 units至少加帽 100 ug RNA）
上图展示了 FCE 对多种 mRNA 的加帽效果。以含有不同 5´-UTR 序列（如图所示）的 FLuc 转录本（共 1.77 kb）作为加帽底物（200 μg，相当于约 350 pmol，浓度为 3.5 uM），在含有 1X FCE 缓冲液的 100 μl 反应体系中加入 2 μl 的 FCE（50 units 相当于 2 pmol，浓度为 20 nM），37℃ 条件下孵育 1 小时。反应结束后，进行靶向 RNase H 切割，并使用 LC-MS 检测 mRNA 加帽效率。
NEB 的 2-Log、1 kb 和 100 bp DNA Ladder 现均提供四种不同剂型。您可以选择常规型的 Ladder、以非荧光紫色染料或者溴酚蓝为指示剂的 Quick-Load 型或含三种指示剂的 TriDye 型，便于观察 DNA 迁移。
NEB 提供多种适用于各类蛋白表达的感受态细胞。Shuffle® 菌株在表达含多个二硫键的重组蛋白时，显著提高形成正确二硫键的能力。通过 Lemo21（DE3）可实现 T7 的可调控表达，这种菌株是表达包括膜蛋白在内的问题蛋白的理想选择。NiCo21（DE3）可用于 His 标记蛋白的表达和纯化。NEB 表达系统和 T7 表达系统均可实现对蛋白表达水平的调控。其中有些菌株可以通过 lacIq 调控非T7 质粒的诱导（IPTG）表达。然而只有 NEB 提供通过 lysY 基因对表达进行更为严格调控的菌株。每种表达菌株都提供一份优化的表达方案。
* NEB Express 是 pMAL 蛋白融合表达与纯化系统的推荐菌株。
反转录反应中提高 RNA 产量
增强 DNA 复制能力
无机焦磷酸酶（PPase）催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐。
P207–4 + H20 → 2HP04–2
无机焦磷酸酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
1 单位指标准反应条件下每分钟催化无机焦磷酸盐生成 1 μmol 磷酸盐所需的酶量。
100 units/ml。
有关该产品特性和应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。
PURExpress® 体外蛋白合成试剂盒是新型无细胞转录/翻译系统，用于基因快速表达分析，是由大肠杆菌翻译所必需组份纯化而构成。PURExpress 系统无核酸酶和蛋白酶的污染，保护了 DNA 和 RNA模板/复合体，避免了蛋白的修饰及降解。转录和翻译过程仅需将两管试剂混合，一步反应即可完成，几个小时就可观察实验结果，PURExpress 系统大大地节省了宝贵的实验时间，特别适合于高通量技术。
该专利产品的成分为蛋白质与缓冲液，当 PURExpress 系统合成或 E. coli S30 提取的目的蛋白具有较多二硫键时，能帮助其正确折叠。在合成反应开始时加入 PURExpress 二硫键增强剂，能够协助半胱氨酸硫醇的氧化，并纠正硫醇的错误氧化，从而提高可溶性蛋白及具有功能活性蛋白的产量。
此试剂盒中移除了核糖体，使得研究蛋白翻译的用户能够使用自己的修饰核糖体。试剂盒还提供单独一管的对照核糖体（2 次反应用量）。
释放因子通过识别 mRNA 序列上的终止密码子参与蛋白翻译的终止过程。采用 PURExpress 进行核糖体展示实验时，缺乏释放因子能够稳定 mRNA-核糖体-新生肽链形成的三元复合体。因此 cDNA 的回收率会更高。该试剂盒单独提供三种释放因子，用户能够自行选择在有或无释放因子的条件下进行蛋白质体外合成或核糖体展示。
该试剂盒单独提供 tRNA 与氨基酸，用户能够向反应体系中加入修饰过的氨基酸与 tRNA 混合液进行蛋白质合成反应。
大肠杆菌的 70S 核糖体由一个小亚基（30S）与一个大亚基（50S）组成。该核糖体试剂在 NEB 的PURExpress体外蛋白合成试剂盒（NEB #E6800）中活性很高，在核糖体结构与功能研究中，能够用于药物筛选的靶标以及分离天然核糖体 RNA（5S、16S、23S）的起始材料。该产品溶液浓度为 33.3 mg/ml。
各种常规分子量标准的电泳图如下。每种 Marker 产生的条带数以及片段大小等详细信息可以查看说明书或登陆网站 www.neb-china.com，www.neb.com 查询。
pBR322 DNA-BstNI 消化、pBR322 DNA-MspI 消化和 ΦX174 DNA-HaeⅢ消化的浓度为 1,000 μg/ml。Lambda DNA-BstEⅡ消化、Lambda DNA-HindⅢ消化和 Lambda DNA-Mono Cut Mix 的浓度为 500 μg/ml。
