细胞增殖-毒性检测–CCK-8试剂盒,同仁Dojindo CK04

cell counting kit-8 简称cck-8试剂盒,为mtt法的替代方法,是一种基于wst(水溶性四唑盐,化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2h-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏等试验
使用说明:
一、制作标准曲线(测定细胞具体数量时)
1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。
2、按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每组3-6个复孔。
3、接种后培养至细胞贴壁,然后加cck-8试剂培养一定时间后测定od 值,制作出一条以细胞数量为横坐标(x 轴),od 值为纵坐标(y 轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入cck-8后的培养时间。)
二、细胞活性检测
1、在96孔板中接种细胞悬液(100μl/孔)。将培养板放在培养箱中预培养(在37℃,5% co2的条件下)。
2、向每孔加入10μl cck-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响od值的读数)。
3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
5、如果暂时不测定od值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μl 0.1m的hcl或者1%sds(w/v)溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。
三、细胞增值-毒性检测
1、在96孔板中配置100 μl 的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(在37 ℃,5% co2的条件下)。
2、向培养板加入10μl不同浓度的待测物质。在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。
3、向每孔加入10 μl cck-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响od值的读数)。如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加cck-8之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。
4、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
5、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
6、如果暂时不测定od 值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μl 0.1m的hcl或者1%sds(w/v)溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。

活力计算:.
细胞活力(%)=[a(加药)-a(空白)]/[ a(0加药)-a(空白)]×100
a(加药):具有细胞、cck-8溶液和药物溶液的孔的吸光度
a(空白):具有培养基和cck-8溶液而没有细胞的孔的吸光度
a(0 加药):具有细胞、cck-8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力
注意事项:
①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入cck-8试剂后的培养时间。
②白细胞可能需要培养较长时间。
③当使用标准96 孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1 ,000个/孔 (100 μl培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 ( 100 μl培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10% 加入cck-8溶液。
④如果没有450nm的滤光片,可以使用吸光度在430-490 nm 之间的滤光片,但是450nm检测灵敏度最高。
⑤培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。

【100T】Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST

CK12-100T

操作简便,通过2种方法检测细胞毒性的LDH检测试剂盒。换液不换液都可使用。

CCK-8反应终止液

Stop Solution for CCK-8

货号:CK13

Cell Counting Kit-Luminescence试剂盒

货号:CK18-200tests*3

ATP是生物体内最直接的能量来源,在肌肉收缩、代谢反应、主动运输等方面被广泛使用,甚至被称作生物体内的能量货币。同仁化学研究所开发的Cell Counting Kit-Luminescence试剂盒是一种通过Luciferase来确定细胞中的腺苷三磷酸(ATP)的细胞增殖-毒性检测试剂盒。

本试剂盒只需将各试剂混合后加入孔板,10 分钟后即可检测。不需要去除培养基、清洗细胞等复杂的操作。此外,本试剂盒还有诸如发光的半衰期在3 小时以上、数据的重现性高 、兼容96孔板 、384孔板的多样品检测等诸多优点。

日本DOJINDO,同仁化学,CCK-8试剂盒,超氧阴离子和羟自由基检测ESR,DMPO

cell counting kit-8细胞增殖毒性检测试剂盒cck-8(cck8)

cell counting kit-8是用于化学药物等对细胞增殖或毒性实验时进行细胞计数的试剂盒。试剂盒中使用高灵敏度的新型水溶性四唑盐wst-8甲臜染料作为显色底物,与传统的细胞计数试剂盒相比,灵敏度大幅度的提高。wst-8被细胞内的脱氢酶还原产生水溶性的甲臜染料。通过直接测量甲臜染料(450 nm)的吸光度,即可测出活细胞的数量。细胞数量与甲臜染料成正比关系。同时试剂盒为配置好的1瓶溶液,易于使用。

产品特点

1)对比[3h]法,无需放射性同位素。

2)使用水溶性四唑盐与水溶性甲臜染料,因此无需dmso换液操作步骤。(如mtt分析等需要)