经验证无核酸酶污染，功能性纯度通过体外转录鉴定。
为了确保其最佳活性，长期保存请分装后存于 -80℃。
各种常规分子量标准的电泳图如下。每种 Marker 产生的条带数以及片段大小等详细信息可以查看说明书或登陆网站 www.neb-china.com，www.neb.com 查询。
pBR322 DNA-BstNI 消化、pBR322 DNA-MspI 消化和 ΦX174 DNA-HaeⅢ消化的浓度为 1,000 μg/ml。Lambda DNA-BstEⅡ消化、Lambda DNA-HindⅢ消化和 Lambda DNA-Mono Cut Mix 的浓度为 500 μg/ml。
3´ -脱硫生物素标记 GTP 中无 RNase 和切刻酶污染。
NEB 提供一系列宽范围双链 DNA 分子量标准，可用于常规琼脂糖凝胶电泳。这些分子量标准的大小范围约为 10-23,000 bp。
各种常规分子量标准的电泳图如下。每种 Marker 产生的条带数以及片段大小等详细信息可以查看说明书或登陆网站 www.neb-china.com，www.neb.com 查询。
各种常规分子量标准的电泳图如下。每种 Marker 产生的条带数以及片段大小等详细信息可以查看说明书或登陆网站 www.neb-china.com，www.neb.com 查询。
pBR322 DNA-BstNI 消化、pBR322 DNA-MspI 消化和 ΦX174 DNA-HaeⅢ消化的浓度为 1,000 μg/ml。Lambda DNA-BstEⅡ消化、Lambda DNA-HindⅢ消化和 Lambda DNA-Mono Cut Mix 的浓度为 500 μg/ml。
各种常规分子量标准的电泳图如下。每种 Marker 产生的条带数以及片段大小等详细信息可以查看说明书或登陆网站 www.neb-china.com，www.neb.com 查询。
pBR322 DNA-BstNI 消化、pBR322 DNA-MspI 消化和 ΦX174 DNA-HaeⅢ消化的浓度为 1,000 μg/ml。Lambda DNA-BstEⅡ消化、Lambda DNA-HindⅢ消化和 Lambda DNA-Mono Cut Mix 的浓度为 500 μg/ml。
PURExpress® 体外蛋白合成试剂盒是新型无细胞转录/翻译系统，用于基因快速表达分析，是由大肠杆菌翻译所必需组份纯化而构成。PURExpress 系统无核酸酶和蛋白酶的污染，保护了 DNA 和 RNA模板/复合体，避免了蛋白的修饰及降解。转录和翻译过程仅需将两管试剂混合，一步反应即可完成，几个小时就可观察实验结果，PURExpress 系统大大地节省了宝贵的实验时间，特别适合于高通量技术。
该专利产品的成分为蛋白质与缓冲液，当 PURExpress 系统合成或 E. coli S30 提取的目的蛋白具有较多二硫键时，能帮助其正确折叠。在合成反应开始时加入 PURExpress 二硫键增强剂，能够协助半胱氨酸硫醇的氧化，并纠正硫醇的错误氧化，从而提高可溶性蛋白及具有功能活性蛋白的产量。
此试剂盒中移除了核糖体，使得研究蛋白翻译的用户能够使用自己的修饰核糖体。试剂盒还提供单独一管的对照核糖体（2 次反应用量）。
释放因子通过识别 mRNA 序列上的终止密码子参与蛋白翻译的终止过程。采用 PURExpress 进行核糖体展示实验时，缺乏释放因子能够稳定 mRNA-核糖体-新生肽链形成的三元复合体。因此 cDNA 的回收率会更高。该试剂盒单独提供三种释放因子，用户能够自行选择在有或无释放因子的条件下进行蛋白质体外合成或核糖体展示。
该试剂盒单独提供 tRNA 与氨基酸，用户能够向反应体系中加入修饰过的氨基酸与 tRNA 混合液进行蛋白质合成反应。
大肠杆菌的 70S 核糖体由一个小亚基（30S）与一个大亚基（50S）组成。该核糖体试剂在 NEB 的 PURExpress体外蛋白合成试剂盒（NEB #E6800）中活性很高，在核糖体结构与功能研究中，能够用于药物筛选的靶标以及分离天然核糖体 RNA（5S、16S、23S）的起始材料。该产品溶液浓度为 33.3 mg/ml。
NEB 提供一系列宽范围双链 DNA 分子量标准，可用于常规琼脂糖凝胶电泳。这些分子量标准的大小范围约为 10-23,000 bp。
各种常规分子量标准的电泳图如下。每种 Marker 产生的条带数以及片段大小等
pBR322 DNA-BstNI 消化、pBR322 DNA-MspI 消化和 ΦX174 DNA-HaeⅢ消化的浓度为 1,000 μg/ml。Lambda DNA-BstEⅡ消化、Lambda DNA-HindⅢ消化和 Lambda DNA-Mono Cut Mix 的浓度为 500 μg/ml。
PURExpress® 体外蛋白合成试剂盒是新型无细胞转录/翻译系统，用于基因快速表达分析，是由大肠杆菌翻译所必需组份纯化而构成。PURExpress 系统无核酸酶和蛋白酶的污染，保护了模板 DNA 和 RNA，避免了蛋白的修饰及降解。转录和翻译过程仅需将两管试剂混合，一步反应即可完成，几个小时就可观察实验结果，PURExpress 系统大大地节省了宝贵的实验时间，特别适合于高通量技术。
使用 PURexpress 体外蛋白合成试剂盒表达蛋白质。25 μl 反应体系中加入 250 ng 模板 DNA 和 20 单位 RNase 抑制剂，37℃ 反应 2 小时。各取 2.5 μl 反应液，进行 10-20% Tris-甘氨酸 SDS-PAGE 电泳分析。红点处指示的为目的蛋白。Marker M 是蛋白质分子量标准（NEB #P7703）
该专利产品的成分为蛋白质与缓冲液，当 PURExpress 系统合成或 E. coli S30 提取的目的蛋白具有较多二硫键时，能帮助其正确折叠。在合成反应开始时加入 PURExpress 二硫键增强剂，能够协助半胱氨酸硫醇的氧化，并纠正硫醇的错误氧化，从而提高可溶性蛋白及具有功能活性蛋白的产量。
PURexpress 二硫键增强剂。（PDBE）促进活性 vtPA 的正确折叠。反应按照 PURExpress 系统说明进行，以 vtPA DNA 为模板。37℃ 下温育 2 小时后，取 5 μl 反应液进行活性检测，在 1 小时内监测发光底物的剪切反应。
此试剂盒中移除了核糖体，使得研究蛋白翻译的用户能够使用自己的修饰核糖体。试剂盒还提供单独一管的对照核糖体（2 次反应用量）。
释放因子通过识别 mRNA 序列上的终止密码子参与蛋白翻译的终止过程。采用 PURExpress 进行核糖体展示实验时，缺乏释放因子能够稳定 mRNA-核糖体-新生肽链形成的三元复合体。因此 cDNA 的回收率会更高。该试剂盒单独提供三种释放因子，用户能够自行选择在有或无释放因子的条件下进行蛋白质体外合成或核糖体展示。
该试剂盒单独提供 tRNA 与氨基酸，用户能够向反应体系中加入修饰过的氨基酸与 tRNA 混合液进行蛋白质合成反应。
大肠杆菌的 70S 核糖体由一个小亚基（30S）与一个大亚基（50S）组成。该核糖体试剂在 NEB 的 PURExpress体外蛋白合成试剂盒（NEB #E6800）中活性很高，在核糖体结构与功能研究中，能够用于药物筛选的靶标以及分离天然核糖体 RNA（5S、16S、23S）的起始材料。该产品溶液浓度为 33.3 mg/ml。
1.5 mg/ml
一种亲和介质，能少量分离纯化与 MBP（麦芽糖结合蛋白）相融合的目的蛋白。本品通过将 Amylose 共价耦联到一种顺磁颗粒上而形成，由于该共价结合可以在很宽的 pH 范围内保持稳定，使得 Amylose 磁珠可以从细胞培养上清液中分离 MBP 融合蛋白。随后，被磁珠结合的融合蛋白可以从细胞裂解液中捕获与之发生相互作用的靶蛋白。
Amylose 磁珠是直径约为 10 μm 的超顺磁微粒。
1 mg Amylose 磁珠能结合 ≥ 10 μg MBP 融合蛋白。
mRNA 磁性分离试剂盒
一种亲和介质，能少量分离纯化与 CBD（Chitin Binding Domain）融合的目的蛋白。由于该磁珠有一个磁力核心，因此可以从细胞培养上清液中磁力分离与 CBD 融合的蛋白。再生之后磁珠不会影响结合能力。随后，被磁珠结合的融合蛋白可以从细胞裂解液中捕获与之发生相互作用的靶蛋白。
一种亲和介质，能少量分离纯化与 MBP（麦芽糖结合蛋白）相融合的目的蛋白。本品通过将 Amylose 共价耦联到一种顺磁颗粒上而形成，由于该共价结合可以在很宽的 pH 范围内保持稳定，使得 Amylose 磁珠可以从细胞培养上清液中分离 MBP 融合蛋白。随后，被磁珠结合的融合蛋白可以从细胞裂解液中捕获与之发生相互作用的靶蛋白。
Amylose 磁珠以 25 mg/ml 的浓度悬浮贮存于含 20% 乙醇的水溶液中。
几丁质磁珠是直径约为 50-70 μm 的顺磁微粒。
Amylose 磁珠是直径约为 10 μm 的超顺磁微粒。
100 μl 几丁质磁珠能结合 30-50 μg CBD 融合蛋白。
1 mg Amylose 磁珠能结合 10-20 μg MBP 融合蛋白。
直径 1 μm 的无孔超顺磁性微粒。
请注意：该产品已停产，库存售完为止，替代产品为P7718.