3)与其他水溶性四唑盐法(xtt,mts)相比,灵敏度更高的同时毒性更低。

4)试剂盒为1瓶装,无需提前配置,无需准备其他试剂。

5)试剂盒稳定性高。

6)试剂可以与酚红同时使用。

TPPS,T003-1g

TPPS是水溶性卟啉,在pH 6.5的水溶液中为红紫色(最大波长:413 nm,摩尔吸光系数:5.1×105),pH 4时呈绿色(最大波长:434 nm,摩尔吸光系数:5.0×105)。据报道,它的质子解离常数为pKa1=4.86,pKa2=4.96。TPPS在酸性条件下选择性地与Cu2+形成复合物,在碱性条件与Cd、Cu、Fe、Pb和Pd形成复合物。

超氧阴离子和羟自由基检测(ESR)——DMPO

DMPO (货号: D048)
同仁化学研究所 (Dojindo) 的DMPO没有杂质 (*) 检出
以羟自由基的Fenton反应(黑色)和空白(蓝色)为例
同仁化学研究所(Dojindo)的峰更清晰,S/N比例更高
Ⅰ. 概述
活性氧具有调节许多重要细胞功能的作用,它和人体衰老、多种人类疾病,如癌症、糖尿病有关。自旋捕捉ESR技术
是一种检测活性氧的最可靠的办法,它能提供具有特征的ESR信号。DMPO采用一种特殊的敏感方法,可以捕捉超氧
阴离子和羟自由基等,分别产生独特的ESR光谱。因此它是探测生物系统内ROS的强有力工具。同仁化学研究所的
DMPO具有很高的纯度,和其他产品相比,它的最大优点是使用前不需要再纯化,使您的ESR检测变得更容易。
Ⅱ. 常规参数
名称:5,5-Dimethyl-1-pyrroline N-oxide
性状:无色液体
纯度:≥99% (GC)
分子量:113.16,C6H11NO
保存条件:-20℃,防潮,避光
运输条件:蓝冰
CAS:3317-61-1

CCK8试剂盒,cck-8细胞增殖毒性检测试剂盒,日本同仁,日本DOJINDO

ck8试剂盒日本同仁 cck-8细胞增殖毒性检测试剂盒
cell counting kit-8(cck-8试剂盒)是由同仁化学研究所(dojindo)开发的检测细胞增殖、细胞毒性的试剂盒,为mtt法的替代方法,试剂盒中采用自己开发的水溶性四唑盐-wst-8,在美国,欧洲等国家地区均持有专利,同仁化学研究所于2006年在中国获得了wst-8的注册商标。
日本同仁 细胞增殖-毒性检测试剂盒ck04cck-8 wst-8 500次/盒
与普通的mtt法相比,cck8试剂盒日本同仁具有显著特点:
★灵敏度高,数据可靠,重现性好
★操作简便,省时省力
★水溶性,不需要换液,尤其适合于悬浮细胞
★无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低
★为1瓶溶液,毋需预制,即开即用
★适合于高通量药物筛选
cck-8用途:药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验

规格: 500孔 产品货号: ck04
规格: 1000孔 产品货号: ck04
规格: 3000孔 产品货号: ck04
规格: 10000孔 产品货号: ck04

本公司还提供以下产品:
特级胎牛血清(fetal bovine serum, certified) gibco16000-044 美洲血源 500ml 现货特价
优级胎牛血清(fetal bovine serum, qualified) gibco10099-141 澳洲血源 500ml 现货特价
特级胎牛血清 fetal bovine serum (fbs) 产地:美国 hyclone sh30070.03 500ml 现货特价
胎牛血清(fetal bovine serum) hyclone sv30087.02 南美血源 500ml 现货特价
胎牛血清(fetal bovine serum) hyclone sv30087.01 南美血源 100ml 现货特价
供体马血清 hyclone sh30074.02 100ml 现货特价优质胎牛血清(fetal bovine serum gold) paa a15-151 500ml 现货特价
普通胎牛血清(fetal bovine serum standard quality) paa a15-101 500ml 现货特价
hyclone 30087.01(南美普通胎牛血清)100ml
hyclone 30087.02(南美普通胎牛血清)500ml
hyclone 30084.03(澳洲血源)500ml
hyclone 30070.03(北美特级胎牛血清)500ml
hyclone 30396.03(加拿大血源)500ml
gibco 16000-044(美洲血源)500ml
gibco 10099-141(澳洲血源)500ml
gibco c2027050 (南美乌拉圭)500ml
gibco 16141-079 胚胎干细胞专用胎牛血清 500ml
paa a15-101 德国paa 普通胎牛血清 500ml
paa a15-151 德国paa 优级胎牛血清 500ml
美国gibco 26400-044 (gibco透析型胎牛血清) 500ml
美国gibco 16141-079 (gibco干细胞胎牛血清) 500ml
美国gibco 16140-071 (gibco灭活过胎牛血清) 500ml
美国gibco 10439-024 (gibco胚胎干细胞专用胎牛血清) 500ml
sh30070.03e (hyclone干细胞胎牛血清) 500ml
sh30068.03(hyclone活性炭处理胎牛血清) 500ml