无核酸内切酶、外切酶和 RNase 污染。
200,000 units/ml。
链霉素亲和磁珠由 1 μm 超顺磁颗粒与高纯度链霉亲和素共价结合形成。磁珠可用于捕获生物素标记的底物，包括生物素标记的抗原、抗体和核酸。生物素-链霉亲和素相互作用的结合常数为 Ka = 1015 M-1，再加上链霉亲和素的高特异性，使得捕获的底物可满足后续实验要求，包括 mRNA 分离、捕获一抗、二抗抗体。
1 μm 无孔超顺磁微粒（#S1420）或 2 μm 无孔超顺磁微粒（#S1421）。
关于本产品特点与应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。
禽骨髓母细胞瘤病毒（AMV）。
无核酸内、外切酶和 RNase 污染。
10,000 units/ml。
Blue Loading Buffer Pack
NEB 提供一系列非预染、蓝色预染和彩色预染（有两种预染颜色的条带方便辨认）的高纯度的蛋白Standard。蛋白标准分子量范围覆盖 10-250 kDa，可以用作多种表达蛋白的准确分子量评估参照。NEB蛋白 Standard 条带清晰，间距适当，易于辨认。
用于样品分子量精确判断时，请使用 NEB 非预染蛋白 Standard，宽范围。
抗 MBP 磁珠
几丁质磁珠：一种亲和介质，能少量分离纯化与 CBD（Chitin Binding Domain）融合的目的蛋白。由于该磁珠有一个磁力核心，因此可以从细胞培养上清液中磁力分离与 CBD 融合的蛋白。再生之后磁珠不会影响结合能力。随后，被磁珠结合的融合蛋白可以用于从细胞裂解液中捕获与之发生相互作用的靶蛋白。
200,000 units/ml。
2 μm 无孔超顺磁微粒。
无核酸内、外切酶和 RNase 污染。
15,000 units/ml。
NEB 提供一系列非预染、蓝色预染和彩色预染（有两种预染颜色的条带方便辨认）的高纯度的蛋白Standard。蛋白标准分子量范围覆盖 10-250 kDa，可以用作多种表达蛋白的准确分子量评估参照。NEB蛋白 Standard 条带清晰，间距适当，易于辨认。
Blue Loading Buffer Pack
用于样品分子量精确判断时，请使用 NEB 非预染蛋白 Standard，宽范围。
2 μm 无孔超顺磁微粒。
1 ml Protein A 或 Protein G 磁珠结合 > 280 μg 人 IgG。
关于本产品特点与应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。
模板置换反转录酶和其相应的反应缓冲液能够在反转录反应中有效地实现模板置换。混合液中含有独特的反转录酶和小鼠 RNase 抑制剂。与竞争对手的反转录酶产品不同，NEB 的产品不需要添加任何添加剂（如 PEG 或甜菜碱）来优化性能，从而简化了反应建立流程。与模板置换寡核苷酸（TSO）搭配使用， 合成的 cDNA 3’端可以选择性地加入已知序列。由此获得的 cDNA 可进行 PCR 扩增，也可作为 5’RACE（ cDNA 末端快速扩增）或第二链 cDNA 合成的模板。
以极低起始量模板（单细胞/细胞核或 2 pg 总 RNA）制备 RNA-seq 文库
|
储存温度(℃) |
浓度 |
|
|
模板置换反转录缓冲液 |
-20 |
4 X |
该产品于 2021 年 12 月 15 日停产，替代产品包括 Protein A 磁珠（NEB #S1425）和 Protein G 磁珠（NEB #S1430）
一种亲和介质，能少量分离纯化兔 IgG。羊抗兔 IgG 共价耦联到无孔顺磁颗粒上，此二抗能与兔 IgG 各种亚型的重链相结合，适合用兔的初级多克隆抗体 IgG 的免疫实验，还可以用兔 IgG 抗体定义细胞表面抗原来对细胞进行分离和分类。
一种亲和介质，能少量分离纯化小鼠 IgG。羊抗小鼠 IgG 共价耦联到无孔顺磁颗粒上，此二抗能与小鼠 IgG 各种亚型的重链相结合，适合用小鼠的初级单克隆抗体 IgG 的免疫实验，还可以用小鼠 IgG 抗体定义细胞表面抗原来对细胞进行分离和分类。
一种亲和介质，能少量分离纯化大鼠 IgG。羊抗大鼠 IgG 共价耦联到 1 μm 无孔顺磁颗粒上，此二抗能与大鼠的初级单克隆 IgG Fc 亚单位结合，适用于大鼠初级单克隆抗体 IgG 的免疫实验，还可以用大鼠 IgG 抗体定义细胞表面抗原来对细胞进行分离和分类。
直径 1 μm 的无孔超顺磁微粒。
1 mg 磁珠能结合 5 μg IgG。
注意：#S1316 5´ 末端未磷酸化。
该产品于 2021 年 12 月 15 日停产，替代产品包括 Protein A 磁珠（NEB #S1425）和 Protein G 磁珠（NEB #S1430）
直径 1 μm 的无孔超顺磁微粒。
1 mg 磁珠能结合 5 μg IgG。
Oligo d(N)n 引物适用于 mRNA 的扩增和测序，能与 mRNA 的 3´ -poly A 尾或带尾的 cDNA 退火。
注意：#S1316 5´ 末端未磷酸化。
该产品于 2021 年 12 月 15 日停产，替代产品包括 Protein A 磁珠（NEB #S1425）和 Protein G 磁珠（NEB #S1430）
一种亲和介质，能少量分离纯化兔 IgG。羊抗兔 IgG 共价耦联到无孔顺磁颗粒上，此二抗能与兔 IgG 各种亚型的重链相结合，适合用兔的初级多克隆抗体 IgG 的免疫实验，还可以用兔 IgG 抗体定义细胞表面抗原来对细胞进行分离和分类。
一种亲和介质，能少量分离纯化小鼠 IgG。羊抗小鼠 IgG 共价耦联到无孔顺磁颗粒上，此二抗能与小鼠 IgG 各种亚型的重链相结合，适合用小鼠的初级单克隆抗体 IgG 的免疫实验，还可以用小鼠 IgG 抗体定义细胞表面抗原来对细胞进行分离和分类。
一种亲和介质，能少量分离纯化大鼠 IgG。羊抗大鼠 IgG 共价耦联到 1 μm 无孔顺磁颗粒上，此二抗能与大鼠的初级单克隆 IgG Fc 亚单位结合，适用于大鼠初级单克隆抗体 IgG 的免疫实验，还可以用大鼠 IgG 抗体定义细胞表面抗原来对细胞进行分离和分类。
直径 1 μm 的无孔超顺磁微粒。
1 mg 磁珠能结合 5 μg IgG。
注意：#S1316 5´ 末端未磷酸化。
有关该产品特性和应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。
Oligo d(N)n 引物适用于 mRNA 的扩增和测序，能与 mRNA 的 3´ -poly A 尾或带尾的 cDNA 退火。
注意：#S1316 5´ 末端未磷酸化。
有关该产品特性和应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。
磁性分离架是专为使用磁珠进行少量分离而设计的产品。磁体位于分离架侧壁，可减少移液过程中样本的损失。
钕永磁材料。
6-管磁力架 (3″ x 2″ x 1¾”), 12-管磁力架 (5½” x 2″ x 1¾”), 50 ml 磁力架 (3½” x 4¼” x 3½”) 和 96 孔微孔板磁性分离架 (5½” x 1¼” x 3¾”)。
Oligo d(N)n 引物适用于 mRNA 的扩增和测序，能与 mRNA 的 3´ -poly A 尾或带尾的 cDNA 退火。
注意：#S1316 5´ 末端未磷酸化。
有关该产品特性和应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。
钕永磁材料。
6-管磁力架 (3″ x 2″ x 1¾”), 12-管磁力架 (5½” x 2″ x 1¾”), 50 ml 磁力架 (3½” x 4¼” x 3½”) 和 96 孔微孔板磁性分离架 (5½” x 1¼” x 3¾”)。
表中所描述的连接方法都有过报道，但可能需要进一步优化。
无核酸内切酶、核酸外切酶污染。
T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链（双链或单链 DNA 或 RNA）的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶（NEB #M0201）还具有 3´ 磷酸酶活性，将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶（NEB #M0236）具有所有激酶的活性，但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。
重组 E. coli 菌株，克隆有 T4 多聚核苷酸激酶基因。
达到最佳酶活力，需要新鲜缓冲液（在旧缓冲液中，由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力）。
放射性标记反应：50 μl 反应体系中，用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。
CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。
DNA 或 RNA 磷酸化反应（放射性和非放射性）操作流程请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率，可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前，先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟，然后冰上冷却，并加入 5%（w/v）的 PEG-8,000。
T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性，但是为了适用于高活力的放射性标记反应，在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。
T4 多聚核苷酸激酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
1 单位即 1 个 Richardson 单位，指 37℃条件下，30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量（1）。
10,000 units/ml。
关于该酶性质和产品应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。
携带 T4 RNA 连接酶 1 基因的 E. coli 菌株。
pCp 的连接需要加入终浓度为10%（v/v）的 DMSO。
10,000 或 30,000 units/ml。
10,000 units/ml。
200,000 units/ml。
无核酸内切酶、核酸外切酶污染
50,000 units/ml。
无核酸内切酶和核酸外切酶污染。
2,000 units/ml。
无核酸内切酶和外切酶污染。
5,000 units/ml。
5,000 units/ml。
与 0.1% SDS 一起温育足以失活 RNase HII。
请注意：该产品已停产，库存售完为止，替代产品为M0525
DNA 和 RNA 的去磷酸化
小牛肠碱性磷酸酶（CIP）催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外，CIP 水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸（NTP 和 dNTP）。CIP 在分子生物学研究中应用广泛，如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团，用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中，对线性载体去磷酸化，防止自连。该酶可以作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端。CIP 也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP，用于制备测序模板和 SNP 分析。