Cell Cycle Assay Kit – PI/RNase Staining-无需提前固定细胞周期检测试剂盒 (PI/RNase Staining)

Cell Cycle Assay Kit – PI/RNase Staining试剂盒,可快速完成细胞周期的分析,操作简便,无需固定。本产品使用碘化丙啶 (PI) 作为DNA荧光染料,通过流式细胞术得到细胞周期中G0/G1,G2和S期细胞的比例。

日本DOJINDO,同仁化学,细胞增殖-毒性检测试剂盒CK04,Cell Counting Kit-8(CCK-8)CK04

cck-8试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有w st ® -8 [ 其化学名称为:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2, 4-二磺酸苯)-2h -四唑单钠盐 ] ,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪硫酸二甲酯 ( 1 – m et hoxy pm s ) 的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臢染料 ( form azan dye )。生成的甲臢物的数量与活细胞的数量成正比,因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。
用途:药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验

产品特点
1.简单、安全、重现性好。无需有机溶剂和放射性同位素,步骤少,无损失,结果准确
2.灵敏度高。灵敏度高于mtt、xtth和mts

试剂稳定性比较

 

Cell Counting Kit-8可冷藏保存1年以上,避免试剂浪费!

试剂毒性评价

试剂本身对细胞毒性的比较

HeLa细胞在96孔板中孵育(5000个/孔)。在CO2培养箱中开始显色反应,每隔3、6、24小时在显微镜下观察细胞形态。Cell Counting Kit-8在24小时后细胞形态没有改变。在使用药物进行细胞毒性试验时,应选择测量试剂本身对细胞毒性影响更小的试剂。

Cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞增殖/毒性检测试剂,日本DOJINDO同仁化学产品

Cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞增殖/毒性检测试剂

Cell Counting Kit-8是用于化学药物等对细胞增殖或毒性实验时进行细胞计数的试剂盒。试剂盒中使用高灵敏度的新型水溶性四唑盐WST-8甲臜染料作为显色底物,与传统的细胞计数试剂盒相比,灵敏度大幅度的提高。WST-8被细胞内的脱氢酶还原产生水溶性的甲臜染料。通过直接测量甲臜染料(450 nm)的吸光度,即可测出活细胞的数量。细胞数量与甲臜染料成正比关系。同时试剂盒为配置好的1瓶溶液,易于使用。

CCK-8使用例

CCK-8与LDH

Cell Counting Kit-8 与Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST同时检测细胞毒性

检测药物: Mitomycin C

细胞: HeLa

培养基: MEM, 10% FBS

孵育条件: 37℃, 5% CO2, 48小时

检测波长: Cell Counting Kit-8 (450 nm), Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST® (490 nm)

使用Mitomycin C 检测检测HeLa细胞毒性。通过使用Cell Counting Kit-8和Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST® [货号: CK12]两种方法检测。Cell Counting Kit-8以细胞活性为指标,Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST以游离的LDH为指标,实验证实两种指标检测存在差异性。二者联用,能更全面的表征细胞毒性。