小牛肠粘膜。
小牛肠碱性磷酸酶（CIP）经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
1 单位指在 1 ml 反应体系中，37℃ 条件下，1 分钟催化 1 μmol 的对硝基苯磷酸盐（PNPP）水解成对硝基苯酚所需的酶量。
10,000 units/ml。
关于该酶性质和产品应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。
无核酸内切酶、核酸外切酶污染。
5,000 units/ml。
5´ 去腺苷化酶是由酿酒酵母（S. cerevisiae）的 HNT3基因编码。 NEB 研究显示该蛋白能从 DNA 和 RNA的 5´ 末端去腺苷化，余下 5´ 末端磷酸。它也能切割 AppppA 生成 ATP 和 AMP。未检测出其对 lysylAMP 有作用。
50,000 units/ml。
通用 miRNA 克隆接头
T4 Rnl2tr KQ 是 T4 RNA 连接酶 2，截短型（NEB#M0242）的双点突变体。 K227 的突变降低了赖氨酰腺苷化。由于降低了 T4 Rnl2tr 从接头将腺苷基团转移到 RNA 5´ 磷酸基的活性， K227Q 可以减少 T4 Rnl2tr 非特异性的连接（串联体和环）。在 T4 Rnl2tr K227Q 中进一步突变 R55K，提高了酶的连接活性，使其与野生型 T4 Rnl2tr 连接活性水平一致。
因为不再使用 ATP，而改用预腺苷化接头，同时降低赖氨酰腺苷化酶的活性，所以连接反应的背景可以降至最低。该酶已用于二代测序 Small RNA的文库构建中，优化了接头的连接过程。
200,000 units/ml。
纯化自携带有 RppH 基因的 E. coli 菌株。
10X NEBuffer 2。
5,000 units/ml。
T4 Rnl2tr KQ 是 T4 RNA 连接酶 2，截短型（NEB#M0242）的双点突变体。 K227 的突变降低了赖氨酰腺苷化。由于降低了 T4 Rnl2tr 从接头将腺苷基团转移到 RNA 5´ 磷酸基的活性， K227Q 可以减少 T4 Rnl2tr 非特异性的连接（串联体和环）。在 T4 Rnl2tr K227Q 中进一步突变 R55K，提高了酶的连接活性，使其与野生型 T4 Rnl2tr 连接活性水平一致。
因为不再使用 ATP，而改用预腺苷化接头，同时降低赖氨酰腺苷化酶的活性，所以连接反应的背景可以降至最低。该酶已用于二代测序 Small RNA的文库构建中，优化了接头的连接过程。
重组 E. coli 菌株，携带有 MBP 融合表达的质粒，该质粒克隆有含编码 T4 RNA 连接酶 2 的前249 个氨基酸序列。 T4 Rnl2tr K227Q 是将 227 位的赖氨酸突变为谷氨酸。 T4 Rnl2tr KQ 分别在 55 和 位置进行了突变，精氨酸突变为赖氨酸、赖氨酸突变为谷氨酰胺。
10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000
无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶的污染。
200 单位指 10 μl 反应体系中，25℃ 条件下，1 小时能将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端 [miRNA 通用克隆接头（NEB #S1315）] 所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。
200,000 units/ml。
有关该产品特性和应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。
催化 3´ →5´ 磷酸二酯键的形成，使核苷酸的 5´ -磷酸末端和 3´ -羟基末端连接，伴随着 ATP 水解为 AMP 和 PPi。作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸。
携带 T4 RNA 连接酶 1 基因的 E. coli 菌株。
pCp 的连接需要加入终浓度为10%（v/v）的 DMSO。
10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
10 mM ATP（NEB #M0204中包含）或 100 mM ATP（NEB #M0437中包含）50% PEG 8000
无单链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 和磷酸酶污染。
1 单位指 37℃ 条件下，30 分钟内将 1 nmol 的 5´ -[32P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。
10,000 或 30,000 units/ml。
有关该产品特性和应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。
连接单链 RNA 或单链 DNA 的 3´ -磷酸基团或 2´ ,3´ -环磷酸基团连接到单链 RNA 的 5´ -羟基上
含有匹配末端的单链 RNA 环化
来源于 E. coli 的 RtcB 连接酶能将单链线性RNA 分子中的 3´ -磷酸基或 2´ , 3´ -环磷酸基团与另一个 RNA 分子的 5´ -羟基进行连接。连接反应需有 GTP 和 MnCl2 的参与，并在反应过程中会形成反应中间体-鸟苷酸。如底物末端含有 2´ , 3´ -环磷酸基团，需先行水解成 3´ -磷酸基，然后再通过 GMP 进行 3´ 末端活化和连接。
重组 E. coli 菌株，携带有 His 标签的 RtcB 连接酶基因。
1X RtcB 反应缓冲液 [50 mM Tris-HCl (pH8.3 @ 2℃), 75 mM KCl, 3 mM MgCl2, 10 mM DTT]，补加0.1 mM GTP 和 1 mM MnCl2。 37℃ 温育。
无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶的污染。
15 μM
有关该产品特性和应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。
耐热 RNaseH 特异性识别并切割 RNA-DNA 杂交体中 RNA 序列的磷酸二酯键，同时保持DNA 序列完整。这种热稳定的核酸酶具有与大肠杆菌 RNaseH 相同的酶学性质，但在更高的温度下具有活性。
Sce PUS1 用于在体外将单链 RNA 中尿嘧啶转化为假尿嘧啶
Sce PUS1 是一款独立的酶，不需要 RNA 向导或辅助因子即可修饰 RNA
使用 Sce PUS1 对特定序列进行假尿苷修饰可以替代通过 RNA 聚合酶随机掺入修饰核苷酸的方法
该酶是创新酶（Enzyme for Innovation, EFI）。创新酶工程由 NEB 发起，旨在为科研界提供独一无二的酶，从而为新的创新应用的发现创造条件。这些酶均具有独特的功能和特性。
Sce 假尿嘧啶合成酶 I（Sce PUS1）可将单链 RNA 中尿嘧啶转化为假尿嘧啶，对单链 RNA 中尿嘧啶的转化率高于双链 RNA。最佳底物为≥15 nt无特殊结构的 RNA。
NudC 是 NUDIX 焦磷酸酶家族中的一员，可高效水解带 NAD+ 帽 和 NADH 帽的 RNA，生成连接可用的带 5′ 单磷酸末端的 RNA（NAD+ 脱帽或去除 NAD）（1）。研究表明：nudC 基因的缺失增加了大肠杆菌中 NAD+ 帽化 RNA 的比例（2）。
1. Frick D.N. and Bessman M.J. (1995). J. Biol. Chem. 270, 1529-1534.
2. Cahová, H. et al. (2015). Nature. 519, 374-377.
3. Höfer K. et al. (2016). Nat Chem Biol. 12, 730-734.
4. Vvedenskaya I.O., et al (2018). Mol Cell. 70, 553-564.e9.
无核酸内切酶、核酸外切酶和 RNase 污染。
40,000 units/ml。
携带有鼠源 RNase 抑制剂基因的 E. coli 菌株。
无核酸内切酶、核酸外切酶和 RNase 污染。
40,000 units/ml。
氧钒核糖核苷复合物是通过 Berger 改良方法将四种 rNTP 的等摩尔混合物与氧化钒 IV 混合而成（1）。每一批复合物都要经过氧化钒 V 成分以及 RNase 活性抑制的检测。
该产品已停产，推荐替代产品为 NEBNext Ultra II RNA 文库制备试剂盒（NEB#E7760）或 NEBNext Ultra II RNA 文库制备试剂盒 – 含纯化磁珠（NEB#E7770）。
– RNA Sample Preparation
– Second Strand Synthesis of cDNA
The NEBNext Ultra II Non-Directional RNA Second Strand Synthesis Module has been optimized to generate double-stranded cDNA from first-strand cDNA, as part of the NEBNext non-directional RNA library preparation workflow.
The NEBNext Ultra II Non-Directional RNA Second Strand Synthesis Module is Designed for Use with the
Following:
– NEBNext Ultra II RNA First Strand Synthesis Module (NEB #E7771)
– NEBNext Ultra II End Repair/dA-Tailing Module (NEB #E7546)
– NEBNext Ultra II Ligation Module (NEB #E7595)
– NEBNext Ultra™ II Q5® Master Mix (NEB #M0544)
– NEBNext® Oligos for Illumina® (NEB #E7335, #E7500, #E7710, #E7730, #E6609, #E7600,
#E7535, #E7350)
NEBNext® Second Strand Synthesis Enzyme Mix
NEBNext® Second Strand Synthesis Reaction Buffer
The NEBNext® Magnesium RNA Fragmentation Module has been optimized to fragment RNA into small
pieces by incubation with Magnesium ions at 94˚C. Fragment size is controlled by incubation time (Figure 1), and the reaction is ended by the addition of NEBNext Fragmentation Stop Solution.