《cck-8法与mtt法相比的显著特点》

★  灵敏度高,数据可靠,重现性好
★  操作简便,省时省力
★  水溶性,不需要换液,尤其适合于悬浮细胞
★  无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低
★  为1瓶溶液,毋需预制,即开即用
★  适合于高通量药物筛选
《cck-8用途》
药物筛选、细胞增殖检测、细胞毒性检测、肿瘤药敏试验
《cck-8毒性》
cck-8和其他检测方法对比可以得出cck-8对细胞几乎无毒性,不伤害细胞,细胞可重复利用。
《原理图》 
cell counting kit-8(cck-8)利用了同仁化学研究所(dojindo)开发的四唑盐——wst-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2h-四唑单钠盐),它在电子载体1-methoxy pms存在的情况下能够被还原成水溶性的甲臜染料。cck-8溶液可以直接加入到细胞样品中;不需要预配各种成分。cck-8法是用于测定细胞增殖或细胞毒性试验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。cck-8被细胞内脱氢酶生物还原后生成的橙色甲臜染料能够溶解在组织培养基中,生成的甲臜量与活细胞数量成正比。wst-8法检测细胞增殖、细胞毒性实验的灵敏度比其它四唑盐如mtt, xtt, mts或wst-1高。由于cck-8溶液相当稳定,并且对细胞没有毒性,因此可以长时间孵育。
《cck-8 检测步骤》
1:向各孔中加入100 μl细胞悬液a)。
2:在37℃下预孵育培养板b)。
3:向各孔中加入各浓度的待测溶液c)10 μl。
4:37℃下孵育。
5:向各孔中加入10 μl的cck-8溶液d)。
6:37℃下孵育1-4小时e)。
7:测定450 nm处的od值。
a) 使用适当的培养基制备50,000-100,000个/ml的细胞悬液。
b) 建议使用co2培养箱过夜预培养。
c) 使用培养基或pbs来制备溶液。
d) 如果待测溶液有还原性,测定不含细胞,但含有cck-8的待测溶液在450 nm处的空白吸光度。
 如果该吸光度很小,则可以直接加入cck-8,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,
 并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的100 μl培养基和10 μl cck-8进行检测。
e) 白细胞可能需要培养较长时间。

Dojindo,日本同仁化学,CCK-8细胞增殖检测试剂盒

cck8法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较

检测方法 mtt xtt wst-1 cck8
甲臜产物的水溶性 差(需加有机溶剂溶解再检测)
产品性状 粉末 2 瓶溶液 溶液 1 瓶溶液
使用方法 配成溶液后使用 现配现用 即开即用 即开即用
检测灵敏度 很高 很高
检测时间 较长 较短 较短 最短
检测波长 560-600nm 420-480nm 420-480nm 430-490nm
细胞毒性 高,细胞形态完全消失 很低,细胞形态不变 很低,细胞形态不变 很低,细胞形态不变
试剂稳定性 一般 较差 一般 很好
批量样品检测 可以 非常适合 非常适合 非常适合
便捷程度 一般 便捷 便捷 非常便捷

Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 利用了Dojindo开发的水溶性四唑盐—WST®-8 (2- (2-甲氧基-4-硝苯基) -3- (4-硝苯 基) -5- (2,4-二磺基苯) -2H-四唑单钠盐),它在电子载体1-Methoxy PMS存在的情况下能够被还原成水溶性的橙黄色甲臜。 CCK-8溶液可以直接加入到细胞样品中,无需配制。CCK-8法是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的 一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。WST®-8被细胞内脱氢酶氧化还原后生成的橙黄色甲臜能够溶解在培养基中 ,生成的甲臜物的数量与活细胞数量成正比。Cell Counting Kit-8是用于化学药物等对细胞增殖或毒性实验时进行细胞计数的试剂盒。试剂盒中使用高灵敏度的新型水溶性四唑盐WST-8甲臜染料作为显色底物,与传统的细胞计数试剂盒相比,灵敏度大幅度的提高。WST-8被细胞内的脱氢酶还原产生水溶性的甲臜染料。通过直接测量甲臜染料(450 nm)的吸光度,即可测出活细胞的数量。细胞数量与甲臜染料成正比关系。同时试剂盒为配置好的1瓶溶液,易于使用。

【3000T】CCK-8细胞增殖毒性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8)