NEBNext® RNA Fragmentation Buffer
NEBNext RNA Fragmentation Stop Solution
NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 2
ssDNA 接头腺苷酸化的客户，请选用 5´ DNA 腺苷化试剂盒
NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 1
NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 2
ssDNA 接头腺苷酸化的客户，请选用 5´ DNA 腺苷化试剂盒
每个试剂盒都通过对基因组 DNA、ChIP DNA 和 mRNA 进行文库构建，并在 Illumina 平台测序进行验证。
提高连接效率
极大降低接头二聚体
增加文库产量
增加样品识别特异性 （双端检索）
大量单端检索/可用检索
提供检索表和样本示例表
每个试剂盒都通过对基因组 DNA、ChIP DNA 和 mRNA 进行文库构建，并在 Illumina 平台测序进行验证。
– Accurate retention of transcript strand of origin information
– Utilizes dUTP-based methodology
– Low input amounts (as low as 10ng purified mRNA or ribosomal-depleted RNA, or 100ng Total RNA)
– Fast workflow (4.5 – 5 hours), with minimal hands-on time
– Robust, reliable performance
– Ultra high fidelity amplification with minimized GC bias
The NEBNext® Ultra™ Directional RNA Library Prep Kit for Illumina® contains reagents for preparation of strand-specific RNA libraries for Illumina sequencing. Please note that adaptors, primers, rRNA depletion
reagents and poly(A) mRNA isolation reagents are not included in the kit and are available separately.
Ultra Directional RNA Library Preparation for Illumina
NEBNext Poly(A) mRNA 磁性分离模块可以从分离的总 RNA 中提取完整的 poly(A)+ RNA。这个技术的原理是将 Oligod(T)25 与 1 μm 顺磁性磁珠偶联后，以此为固相支持物直接结合 poly(A)+ RNA。利用此方法可以进行多个样本的分离，也适用于自动化高通量分离。此外，磁性分离技术可得到较小体积的完整 RNA 洗脱液，不需要再从洗脱液中沉淀 poly(A)+ RNA。因此在 1 小时内就能分离得到体现原始样品中 mRNA分布特性的完整 poly(A)+ RNA。
每个试剂盒都通过对基因组 DNA、ChIP DNA 和 mRNA 进行文库构建，并在 Illumina 平台测序进行验证。
– Low input amounts (as low as 10ng total RNA, purified mRNA or ribosomal-depleted RNA)
– Fast workflow (5 – 5.5 hours), with minimal hands-on time
– Robust, reliable performance
– Ultra high fidelity amplification with minimized GC bias
The NEBNext® Ultra™ RNA Library Prep Kit for Illumina® contains reagents for preparation of non-directional RNA libraries for Illumina sequencing. Please note that adaptors, primers, rRNA depletion reagents and poly(A) mRNA isolation reagents are not included in the kit and are available separately.
Ultra Non-directional RNA Library Preparation for Illumina
ssDNA 接头腺苷酸化的客户，请选用 5´ DNA 腺苷化试剂盒
每个试剂盒都通过对基因组 DNA、ChIP DNA 和 mRNA 进行文库构建，并在 Illumina 平台测序进行验证。
NEBNext Ultra II RNA 定向文库制备试剂盒
NEBNext Ultra II RNA 定向文库制备试剂盒 – 含纯化磁珠
NEBNext Ultra II RNA 文库制备试剂盒
NEBNext Ultra II RNA 文库制备试剂盒 – 含纯化磁珠
在您的 RNA 测序实验中，是否对灵敏度和特异性有更高的要求？您的测序反应中是否有起始 RNA样本量非常低的情况？为了应对这些挑战，我们的二代测序 RNA 文库制备试剂盒在流程的每一步上都进行了配方的优化，使文库产量得到成倍的增长、起始样本量要求更低、PCR 循环数更少。这些试剂盒工作流程经过改进，更加适合于自动化操作。既有定向（链特异性，使用“dUTP 方法”）文库制备，又有非定向文库制备，还可提供 SPRISelect 磁珠进行片段筛选和纯化。
NEBNext Ultra II RNA 定向文库制备试剂盒
NEBNext Ultra II RNA 定向文库制备试剂盒 – 含纯化磁珠
NEBNext Ultra II RNA 文库制备试剂盒
NEBNext Ultra II RNA 文库制备试剂盒 – 含纯化磁珠
在您的 RNA 测序实验中，是否对灵敏度和特异性有更高的要求？您的测序反应中是否有起始 RNA样本量非常低的情况？为了应对这些挑战，我们的二代测序 RNA 文库制备试剂盒在流程的每一步上都进行了配方的优化，使文库产量得到成倍的增长、起始样本量要求更低、PCR 循环数更少。这些试剂盒工作流程经过改进，更加适合于自动化操作。既有定向（链特异性，使用“dUTP 方法”）文库制备，又有非定向文库制备，还可提供 SPRISelect 磁珠进行片段筛选和纯化。
在免疫沉淀实验流程中富集经 m6A修饰的 RNA
经富集的 RNA 可直接用于 NGS 或RT-qPCR
有关该产品特性和应用的上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375。
N6-甲基腺苷抗体是由 Cell Signaling Technology, Inc.生产，由 New England Bio-labs, Inc. 销售。